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1、DNS法测还原糖方法一原理DNS即二硝基水杨酸法是利用碱性条件下，二硝基水杨酸（DNS）与还原糖发生氧化还原 反应，生成3-氨基-5-硝基水杨酸，该产物在煮沸条件下显棕红色，540nm处有吸收，且在 一定浓度范围内颜色深浅与还原糖含量成比例关系的原理，用比色法测定还原糖含量的。OHHOOG(DNS)-还原糖OH NH2NO?忖6空氮基- 5杨酸）？桔红色试剂及方法2.1试剂1.1 mg/ml的葡萄糖溶液 2. 3,5-二硝基水杨酸用400mL蒸馏水溶解6.3g3, 5二硝基水杨酸，逐步加入21g氢氧化钠，再加入 182g四水合酒石酸钾钠、5.0g苯酚、5.0g无水亚硫酸钠，温水浴（不超过48C
2、）,不断搅 拌，直至溶液清澈透明。用蒸馏水定容至1000mL,保存在棕色瓶中，与二氧化碳隔绝， 静置57天后使用，贮存期为6个月。2.2葡萄糖标曲的绘制表1葡萄糖标曲的绘制方法试剂012345葡萄糖标准液（ml）00.10.20.30.40.5蒸馏水（ml）0.50.40.30.20.103,5-二硝基水杨酸（ml）0.50.50.50.50.50.5糖含量（mg）00.10.20.30.40.5混合均匀，沸水浴5min,冷却后加入4mL蒸馏水，混匀，在540nm下测OD值2.3发酵液样品测定将发酵液稀释一定倍数后，取3只比色管标号1,2,3,加入稀释和的发酵液0.5 ml，加入DNS 试剂0.5 ml混匀，沸水浴5min,冷却后加入4 ml蒸馏水混匀，测OD540表2样品的测定方法管号012还原糖待测样品（mL）0.00.50.5蒸馏水（mL）0.50.00.0DNS 试齐U （ mL）0.50.50.5蒸馏水（mL）444540 nm计算所得还原糖含量（mg）三结果计算3.1标曲3.2样品的还原糖含量还原糖含量(g/L)=计算得到的还原糖量（mg）加人样品的体积（0.5ml）x稀释倍数
