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1、简易组织芯片仪的制作【关键词】 芯片分析技术； 分子探针技术； 显微镜检查 与传统的病理研究方法相比，组织芯片具有省时、经济、信息量大， 并能节约标本及大大提高实验效率等优点， 应用非常广泛 1 ，但由于 组织芯片机价格昂贵，难以普及推广。笔者利用本科室退役的显微镜 研制组织芯片仪，并用其制作组织芯片，取得很好的效果，现报告如 下。1 材料与方法1.1材料 骨髓穿刺针2支（16G和18G）, 16 W发热元件，温度控制 器 1 个，强力胶水 1 瓶，退役的带有三坐标的显微镜支架 1 台， 45 号 圆钢2段（分别为长104 mm,直径56 mm长40 mm,直径88 mm） 电源线 2 条。1
2、.2 方法打孔针和取样针的制作16G带有M4螺纹的骨髓穿刺针（最小 内径为1.1 mm用于取样；18G带有M4螺纹的骨髓穿刺针（最大外径 为1.3 mm）用于打孔。用砂轮将针尖末端截断（包括芯和鞘），保留 螺纹以下至针尖末端的长度约12 cm取一段内径分别与16G或18G 骨髓穿刺针外径相当的单芯电线绝缘护套,将其相应地紧紧套在 16G 或18G骨髓穿刺针的鞘上，使其下缘与针末端的距离为5 mm塑料外套与针末端的距离可根据供体蜡块的厚度调整,但打孔针和取样针的 外套层和针末端的距离应保持一致（图 1）。上为打孔针,下为取样针 .图1打孔针和取样针的制作Fig 1 Top one is hole
3、 puncture needle and bottom one is sampling n eedle恒温加热装置的制作 根据热学原理设计出蓄热体（由45号圆 钢加工制成）（图2A、B）,内嵌入加热元件（图2C,采用双加热系统， 通过温控装置调节温度，使其保持在（60士 1） C （较石蜡的熔点58 C 稍高），保证打孔针和取样针处于恒温。操作平台和矩阵定位系统的制作利用退役的显微镜，保留机 械和支架系统，利用载物台放置供体蜡块和受体蜡块。用一块厚度为 3 mm勺有机工程塑料板，制成尺状结构，利用强力胶水粘在显微镜的 推进器上，用于蜡块的准确定位（图3）。推进器用于受体蜡块打孔时 前后（X轴）
4、左右（Y轴）的位移，以保证所打的孔矩阵排列整齐。旋 转镜柱上的调节器（粗细螺旋）使镜台作上下方向（Z轴）的移动， 实现打孔和取样深度的准确控制。至此，一台功能基本齐全的组织芯 片仪就改装成功，并可用于组织芯片的制作（图4）。1.3结果 用制作完成的组织芯片仪制作组织芯片，芯片以规则的点 阵方式排列不同的圆形组织芯片样本，排列整齐，无点阵移位现象， 供、受体蜡块紧密融合，经H拟E染色验证，样本组织大小均匀、结构 完整（图5）。2讨论笔者自行研制组织芯片仪，实现废物利用，制作成本低廉；且应用此 组织芯片仪制作组织芯片，简化了对蜡块的烘烤等制作流程，对操作 者的技术要求不高，只要简单培训即可做出高质
5、量的组织芯片。在制作芯片仪的过程中，选择打孔针和取样针时应注意针的孔径，打 孔针的外径要等于或稍大于取样针的内径，但最多不超过0.2 mm以保证供受体蜡块完全融合；打孔针和取样针的有效使用长度应适宜（约 12 cm）,太长导热慢且效果差，而且容易变形，无法保证针的刚性， 太短则无法有效地打孔和取样；塑料外套与打孔针和取样针末端的距 离可根据供体蜡块的厚度调整，但两针的外套层和末端的距离应相等， 保证打孔的深度与所取的组织芯柱的长度一致，使所有待检的组织芯 片在受体蜡块的同一水平面上。在恒温加热装置的设计时将温度控制 在（60 1）C，比石蜡的熔点58 C稍高一些，其目的是：（1）在打 孔和取样
6、的过程中供、受体蜡块不开裂；（2）受体蜡块和所取组织芯 柱能够更好地融合；（3）更好地保留供体组织的抗原性，减少免疫组 化染色时的边缘效应。加热恒温装置的引入，解决了传统手工制作时 烤蜡块“火候”难以掌握的缺点，在制作芯片过程中无需对供、受体 蜡块进行加热，并且在蜡块制成后也不必烤蜡块，就能直接切片，简 化组织芯片的制作流程，降低芯片的制作难度，节约了大量的时间和 精力。用自制的组织芯片仪制作的组织芯片各孔排列整齐，大小均匀。与组织芯片制孔器等相比2,其优点是可根据需要设计不同孔径的打孔、 取样针和调节孔间距，其功能元素可与市售的组织芯片仪相媲美。【参考文献】1孙廷谊，张云汉，孔令非.组织芯片的研制及效果J.郑州大学 学报：医学版，2007,42（1）:116 拟 118.2沈洪武，叶 莉,吴文乔，等.组织芯片制孔器和受体蜡块的制作J. 中 华病理 学杂志，2007,36(9):624.( 编辑：何佳凤)Self 扌以Fabrication of Tissue Chip Instrument
