《烟叶常规测定方法》由会员分享，可在线阅读，更多相关《烟叶常规测定方法（10页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、精品范文模板 可修改删除撰写人：_日 期：_3，5二硝基水杨酸（DNS）比色法测还原糖一、仪器与用具25ml刻度试管；离心管；100ml玻璃烧杯；100ml三角瓶；刻度吸管1ml、2ml、10ml；沸水浴；离心机；电子天平；分光光度计。二、试剂1. 1mg/ml葡萄糖标准液：准确称取100mg分析纯葡萄糖（预先在80烘至恒重），在小烧杯中用蒸馏水溶解后定容至100ml，摇匀，冰箱中保存备用。2. 3,5二硝基水杨酸(DNS)（显色液）： 6.3g3,5二硝基水杨酸和262ml 2mol/LNaOH，加到500ml含有185g酒石酸钾钠的热水溶液中，再加5g结晶酚和5g亚硫酸钠，搅拌溶解。冷却后
2、加蒸馏水定容至1000ml，贮于棕色瓶备用。三、实验步骤：1可溶性糖的提取：准确称取烟叶样品0.100g，置于离心管中，加入8ml80%乙醇，于80水浴浸提30min，冷却后于4000转离心5min收集上清液，残渣再加入8ml80%乙醇，再次浸提，重复两次，将三次提取的上清液合并于100ml容量瓶中并定容至100ml。2标准曲线的绘制：取干洁25ml试管6支，依次加入葡萄糖标准液（1mg/ml）0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml和蒸馏水1.0、0.8、0.6、0.4、0.2、0ml，再分别加入DNS试剂1.5ml，于沸水浴中加热5min，取出后立即浸入冷水冷却至室温，再用蒸馏水定容
3、至25ml刻度处，摇匀，然后在540nm波长处比色 。3还原糖的测定：取提取液1ml于试管中（空白中用1ml蒸馏水代替），加入DNS试剂1.5ml，摇匀，于沸水浴中加热5min，取出后立即浸入冷水冷却至室温定容至25ml，摇匀，然后在540nm波长处比色 。4计算：还原糖（）=（CV/a）/(W1000)100C标准曲线方程求得的还原糖含量mg数； V提取液的体积（ml）； W样品重量（g）;a=0.01注意：1. 在称取烟叶前离心管内先加入4ml80%乙醇，加入烟叶后立即充分摇匀，以防烟叶凝结成块，影响还原糖测定。2. 称取完烟叶后，在浸提之前先混匀后静置10min。3. 在第一次浸提过程中
4、应充分摇匀3-4次，第二次和第三次充分摇匀2次，摇匀之前先将盖子打开，释放管内热蒸汽，以防管内液体喷出。4. 吸取提取液之前应再次摇匀提取液，比色之前也应将待测液充分摇匀后才能进行比色，因为还原糖沉降速度极快，不充分摇匀将严重影响实验数据的准确性。5. 水浴锅内水位必须达到离心管内液面之上6. 比色之前应先检查比色杯空杯（内乘双蒸水）的吸光度是否一致。最好选用差别在0.003之内的比色杯。烟叶中烟碱的测定（提取脱色法）（一）方法原理由于烟碱和无机酸结合较有机酸强，因此，用一定浓度的无机酸提取，完全可以把烟碱从烟叶中分离出来。同时，用粉状活性炭脱去提取液中杂色。然后根据烟碱对紫外光有选择吸收，其
5、吸光度与烟碱含量呈正相关，可由紫外分光光度计测得待测液的浓度，计算出烟碱的含量。（二）试剂及仪器40g/kgHCl：吸取4mLHCl倒人80mL水中，定容至100ml 分析天平、紫外分光光度计、恒温水浴锅。（三）操作步骤1待测液的制备 称取粉碎均匀通过60目筛的烟样30mg左右，置于100mL三角瓶中，加入1/3角勺粉状活性炭和40g/kg HCl 25mL，不断振荡10min，然后过滤到100mL容量瓶中，并少量多次用蒸馏水冲洗三角瓶，将洗液滤入容量瓶中，并定容至刻度，充分摇匀，以备测定用。另把40g/kg HCl25mL加入100mL容量瓶中，用蒸馏水定容后，摇匀做空白。 2测定 将上述待
6、测液置紫外分光光度计上，以空白作参比，调吸光度为零，在236nm、259 nm、282 nm处测定待测液的吸光度。（四）结果计算 1.059A2591/2（A236+A282） 烟碱%100 W（1-水%）34.31000式中 W干样重(g)； 1.059换算为重量法测定值的校正系数； 34.3烟碱的吸光系数。(五)注意事项（1）不要用颗粒状活性炭。（2）及时清洗用具，否则活性炭很难洗干净烟叶中氯含量的测定（浸提法）热蒸馏水法一、 实验原理 依据烟叶中的氯大都以离子状态存在的特点,用热水将氯从烟叶中提取出来,可节省时间、提高效率,但提取液中有影响滴定终点的黄色素。根据碱性醋酸铅常用作液体澄清剂
7、的特点,在用热蒸馏水浸提烟叶中氯的同时,加入碱性醋酸铅,有效去除浸提液中干扰测定的色素,得到一个快速制备氯待测液前处理的简便方法(浸提法)。 在含有C1-的溶液中，以K2C rO 4作指示剂，用AgNO3标淮溶液瘸定，由于AgCl的溶解度比Ag2CrO4小，反过来说，铬酸银的溶液度比AgCl的高，开始时只生成AgCl沉淀，待CI-作为AgCl全部沉淀完毕后，过量一滴AgNO3才生成Ag2CrO4砖红色沉淀。 NaCl十AgNO3_AgC1(乳白色)十NaNO3。 铬酸钾和银盐的反应如下： K2CrO4十2AgNO32KNO3十Ag2CrO4(砖红色) 由消耗的标准硝酸银用量，即可计算出氯离子的
8、含量。二、 试剂与仪器 1.材料 烟叶样品经40烘干,粉碎过60目筛,混匀。 2. 主要仪器和试剂 （1）恒温振荡器及各种玻璃器皿；（2）0.02 mol/L AgNO3标准溶液, 50 g/LK2CrO4，1 g/L酚酞指示剂，200 g/L碱性醋酸铅(pH 8)三、试验方法1. 准确称取1.0000 g烟叶样品,置于150 ml三角瓶中,加入60热蒸馏水50 ml,200g/L碱性醋酸铅2 ml,振荡20 min,2. 待絮状沉淀完全后,过滤到100 ml容量瓶中,冷却后定容至刻度,充分摇匀。3. 吸取滤液10 ml于100 ml三角瓶中,用蒸馏水稀释至30 ml , 用10的H2SO4及
9、12Na2HCO3分别调待测液到微碱性，用酚酞指示剂，微红色为止。4.加入50 g/L K2CrO4指示剂10滴,用0.02 mol/L AgNO3标准溶液滴定,不断摇动,当待测液出现砖红色沉淀时,记下AgNO3的用量,计算测定结果。四、结果计算式中 V滴定时所消耗硝酸银的体积 N硝酸银的当量浓度 W烟叶称祥重量(克)， 0.0355每l毫克当量氯离子的克数 100换算成每100克烟叶中氮的百分含量。五、注意事项1.用铬酸钾做指示剂只能在中性或微碱性溶液中进行，测定溶液应在pH6.510.5之间。这是因为在酸性溶液中，指示剂的铬酸根离子与氢离子发生如下反应：2H+十2CrO4-2HCrO4=C
10、rO4-十H2O因而减低了铬酸根离子的浓度，影响铬酸银沉淀的生成。然而在强碱性溶液中，则银离子与氢氧根离子反应生成氧化银沉淀，又会影响分析结果，其反应如下： 2Ag-十2OH-2AgOH=Ag2O十H2O2.氯离子含量太高时，生成白色氯化银沉淀过多而影响终点，此时可减少待测液吸取量。3.大量硫酸盐存在会对测定发生干扰，当待测液中硫酸根离子存在量在32毫克以下时对本测定一般无干扰。4滴定时要充分摇动：在等当点前C1-没有被滴定完，但有一小部分C1会被AgC1沉淀吸附，特使终点提前，所以要充分摇办使被沉淀吸附的C1释放出来，以获得准确的结果。烟叶中氯含量的测定（浸提法）硫酸法一、实验原理用酸提取烟
11、叶中的氯。二、试剂与仪器1.材料 烟叶样品经40烘干,粉碎过60目筛,混匀2.试剂 0.2mol /LH2SO4 , 0.02 mol/L AgNO3标准溶液, 50 g/LK2CrO410%NaOH, 0.1%酚酞指示剂三、测定步骤（1）氯待测液制备及测定 精密称取经粉碎通过6 0目筛的烟叶样品0.5000g和1.0000g活性炭，置于100 m l干燥的三角瓶中，加入25ml0.2moll-1 H2SO4在25室温下振摇20 min，随即过滤到洗净的50ml容量瓶中，定容摇匀。取20ml于干燥的100 m l三角瓶中，用10%NaOH调滴定液的pH为6.510.5。再滴加5%K2CrO40
12、.4ml摇匀后用标准的0.02mol/LAgNO3滴定至溶液中有砖红色沉淀出现不再消失为止。记下AgNO3用量，然后根据公式计算待测液中氯的百分含量。四、结果计算Cl%=0.035CVN100/W式中：C标准A g N O3浓度mol/L；V-AgNO3用量（ml）N-2.5 W干烟样重（g）；0.035-Cl-的摩尔质量钾含量的测定（浸提法-火焰光度法）硫酸法一、 实验原理用常规法测定烟叶中钾和氯的含量, 前处理分别用干灰化法和碱性干灰化法制备待测液。其不足之处是时间长、效率低。因为烟叶中的钾大多与有机酸结合成盐,用一定浓度的无机酸溶液即可将其从烟叶中提取出来, 对常规法的前处理进行改进,
13、改进方法是选用合适的酸在提取的同时, 用活性炭脱去被溶出的色素, 并和其他试验条件配合, 建立测定钾前处理方法。二、 试剂和仪器1. 恒温干燥箱和振荡器各一台, 各种玻璃器皿。2. 浓度0.2mol/ L H2SO4, 5%K2CrO4 指示剂, 浓度0. 02mol/ L AgNO3, 浓度100mg/ L K 标准溶液, NaCl、NaOH 和无氯粉状活性炭, 所用试剂均为分析纯。三、试验方法1.准确称取经粉碎过60目筛的烟叶样品0.5g,置于150ml三角瓶中, 加入1g活性炭和25ml浓度0.2mol/LH2SO4。2.25以上振荡20min,过滤到100ml容量瓶中,并多次用少量蒸馏
14、水冲洗三角瓶,洗液转移到容量瓶中并定容至刻度,充分摇匀。K(% ) =CVa10-6100/G其公式中:C从标准曲线上查得待测液中K的质量浓度(gml-1);V待测液体积(ml);a:待测液的分取倍数; 10-6:微克(g)换算为克(g)的换算系数; G:烘干样品质量(g); 钾含量的测定（浸提法-火焰光度法）盐酸法一、实验原理 同上二、试验材料和试剂仪器(1)钾标准溶液:准确称取烘干(1104h)的分析纯氯化钾0.9534g于小烧杯中,用水溶解转移到500ml容量瓶中,定容至刻度,摇匀。此溶液钾浓度为1000ppm(每ml含钾1.0mg),准确取1000ppm钾标准溶液50ml定容成500m
15、l,即为100ppm钾标准溶液,贮于塑料瓶中备用。(2)0.5N盐酸溶液:分析纯盐酸配制。(3)仪器:上海产6400型火焰光度计。三、测定步骤1.工作曲线的绘制从100ppm钾标准液中吸取10、20、30、40、50ml,分别置100ml容量瓶中,再分别加入0.5N盐酸溶液15ml,用水定容至刻度,摇匀,即得到系列分别为10、20、30、40、50ppm的测定用钾标准溶液。在火焰光度计上,以蒸馏水定检流计的零位,然后按从稀到浓的顺序测量上述一系列钾标准溶液,记录检流计的读数。以检流计读数为纵坐标,以钾浓度(ppm)为横坐标绘制工作曲线。2.钾待测液制备及测定精密称取经粉碎通过60目筛的烟叶样品0.1000g左右,置于100ml干燥容量瓶中,加入15ml 0.5
