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1、青岛理工大学毕业设计（论文）青岛理工大学学士学位毕业论文海月水母生殖细胞的观察及精子的冷冻保存研究院 系: 环境与市政工程学院 专 业: 环 境 科 学 学生姓名: 唐雨慧 学号:200805013论文地点: 中国科学院海洋研究所 指导教师: 李 捷 职称:教授 2012年6月目录摘要I英文摘要II引言1第一章 海月水母的研究概述31.1 海月水母的形态及生活习性31.2 海月水母的分布和生境41.3 海月水母的生活史41.4全球海月水母爆发事件及其危害5第二章 研究材料与方法92.1 海月水母生殖细胞的观察92.2 海月水母精子冷冻保存可行性探究92.3 海月水母人工受精可能性探讨10第三章
2、 实验结果与分析113.1 海月水母生殖细胞的观察113.2 海月水母精子冷冻保存可行性探究133.3 海月水母人工受精可能性探讨14第四章 总结19参考文献20致谢236海月水母（Aurelia aurita)生殖细胞的观察及精子的冷冻保存研究摘要 海月水母（Aurelia aurita），是广泛分布于世界各海区的一种大型水母，主要在暖海和温带，我国大连、烟台、威海和青岛等地沿海均有分布，成体伞径一般为100200毫米。海月水母作为刺胞动物门（Cnidaria)、钵水母纲（Scyphozoa)的代表，是生物学教学和科研的良好材料，也可作为水族馆的观赏动物。本文通过对养殖海月水母的取样并在显微
3、镜下观察到，雌性海月水母的卵子在生殖腺中分批成熟，大小不一，成熟的卵子的大小在100m左右，近似圆形，分布较稀疏；雄性海月水母的精子存在于精子囊中，而精子囊存在于生殖腺中，排列较紧密，形状不规则，大小一般不到100m，当精子囊破裂时，精子会从精子囊流出，精子的头部呈长棒状，尾部有很长的鞭毛，总长度在5070m左右，运动活跃，并做不规则运动。将雄性海月水母的生殖腺适当破碎并与适当浓度的冷冻保护液（如二甲亚砜）以1：4或1：5的比例混合均匀后，用液氮冷冻10分钟后取出，放入370C的恒温水浴箱中解冻，待冷冻的混合液全部融化后，生殖腺中的精子仍然有活力。这说明，海月水母的精子在遇到液氮如此低的温度时
4、，在冷冻保护剂二甲亚砜的作用下，低温会导致精子休眠，并不会导致其死亡。若采用适当的方式解冻，可以使精子复苏，重新恢复活力。由卵子与精子的混合实验结果可以证实，海月水母的受精方式是体内受精，即雄性海月水母排出的精子进入雌性海月水母的生殖腺中与成熟的卵子结合成受精卵。关键词 海月水母，生殖腺，卵子，精子，人工受精，冷冻保存The Observation of Germ Cells of Aurelia aurita and the Cryopreservation of Its SpermAbstract Aurelia aurita，also known as water jellyfish,
5、is a large jellyfish which widely distributed in the sea areas of the world and mainly distributed in warm sea and temperate zone. They also distributed along the coast of Dalian, Yantai, Weihai , Qingdao and other places of China. The umbrella diameter of mature individuals is generally from 100 to
6、 200 mm. Aurelia aurita is the representative of Cnidaria and Scyphozoa, can be regard as a good material for biological teaching and research, and the aquarium ornamental animals. In this paper, take samples from the cultured Aurelia aurita and observed under a microscope, it can be seen that in th
7、e gonad of the female Aurelia aurita, the eggs mature in batch with different size, and the size of the mature eggs is about 100m. The eggs are nearly circular, and distributed sparselyin. The sperm of the male Aurelia aurita present in the antheridum in the gonad. The antheridums arranged closely,
8、the shape are irregular, and the sizes are generally less than 100m. The sperm will outflow from the antheridum when they are ruptured. The head of the sperm is elongated rod-like, and the tail with very long flagella, and the total length of it is about 5070m. They do irregular movement and are ver
9、y active. Do some appropriate broken to the gonads of the male Aurelia aurita and mix with the appropriate concentration of cryoprotectant solution (such as dimethyl sulfoxide) to a ratio of 1:4 or 1:5. After freezing them in liquid nitrogen for 10 minutes, removing and putting them in 37oC thermost
10、at water bath to thaw them. When all the frozen mixture is melted, the sperm in the gonad is still viable. This shows that, when the sperm of Aurelia aurita under such a low temperature of liquid nitrogen, they would not be killed but be in dormant with the effect of the cryoprotectant dimethyl sulf
11、oxide. If thaw them in the proper way , the sperm would recovery and regain their vitality. By the result of the egg and sperm mixing experiment can be speculated that the way of the fertilization of Aurelia aurita is in vivo fertilization, that is the excreted sperm of the male Aurelia aurita enter
12、 the gonads of the female ones combined with the mature eggs into the fertilized eggs.Keyword Aurelia aurita , gonad, egg, sperm, cryopreservation I前 言水母作为胶质浮游动物的一大类群，包括刺胞动物门（Cnidaria）的水螅水母（Hydromedusae）、管水母（Siphonophore）、钵水母（Scyphomedusae）、立方水母（Cubomedusae）以及栉水母门（Ctenophora）的栉水母（Ctenophore）5大类。目前全球
13、已鉴定出大约840种水螅水母，200种管水母，190种钵水母，20种立方水母，以及150种栉水母。根据已有资料（刘瑞玉主编中国海洋生物最新种类名录）。我国近海已经记录的水母420多种，约占全球已记录种类的三分之一。由于水母种类多、数量大、分布广，因此它们在浮游动物群落中占有相当重要的地位。 近年来，在全球一些近岸高生产力海湾或海区，由于越来越多的人类活动及气候变化使海洋生态环境发生了很大的变化，不同种类的水母在全球许多海域中的数量增加甚至出现了暴发的事件（Jellyfish and ctenophore bloom），使得部分能量传递从原来的鱼类到了水母类。比如：白令海东部大型水母啡海刺水母(
14、Chrysaora melanaster)的生物量20世纪90年代比80年代增长了10倍，黑海的海月水母（Aurelia aurita）20世纪80年代末达到了大约35亿吨。同样，地中海、纳米比亚、南非西海岸、墨西哥北部湾及南大洋等海域均不同程度地呈现水母数量增多的现象，对当地造成了严重的经济和生态损失。在东亚海域，1990年以后，日本濑户内海的超富营养化（N：P比例很高），使得水母大量旺发，相应海域的渔业产量由1982年至1993年12年间下降了43%。自20世纪90年代中后期起，我国渤海辽东湾、东海北部和黄海南部海域也相继出现了大型水母暴发的现象，并有逐年加重的趋势，尤其是2003年可谓是
15、“水母年”，因之而起的网具暴破、网眼堵塞、传统渔场无法生产等情况已严重影响了东、黄海夏秋汛的海洋渔业生产。由于水母和许多鱼类及其仔鱼存在摄食竞争，因此当水母大量增长时，水域中浮游生物的数量在短时间内急剧下降，甚至可降至为零，从而可能造成仔、稚鱼饥饿甚至死亡，使本来业已匮乏的渔业资源更得不到及时的补充。由此可见，水母数量的增长已经成为一种海洋生态灾害，其危害可与赤潮相比1。 海月水母( Aurelia aurita )是海洋中大型的浮游动物，隶属钵水母纲旗口水母目洋须水母科海月水母属2 ，在70N40S海区的浅海海域均有分布，但海流稳定的温带浅海海域是其最适和最主要的分布区域3。在我国大连、烟台、威海和青岛等地沿海均有分布4。近半个多世纪以来，在全球许多海域都发生过海月水母爆发事件，引起了各种各样的社会、经济和生态问题，2007 年6 9月初，山东烟台港及威海近海海面发生了大规模的海月水母爆发事件。海月水母和其它大型胶质状浮游动物一样，它们的爆发会对海洋生态系统造成巨大的危害，对海洋渔业经济等造成恶性影响。在过去的100年里,学者们已对海月水母进行了广泛的研究，但国内目前专门针对海月水母的研究较少。虽然目前很多研究和商业部门的科研人员通过不
