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1、钙网蛋白与分化钙网蛋白（calreticulin , CRT作为主要的 Ca2+吉合蛋白 位于内质网和肌浆网上，参与维持细胞内Ca2+勺平衡、内质网应激反应、 调节白血病细胞分化、 肿瘤细胞的凋亡和机体内免疫原反应等， 并与多种人类疾病的发生、 发展和愈后密切相关 1 。本文对CRT目前的研究进展作一综述。1 CRT 的结构及功能人类CR得因位于p13.2p13.3,编码由417氨基酸构成 的酸性蛋白。CR伏小为46kD的内质网腔内Ca2+结合蛋白和分 子伴侣。目前发现，CRT在于除酯母外的所有细胞中2 o CRT 由 3 个独特的结构和功能域构成：一个球状的N- 结构域、一个扩展的P-域、一
2、个酸性的C-结构域3 o2 CRT 在体内的功能2.1 ER 分子伴侣 在内质网中，新生的未折叠蛋白与分子伴侣和酶相互作用，这些包括BiP/Grp78 、 CRT、 Grp94 和硫醇的氧化还原酶PDI和ERp57；均参与产生正确构象和功能蛋白质的过程 4 。每个分子伴侣和折叠因子都有其自我独特的机制阻止错误折叠的蛋白质运送出内质网。 当蛋白质错误折叠的时候， 它针对蛋白酶体途径进行降解， 这些错误折叠或未折叠蛋白质聚集触发了一系列信号途径以控制后续的内质网应激。CR惨与体内蛋白质合成后的修饰过程，两个ER管腔酶通过裂解末端葡萄糖残基起到修饰寡糖的作用。葡萄糖甘酶I , 一个ER管腔酶，发挥移
3、除初始葡萄糖残基的作用，而葡萄糖甘酶n裂解两个进一步的 葡萄糖残基。在葡萄糖甘酶n裂解第三个葡萄糖残基之前，该糖蛋白已被质量控制循环蛋白，如CRT及钙联接蛋白(calnexin )所分辨出来 5 。当蛋白被正确折叠时，第三个葡萄糖残基被葡萄糖甘酶II移除，进而该蛋白从质量控制循环中释放，从而运送出内质网。然而，那些除去第三葡萄糖残基的错误折叠蛋白被UGG价辨出来，且该酶能进行重新糖基化反应，以创建一个能 被CR俄calnexin分辨出的折叠底物。这就导致了那些折叠不 完全的糖蛋白仍然存在于 CRT/calnexin 循环中，直到其获得合适的结构并且不再被 UGGTf分到?出来3。这说明了 CR
4、T乍为分 子伴侣在内质网的蛋白质合成中所起到的重要作用， 而蛋白质的 正确折叠，对于机体的正常活动是不可缺少的。2.2 Ca2+稳定的调节器Ca2+作为万能信号分子在影响多种 发育和细胞过程中起到了很重要的作用。大部分细胞内Ca2诸B储存在内质网腔内，内质网腔内拥有许多Ca2镁冲蛋白，能结合ER腔内Ca2用口参与ER功能的众多方面。CRT勺过表达导致了 细胞内Ca24c存量的增加，然而CR课达下降的细胞减少 ER上 Ca2垢贮的容量并且延缓激动剂介导的Ca2僚放，从而达到调节Ca2用衡的目的。CRTS表达伴侣和Ca2镁冲性能的分析为 研究蛋白功能提供了重要线索。CR1M乏的细胞内Ca2+1态受
5、损，但只有适度减少蛋白质折叠，增加CRT的表达不会影响蛋白折叠，但是显著地影响了 Ca2锄平衡。这些发现进一步支持 CRT在内质网中Ca2镁冲和调节Ca2+急定功能比其作为分子伴侣功能重要的观点 6 。3 CRT 与分化目前证实，CRT&白血病分化方面扮演了重要角色。在DMSO或全反式维甲酸（ATRA诱导下，HL-60细胞CRT的含量呈时间依赖性下B$o鉴于CRM分化细胞内含量降低和分解代谢降低，诱导HL-60细胞分化是否CRT勺生物合成率会发生改变，用 35S蛋氨酸标记新合成 CRT的含量，发现每种药物都导致标记的CRT含量降低，表明CRT生物合成率的减少，表明髓系细胞的分化过程中CRT水平
6、的降低在很大程度上是由于合成率的下降所致7 。He等发现二烯丙基二硫（DADS可诱导HL-60细胞分化，并运用蛋白质组学分析鉴定差异表达蛋白质， 显示钙网硬蛋白前体表达明显下调8 o CRT缺陷的细胞同野生型或CRT过表达的细胞相比，显示出了更高的分化潜能。在高脂肪的 CRT-/- 细胞中， 内质网腔内钙浓度是降低的， 增加内质网腔内钙的浓度会导致脂肪细胞分化的减少。在缺乏钙网蛋白的细胞内，钙调蛋白 -Ca2+/钙调蛋白依赖蛋白激酶n （ CaMKI）途径表达上调，而抑制CaMKI能减少脂肪细胞分化。CRT是通过负反馈机制来抑制脂肪细胞分化， 钙网蛋白表达最初的上调是过氧化物酶体增生物激活受体
7、丫（PPAW）介导的，当钙网蛋白蓄积时，随后负反馈 调节PPAFV ,脂蛋白脂酶，CEBPx , Ap2的表达9大肠癌患者中CRT含量远高于健康对照组，高、中分化腺癌 组之间比较差异无统计学意义（ P=0.057 ），但与低分化腺癌组 比较差异有统计学意义（P=0）,表明大肠癌细胞存在 CRT过表 达， 且在不同分型中表达不尽相同， 而大肠癌的病理分型直接决 定了其愈后，故也可认为CR怵平在某种程度上可评价大肠癌患 者的愈后 10 。4 CRT 与其他疾病多巴胺诱导内质网发生应激反应（ER9日CRTS达上调， 表明CRT上调相关的未折叠蛋白反应可能在PD的细胞损伤中起负面作用。胃癌细胞中 CR
8、Tf氐表达，且其mRN厌口蛋白的表达与 胃癌细胞的分化程度呈负相关趋势11 ,12。CRM食管癌和肺 癌表达的水平均明显升高；泌尿系统肿瘤CRT的表达量也增加，下调CRT的表达可抑制膀胱癌细胞的生长和转移能力。胰腺癌组织CRM达量显著高于癌旁组织，且血清中检测到CRT的高水平 13 。CRTS血清和滑膜组织中均高表达，表明CR何能参与RA的关节炎症反应等病理过程，对诊断RA有指导意义14 o CRT表达量的改变可影响细胞内 Ca2+ 稳态，其在胚胎发育过程中峰 度的变化以及CRTS因敲除可损伤心脏发育而导致胚胎死亡，表明CRTS心脏发育过程中的重要作用15 。5展望白血病发病率越来越高， 人们从研究化疗转到诱导分化的方向上来，而在研究白血病的发病机制时， 发现CRTM有重要意义， 其不仅在白血病患者中存在异常表达， 而且在肿瘤的发生， 机体免疫等方面也具有重要的作用。目前，对于CRT及其在白血病发病过程中是通过哪些途径发挥作用的还不清楚， 这将成为目前乃至以后研究的重点。
