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1、专题07 绿叶中色素的提取和分离1.提取绿叶中的色素原理：绿叶中的色素能够溶解在有机溶剂无水乙醇中。步骤取材：称取5 g新鲜绿叶 研磨：剪碎叶片，放入研钵中，加少许二氧化硅和碳酸钙，再加入10 mL无水乙醇，迅速、充分研磨 过滤：漏斗基部放一块单层尼龙布，将研磨液迅速倒入玻璃漏斗中进行过滤 收集：用小试管收集色素滤液，及时将试管口用棉塞塞严2.分离绿叶中的色素原理：不同色素在层析液中的溶解度不同，溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快，反之则慢。步骤制备滤纸条画滤液细线分离绿叶中的色素：将适量的层析液倒入试管中，将滤纸条(有滤液细线的一端朝下)轻轻插入层析液中，随后用棉塞塞紧试管口观察并记录结果：
2、滤纸条上出现4条色素带3.实验中的材料试剂及操作目的过程操作内容操作目的提取色素材料叶片要新鲜、深绿使滤液中色素含量高试剂二氧化硅利于绿叶的充分研磨碳酸钙防止研磨过程中色素被破坏无水乙醇溶解色素关键步骤研磨要迅速、充分提取较多色素、防止溶剂挥发盛滤液的试管口加棉塞防止溶剂挥发用单层尼龙纱布过滤而不用滤纸防止色素吸附在滤纸上分离色素试剂层析液分离色素关键步骤滤纸条的一端剪去两角防止层析液在滤纸条的边缘处扩散过快滤液细线重复画若干次，且要求细、直、齐使分离的色素带清晰滤液细线不能触及层析液防止色素溶解到层析液中考点一：实验的基本原理和过程分析例一、甲、乙、丙、丁四位同学，在利用新鲜绿色菠菜叶为实验
3、材料，用层析法进行叶绿体中色素的提取和分离实验时，由于操作不同，得到了四种不同的层析结果(如图所示)。下列分析错误的是()A甲可能误用蒸馏水作提取液和层析液B乙可能是因为研磨时加入无水乙醇过多C丙可能是正确操作得到的理想结果D丁可能是研磨时未加入CaCO3【答案】C【解析】甲图中看不到色素带，叶绿体中的色素属于有机物，易溶于酒精等有机溶剂，难溶于水，所以出现甲图结果可能是误用蒸馏水作提取液和层析液导致的，A项正确；乙图中每种色素都有，但含量很少，可能是无水乙醇过多，色素浓度太低导致的，B项正确；丙图中每种色素都有，但是胡萝卜素和叶黄素含量较多，叶绿素a和叶绿素b含量较少，这不是正确操作得到的理
4、想结果，C项错误；丁结果中叶绿素a和叶绿素b含量很少，可能是研磨时未加入CaCO3，破坏了叶绿素类物质造成的，因为与类胡萝卜素相比，叶绿素更易受到破坏，D项正确。考点二：实验异常现象分析例一在做提取和分离叶绿体中的光合色素实验时，甲、乙、丙、丁四位同学对相关试剂的使用情况如下表所示(“”表示使用，“”表示未使用)，其余操作均正常，他们所得的实验结果依次应为()试剂甲乙丙丁无水乙醇水CaCO3SiO2A BC D【答案】B【解析】甲同学由于没有加入提取剂无水乙醇，所以提取液中不会出现色素，色素分离的结果是；乙同学操作正确，色素分离后得到的色素带有四条，与情况相符；丙同学由于未加CaCO3，所以叶
5、绿素含量减少，所得到的色素带中两条叶绿素带比正常的色素带要窄，对应；丁同学由于未加SiO2，导致叶片研磨不充分，最终导致各种色素的含量均减少，对应。易错点一 收集到的滤液绿色过浅的原因分析未加石英砂(二氧化硅)，研磨不充分。使用放置数天的绿叶，滤液色素(叶绿素)太少。一次加入大量的无水乙醇，色素溶液浓度太低(正确做法：分次加入少量无水乙醇提取色素)。未加碳酸钙或加入过少，色素分子被破坏。易错点二 滤纸条色素带重叠：没经干燥处理，滤液细线不能达到细、齐、直的要求，使色素扩散不一致。易错点三 滤纸条看不到色素带：忘记画滤液细线；滤液细线接触到层析液，且时间较长，色素全部溶解到层析液中。易错点四 滤
6、纸条只呈现胡萝卜素、叶黄素色素带：忘记加碳酸钙导致叶绿素被破坏或所用叶片为“黄叶”。挑战真题：1.(2016全国卷，4)关于高等植物叶绿体中色素的叙述，错误的是()A.叶绿体中的色素能够溶解在有机溶剂乙醇中B.构成叶绿素的镁可以由植物的根从土壤中吸收C.通常，红外光和紫外光可被叶绿体中的色素吸收用于光合作用D.黑暗中生长的植物幼苗叶片呈黄色是由于叶绿素合成受阻引起的【答案】 C【解析】叶绿体中的色素能够溶解在包括无水乙醇在内的有机溶剂中，A正确；叶绿素分子中含有镁元素，可以离子状态由植物的根从土壤中吸收，进而参与叶绿素的合成，B正确；一般情况下，光合作用所利用的光都是可见光，可见光不包括红外光
7、和紫外光，C错误；叶绿素的合成需要光，黑暗中生长的植物幼苗，因没有光照而导致叶绿素合成受阻，使类胡萝卜素的颜色显现出来，因而叶片呈黄色，D正确。2.（2016江苏卷，17）下列用鲜菠菜进行色素提取、分离实验的叙述，正确的是（）A.应该在研磨叶片后立即加入CaCO3，防止酸破坏叶绿素B.即使菜叶剪碎不够充分，也可以提取出4种光合作用色素C.为获得10 mL提取液，研磨时一次性加入10 mL乙醇研磨效果最好D.层析完毕后应迅速记录结果，否则叶绿素条带会很快随溶液挥发消失【答案】B【解析】CaCO3可防止酸破坏叶绿素，应在研磨时加入，A错误；即使菜中叶剪碎不够充分，但色素并没有减少，也可提取出4种光
8、合作用色素，B正确；由于研磨时乙醇挥发，故为获得10 mL提取液，研磨时加入多于10 mL乙醇，C错误；叶绿素条带不会随层析液挥发消失，D错误。3.(2015江苏卷，21)为研究高光强对移栽幼苗光合色素的影响，某同学用乙醇提取叶绿体色素，用石油醚进行纸层析，下图为滤纸层析的结果(、为色素条带)。下列叙述正确的是(多选)()A.强光照导致了该植物叶绿素含量降低B.类胡萝卜素含量增加有利于该植物抵御强光照C.色素、吸收光谱的吸收峰波长不同D.画滤液线时，滤液在点样线上只能画一次【答案】. ABC【解析】本题主要考查光合色素的提取与分离，意在考查生物实验的相关知识，考查理解能力和综合运用所学知识分析
9、问题的能力，难度较大。A项对，由图示可知，强光下，、表示的叶绿素色素带变窄，说明叶绿体含量降低；B项对，类胡萝卜素可保护叶绿素免受强光降解；C项对，是叶绿素a，是叶绿素b，都是主要吸收蓝紫光和红光，但吸收光谱的吸收峰波长不同；D项错，画滤液线时，滤液在点样线上画23次。挑战模拟题：一、单选题 1.在绿叶中色素的提取和分离实验中，要使色素带清晰又整齐，下列哪项措施与之无关()A 定性滤纸要干燥B 剪去滤纸条一端的两角C 滤液细线要画得细、齐、直、均匀D 盖上培养皿盖【答案】D【解析】使色素带清晰整齐的措施有定性滤纸要干燥，剪去滤纸条一端的两角，画滤液细线要画得细、齐、直、均匀，不让层析液触及滤液
10、细线，这些都是为了保证同种色素随层析液扩散时速度一致，色素带整齐明显。盖上培养皿盖是为了防止层析液挥发，与色素带清晰、整齐无关。2.在“提取和分离叶绿体中的色素”实验中，正确的操作顺序应该是()A 进行纸层析制取滤液在滤纸条上画线将实验材料研磨B 制取滤液进行纸层析在滤纸条上画线取滤液再画线C 将实验材料剪碎、研磨在滤纸条上画线制取滤液进行纸层析D 将实验材料剪碎、研磨制取滤液在滤纸条上画线进行纸层析【答案】D【解析】首先应是提取色素，排除A项。制备滤液时，需要先将实验材料剪碎、研磨，故答案为D。3.下列对有关实验的描述中，错误的是()A 分离叶绿体中的色素时，不同色素随层析液在滤纸上的扩散速
11、度不同B 用低倍镜观察不到紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞的质壁分离和复原过程C 观察叶片细胞的叶绿体时，先在低倍镜下找到叶片细胞再换高倍镜观察D 甲基绿染液可使人口腔上皮细胞的细胞核呈绿色【答案】B【解析】紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞的质壁分离和复原过程可以通过低倍镜观察到，因为液泡的体积比较大。4.如图表示某同学做“绿叶中色素的提取和分离”实验的改进装置，下列与之有关的叙述中，错误的是()A 应向培养皿中倒入层析液B 应将滤液滴在a处C 实验结果应是得到四个不同颜色的同心圆(近似圆形)D 实验得到的若干个同心圆中，最小的一个圆呈橙黄色【答案】D【解析】图示为绿叶中色素分离的实验装置，所以应把层析液倒入
12、培养皿中，灯芯起到传递层析液的作用，把色素滴到a处让其在定性滤纸上扩散，四个圆圈中扩散最慢的即为圆圈最小的，它应该是呈黄绿色的叶绿素b。5.某生物兴趣小组想探究蔬菜不同叶片在叶绿素含量上的区别，选择了新鲜菠菜的“绿叶”、“嫩黄叶”，做“绿叶中色素的提取和分离”实验。实验结果如图，下列说法正确的是()A B C D 【答案】A【解析】绿叶较嫩黄叶含有更多的叶绿素a和叶绿素b。在滤纸条上，上起的第三和第四条带分别代表叶绿素a和叶绿素b，绿叶组中叶绿素a和叶绿素b所代表的两条色素带更宽。6.如图表示新鲜菠菜叶中四种色素的相对含量及在滤纸条上的分离情况。下列说法不正确的是()A 乙在滤纸条上最宽B 四
13、种色素均可溶于有机溶剂无水乙醇中C 四种色素在层析液中溶解度最大的是甲D 发黄的菠菜叶中色素含量显著减少的是甲和乙【答案】C【解析】乙的相对含量最大，故其最宽。色素在层析液中的溶解度不同，溶解度大的在滤纸条上扩散速度快，所以丁的溶解度最大，扩散最快；菠菜叶发黄是由于叶绿体中的叶绿素被破坏而呈现类胡萝卜素的颜色所致。7.在圆形滤纸的中央点上，对叶绿体的色素滤液进行色素分离，会得到近似同心环的四个色素圈，排列在最外圈的色素所呈现的颜色及其吸收的光分别是()A 蓝绿光，红光，蓝紫光B 黄绿色，红光C 橙黄色，蓝紫光D 黄色，红光和蓝紫光【答案】C【解析】最外圈的是胡萝卜素，它的颜色为橙黄色，主要吸收
14、蓝紫光。8.某研究组获得了水稻的叶黄素缺失突变体。将其叶片进行了红光照射光吸收测定和色素层析条带分析(从上至下)，与正常叶片相比，实验结果是()A 光吸收差异显著，色素带缺第2条B 光吸收差异不显著，色素带缺第2条C 光吸收差异显著，色素带缺第3条D 光吸收差异不显著，色素带缺第3条【答案】B【解析】胡萝卜素和叶黄素主要吸收蓝紫光，所以缺少叶黄素时对红光的吸收差异不显著；叶绿体中色素层析后色素带从上到下依次为胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a、叶绿素b，所以本题正确答案为B。9.生态学家研究发现，植物群落中的类胡萝卜素和叶绿素的比率(黄/绿比率)与群落的P(光合作用)/R(呼吸作用)比率呈现一定的关系，这种关系如下图所示。以下判断正确的是()A 有机物积累逐渐增多，黄/绿比率有增高趋向B 人工林年平均黄/绿比率过高时，应适当采伐C 农作物栽培时选择b点比a点更适宜D 在作物收获季节，群落的P/R值可能在a点【答案】B【解析】有机物积累逐渐增多，黄/绿比率
