金虫草的养殖条件

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1、金虫草的养殖条件金虫草的养殖条件 1.蝠蛾的饲养工具(1) 蝠蛾卵的饲养工具。饲养蝠蛾卵可用两种方法,一是用直 径15 20cm的玻璃培 养皿,垫上2 3层滤纸,皿内放一块吸 水棉保持湿度,每皿可饲养200一500粒卵。此法利于观察,但 难掌握湿度。二是用l0cm xx5 一 8cm的广口瓶或者25cm x 30cm 的玻璃饲养 缸,内置3 一 5cm厚的过筛细腐殖土,种上1 一 2棵 珠芽寥植物,把卵放养于土表至lcm深的土层中,每瓶可饲养300 一1000粒卵;饲养时只要掌握住植物不枯萎,即可不加湿度。此 法卵的孵化率高,但观察和移植幼虫对比较困难。(2) 幼虫的饲养工具有以下4种。a.

2、玻璃养虫缸:用18 25cmx30 一 35cm的玻璃缸,也可用 标本浸泡缸,放置土壤15 25cm,种上幼虫取食的植物,把刚孵 化幼虫移入缸内,每缸可饲养10一30头幼虫。b. 地下养虫箱:箱一般高30 一 50cm,宽20 一 25cm,厚3 5cm。饲养箱骨架用钢筋焊成,上面钢筋做成提手,便于提动;宽 的两面用3 一 5mm玻璃,便于观察虫体活动;底和两个侧面装上 16孔目的铜纱网,便于水分渗入。然后装上土壤,种植饲料植物, 每箱放养20一50头幼虫;在较坚实的地上挖一个比饲养箱体积稍 大和深的槽,把养虫箱放入槽中,观察时将养虫箱提出地面,抹 去外表玻璃上的土壤,即可清楚看到幼虫活动情况

3、。C.大型养虫笼:在半自然的状况下,选择一块排水好、土质 疏松的场地,挖长12 一 l5m、宽2 3m、深4ocm的深槽,底部 和四周垫上尼龙纱网(最好用双层,小虫不易钻出),再把疏松的 腐殖土铲进填平,种上幼虫食物,放入幼虫饲养,每平方米可放 养30一50头;该法有利于大规模饲养,但观察困难。d.用各类盆具裸露饲养:把植物饲料洗净放入盆中,放入幼虫饲养,盆口覆盖一层黑布或者黑纸遮光。此法利于生活史观察, 但要注意勤换饲料和清除粪便。(3) 蛹和成虫的饲养工具。制作长50cm、宽50cm、高55 60cm 的养虫箱。底部用薄铁板或双层铜纱网封底;顶和四周用铁纱或尼 龙纱封盖,前面可制成一道活动

4、纱网门。在箱底放入10 一 20cm 的土壤,种上植物,把蛹和成虫放养土中,此法可进行密植饲养。金虫草养殖方法 (1)土壤的选择。土壤是蝠蛾昆虫一生中 最主要的活动场所。土壤条件是否适合该虫生活是人工饲养成活 率高低的关键之一。最适宜蝠蛾生长的是高山草甸土;次之是流石 滩和草甸混合土;再次之是高山棕色、暗棕色林土,其他土壤对此 虫生长不良。(2) 食料的选择。幼虫最喜取食圆穗蓼、珠芽蓼、黄芪、小大 黄等植物的嫩根芽。由于蝠蛾昆虫是一类杂食性昆虫,在无上述 植物的地方,可用禾本科 (如青稞、麦、谷芽等) ;十字花科、莎 草科的嫩根饲养。在中、低海拔地区(适宜生活的温度下)用土大 黄、胡萝卜、白萝

5、卜、白薯 (红苕)、马铃薯、苹果等饲喂也能正 常生长发育,最好为土大黄、胡萝卜和白薯三类。(3) 温、湿度的选择。蝠蛾昆虫是一类耐低温而怕高温的昆虫。 最适宜在 15 一 19c 中生活成长;此虫最适宜空气湿度 75%一 85%, 土壤含水量 40%一 45%之间。金虫草的养殖管理 (1)成虫期。成虫不取食任何食物,只 要保持水分和适宜温度即能正常成活和产卵。但蛾子栖息环境与 产卵量有关。成虫最喜选择有杜鹃和蝠蛾幼虫取食的蓼科等植物 根旁产卵,所以在蛾子交配产卵前植上几株相关植物最佳;另外不 能有强光影响。(2) 卵期。要使卵能正常孵化,一定要掌握好适宜的温、湿度。(3) 幼虫期。幼虫由于生长

6、期长,而且虫体壁薄而易破,饲养 时一定要细心,除了必要的观察、换土和换食料外,尽量减少翻 动。幼虫的饲养关键是初孵的幼龄时期,初孵幼龄虫要给足细小 鲜嫩、湿度不高的食物;土壤最好经过筛检,以免粗硬物擦伤主体。 此外,为了延长食料和土壤不霉坏,更换前用紫外灯照射杀菌 l5min, 土壤也可在阳光下暴晒1 一 2h后再用。(4) 蛹期。养蛹时,把养蛹器皿内的土壤压实,然后用与蛹粗 细的木棍人工造一土室,土室略斜,深约2 一 3cm,每室放一蛹, 放蛹时,蛹头向土表面,上用细土盖住。蛹的温湿度,可控制在 大气湿度80% 85%,土壤含水量42 45%之间,温度18 22C 之间。金虫草的人工养殖 要

7、获得纯正的冬早夏草菌种必须进行 人工的分离、纯化、复壮、保存等工作。1. 分离金虫草菌的技术与条件(1) 材料要求。获得纯的菌种对材料要求比较严格 ;一般来说 如果是进行金虫草的组织块分离法,最佳的分离材料是每年的 10 月底至11月份,青藏高原高寒草甸土壤刚开始冻结时期采的材料, 这个时期金虫草菌刚感染蝠蛾幼虫进入僵虫期不长时间,嫩小的 子座芽刚长出虫头部0.2 0.5cm,虫体内其他杂菌较少,最易进 行分离。如果是第二年5一6月份采的材料,僵虫体和子座上都 有许多种杂菌共生或腐生,难获得纯菌种。若用子囊孢子进行分 离培养,材料最好在每年的7月中、下旬子囊孢子刚有部分成熟 期采集分离培养。(

8、2) 操作方法。有以下3步。a. 僵虫体(即菌核)的分离:分离前,用水刷洗干净主体表面, 再用无菌水清洗2一3次;用0.1%一0.2%的升汞溶液,对分离材 料进行约3 一 5min的表面消毒;再用无菌水清洗。选取与胸足为 界的前段部分。用解剖刀切去表皮,避开消化道,取血腔菌丝切 成芝麻粒大小,压入平板培养基中,每皿1 一 2粒。置于15 19C 中培养,待菌落长出0.2 0.5cm时,挑选少量菌丝反复在平板 培养基上分纯2一4次,确定无其他杂菌后,移入试管保存和培 养。b. 子座芽分离:从僵虫头顶切下洗净的子座芽,置入0.1%升 汞液中消毒2 一 3min,用无菌水洗净,切取中间部位组织块压入

9、 培养基中;培养条件同a。c. 子囊抱子分离:用透明纸袋套住子囊抱子成熟的子座,让 子囊孢子弹跳粘贴在纸袋上,然后,把有子囊孢子的纸袋浸入25% 的葡萄糖液中,洗下抱子,放入15 19C中培养,每天镜检,当 袍子萌发时,用微吸管吸单个抱子滴于平板中培养;培养条件同a。也可把整个成熟的金虫草带回室内,用棉纸把僵虫和连虫体 的子座包住,仅留出有孕部分,在无菌室中,横放,下置一片载 玻片,随时保持主体湿度;每天镜检,当看到子囊孢子弹到玻片时, 用微吸管吸到平皿的培养基中培养;培养条件同a。(3) 培养基的选用。a. 马铃薯葡萄糖琼脂培养基(pda),此种配方是所有虫草菌 属真菌的通用培养基,在分离培

10、养初期可用该配方,不过菌种生 长不十分旺盛,而且易老化、退化。b. 加富培养基(1):多性蛋白脐10g,葡萄糖50g,磷酸氢二 钾lg,硫酸镁0.5g,活蚕蛹30g,生长素0.5ug,琼脂20g,加 水 1000ml, ph: 5.0。加富培养基(ii):蛋白脯40g,葡萄糖40g,去皮鲜马铃薯 100g,磷酸氢二钾lg,硫酸镁0.5g,牛肉膏10g,生长素0.5ug, 蝠蛾活幼虫(磨碎)30g,琼脂20g,高寒草甸土浸出液10ooml, ph:5.0。在加富培养基上,菌落比在pda培养基上生长旺盛和迅速;加 富ii号又优于i号。2. 生长特性金虫草菌的分离培养中须掌握温度、ph值、光照、 碳

11、和氮源及无机盐的利用状况。(1) 不同温度对菌丝生长的影响。金虫草菌喜偏低温度。在0 一 4C时能缓慢生长;5 8C时生长速度加快;10 一 19C是此菌较 适生长发育的范围;最佳生长温度为15 一 19C。超过20C菌丝猛 长,菌落由白色变为灰黑或棕黄色,开始出现变异,所以不宜高 温培养。(2) 对ph值的要求。金虫草菌是一种偏酸性真菌,最适ph值 为 5.0 一 6.0,当 ph 值为 4.5 以下和 6 以上时,随着增高或降低, 生长缓慢至不生长。(3) 光照的影响。此菌的子囊孢子萌发和菌丝生长初期,适应 于弱光和短光照,后期则适应于较强光照。在人工培养中,菌丝、 分生孢子和子座等具有明

12、显的趋光性,向阳面生长多而密,背光 面生长稀疏,全黑环境下培养的各种菌态纤弱、细长、稀疏。(4) 对碳源的利用。金虫草菌可利用多种碳源,但以葡萄糖和 麦芽糖合用时生长最快,单用葡萄糖时也能良好地生长,次之是 马铃薯等淀粉,再次之是蔗糖。金虫草菌是一种由寄生活体寄主,再由腐生阶段发育成熟的 真菌,所以对氮源中的多种有机氮均能较好的利用。而以活虫体 最佳;蛋白胨与酵母膏合用生长也十分理想,次之是二者单独使用 再次之是牛肉膏等。而对无机氮如硫酸铵、硝酸钾等利用较差。对灰分养料有一定的需求,在有微量的硫酸镁、磷酸氢二钾 的培养基中生长旺盛,次之是磷酸二氢钾,其他钠、钙、铁、铜 等无机盐也可利用。3.

13、培养方式 金虫草菌分离纯化后,即可作为各种实验和扩大 生产应用。(1) 其扩大生产的方法常有三种:固体静置培养法、振荡培养 法和大罐通气发酵培养法。a.静置培养:主要用在固体培养,如试管斜面、三角瓶培养、 米饭培养等等。在静置培养中只要掌握好温度和光照即可使菌正 常生长。当斜面上的分生抱子成熟后,即可存入1 一 2C的冰箱中 保存8一14个月,也可作为种子直接用于生产。b. 振荡培养:采用液体培养菌种或小规模繁殖培养,都可用 振荡培养。振荡培养的培养基,把固体培养基减去琼脂即可。设 备最好选用恒温振荡培养机,用三角瓶置液体培养基,把试管固 体菌种接入即可培养。经不断振荡使液体培养基中各种成分混

14、合 均匀而不致沉淀,同时促进气体与液体接触和交换,使氧进入液 体培养基中,利于菌丝生长和分生孢子形成。c. 大罐通气发酵培养:在大规模生产菌丝和分生抱子等菌粉 时,必须用大罐通气发酵培养法。该方法通气是采用吸气或真空 泵减压等方法,经过滤器除杂菌,送入罐内液体培养基中供金虫 草菌的生长发育。(2) 发酵工艺流程。自然金虫草分离纯化一试管斜面种一振 荡器液体一级种一二级种一小型种子发酵种子罐一生产发酵 罐 一 浓缩一 喷粉干燥一 成品菌粉。金虫草菌罐中发酵要求温度在20 一 25C,罐压392.3 一 686.5kpa(0.4 0.7kg/cmz),通气量为 0.5 l.ovvm* ;注入发酵

15、罐中的液体培养基为罐容的65%一75%为宜。接种量为10%,搅拌 速度为180r/min,培养时间72 一 96h,即可放罐浓缩和喷粉。(3) 发酵培养基多用。鲜马铃薯(去皮)8%,蔗糖2%,玉米淀 粉0.5%,蚕蛹粉1%,蛋白胨0.4%,硫酸铵0.2%, ph值5.5 6.0。(4) 发酵培养成品标准。分生抱子即几全脱落母体抱子梗,抱 子梗数量增加不明显 时,在镜下计数检查,每毫升含分生抱子18 亿一 25亿个;残糖低于1%;氨基氮低于0.2mg/ml,即可成为成品 菌液。4. 金虫草菌回接要点 把有性型或无性型的金虫草菌抱子回 接到寄主昆虫体上,是人工培养有性型金虫草和复壮无性型菌种 的关

16、键措施。(1) 回接时期。金虫草回接关键在于选择寄主昆虫抗菌薄弱时 期,一是蜕皮期;二是幼虫取食活动激烈,摩擦损伤率较高时期。(2) 回接方法。又分两种。a. 喷雾法:当饲养的蝠蛾幼虫达4 一 6龄虫,有1/3以上的 幼虫蜕皮时,把幼虫集中,用子囊孢子或者分生孢子对入5%一10% 葡萄糖液喷雾到虫体或食物上,接种后约30min,菌液在虫体上略 干,把幼虫放回土壤中任其自然生活。此法感病率高,但缺点是, 幼虫不易从土中取出集中,而且集中时幼虫有互相残杀的习性, 虫体被咬伤后,易被杂菌感染致死,金虫草菌丝未充满体腔时, 伤虫就会腐烂,不能形成僵虫 (菌核)。b. 自然接触法:在大面积半自然土壤中饲养蝠蛾幼虫,定时 取小样观察幼虫生长状况,当大部分幼虫适宜感病时,用饲料植 物浸菌液种植和用细土拌菌接种,均匀撒入

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