肌红蛋白测试标准操作流程

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1、肌红蛋白测试标准操作流程一实验组成1实验仪器及器具:Mini VIDAS全自动分析仪一台、洁净工作台、低速离心机、20200d l加样器2试剂盒组成:3D MYO流条STR即用型:30MYOSPR1 k30SPR即用型:SPR内部用小鼠单克蛙抗肌红蛋白免疫球蛋白涂层。MYO质控1 X 1 冻千)C1用装国水重新组成.静置热10分钟.然后混合,在2.印C下重新 蛆成后14天内稳定.或者在-25 f匕下.在试剂盒上的有敕期之 前稳定可以蹴,溶四个周期 人血清+人肌红蛋白+防腐剂, 以用/I为单位的范围指示在小瓶标签上.MYO校正液1 乂 1 ml (冻干)S1用1间蒸涵水重新组成.静置生10分钟.

2、然后混合,在2-8C下重新 组成后14天内稳定,或者在-25 &C下.在试制盒上的有效期之 前稳定:可以冻/海四个周期 人血清十人肌红蛋白+防腐剂.以由/1为单位的施国指示在小瓶标签上.MYO旗理剂1 x 5 ml液体)R1即用型:蛋白质缓冲液(BSA) +防腐剂,MLE卡需要含有工厂主校正数据的规格单来校正试胎上一份说明书MYO:齐IJ条说明:试齐IJ条上有10个孔,用贴有标签的铝箔密封孔号试剂1样品孔a2-3-4空孔口5共桅物:缄性磷酸酹标记的多克隆抗肌红蛋白免疫球蛋白(羊+Q.9g/I叠氮化钠(4006-7-8清洗缓冲液,Tris (0.01 mol/l, pH 7.6) +NaCl (

3、Q.1 mol/l) + Tween (10%) + 0.9 g/1 叠鼠化钠(600 pl).9空孔.10具有底物的比色皿;磷酸4-甲基-伞形烷(0.6 mmol/l) + - 615* (DEA) (0.625 mol/l or 6.6 %) pH 9 2 + 1 g/l 乌氮化铜(300 ,二实验原理一步免疫分析夹心方法(sandwich )和最后荧光检测(ELFA)样品被吸取到含有用碱性磷酸酶(共扼物)标记的抗肌红蛋白抗体的孔中。样品/共扼物混合物在运行中进出固相包被针SP曝次。该操作使抗原结合到固定在固相包被针SPR内壁的免疫球蛋白上,并结合到共扼物上,以形成“夹心”。没有结合的组分

4、在冲洗步骤中清 除。在最后检测步骤中,将底物(磷酸 4甲基-伞形烷)循环进出固相包被针SPR。共扼物酶催化本底物水解成荧光产物(4-甲基伞形酮)。该产物的荧光在 450nm下测量。荧光强VIDAS艮据储存在存储器中的校度与样品中出现的抗原的浓度成正比。分析结束的时候,由正曲线,自动计算结果,然后打印输出三标本1检测样本:150 M血清或血浆(肝素锂)由于EDT域柠檬酸钠引起所测量的数值的下降,所以不可使用在EDT减柠檬酸钠上采集的血浆2影响因素没有发现下列因素对分析有显著影响:(1)溶血(用血红蛋白形成尖峰样品(spiking )之后:0到292科mol/l或0到470 mg/dl)(2)脂血

5、症(在用脂质形成尖峰样品(spiking )之后:0到30 g/ml ,等价于在三酸甘 油酯中)(3)胆血症(在用胆红素形成尖峰样品(spiking )之后:0到540 dmol/l)(4)肝素(最高达 50IU/ml )但无论如何,建议不要使用明显溶血、脂血症、胆血症的样本,如可能的话,重新收集 样本。四操作程序1标准曲线条码(MLE)输入在每使用新一批试剂前,必须用每一试剂盒中都有的ML印(规格单)将规格(或工厂主校正曲线数据)输入仪器。步骤如下:(1)按 Master Lot Menu(2)放入MLE#片(3)按 Read Master Lot(4)按履B读取完成后,仪器会自动打印相应信

6、息2校准曲线当新一批试剂开启时, 在主批次数据(MLE卡片)输入后,应用试剂盒中的两种校准液执 行校准,然后每14天应重新校正一次。(1)按说明书溶解标准品 S1和质控品C1(2)按 Status Screen ,选择 AB(3)键盘输入位置1,按S,再键入1,回车(自动跳到下一位置)(4)按s,键入1,回车(5)重复以上步骤输入C1后,回车(6)屏幕显示S1, S1, C1(7)在机器中放入相应试剂条和SPR并且加入上述校准品(8)开始测试测试大约需要20min,结束后机器将自动计算结果并打印3标本测试(1)按 Status Screen , 选择 A B(2)键盘输入位置1,按sample id ,再键入标本编号,回车(自动跳到下一位置)(3)重复以上步骤(4)输入完成后,按返回键(5)屏幕显示已输入的标号(6)在机器中放入相应试剂条和SPR并且加入对于待测标本(7)开始测试测试大约需要20min,结束后机器将自动计算结果并打印五结果判读1性能检测范围5-1000 -g/l检测下限 5g/l日内重复性 在183%/l , CV 1.6%,在346ug/l , CV3.2%,在728 划,CV 3.0%日间重复性 在183Mg/l , CV 3.3%在 346ug/l, CV3.8%,在728.g/l , CV 4.4%2结果解释期望值:10-46.0 .g/i

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