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1、-专题一 课题1 果酒和果醋的制作1、发酵：通过微生物技术的培养来生产大量代产物的过程。2、有氧发酵：醋酸发酵 谷氨酸发酵 无氧发酵：酒精发酵 乳酸发酵 3、酵母菌是兼性厌氧菌型微生物真菌 酵母菌的生殖方式：出芽生殖4、在有氧条件下，酵母菌进展有氧呼吸，大量繁殖。 C6H12O66O26CO26H2O5、在无氧条件下，酵母菌能进展酒精发酵。 C6H12O62C2H5OH6CO26、20左右最适宜酵母菌繁殖 酒精发酵时一般将温度控制在18-257、在葡萄酒自然发酵的过程中,起主要作用的是附着在葡萄皮外表的野生型酵母菌.在发酵过程中,随着酒精浓度的提高,红葡萄皮的色素也进入发酵液,使葡萄酒呈现深红
2、色.在缺氧 呈酸性的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到制约。8、果醋制作过程中，起作用的菌种是醋酸菌，该菌种是单细胞细菌(原核生物),代类型是异养需氧型,生殖方式为二分裂9、当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。 C2H5OHO2CH3COOHH2O 在变酸的酒的外表观察到的菌膜就是醋酸菌在液面繁殖而形成的10、控制发酵条件的作用醋酸菌对氧气的含量特别敏感，当进展深层发酵时，即使只是短时间中断通入氧气，也会引起醋酸菌死亡。醋酸菌最适生长温度为3035，控制好发酵温度，使发酵时间缩短，
3、又减少杂菌污染的时机。有两条途径生成醋酸：直接氧化和以酒精为底物的氧化。 11、实验流程：挑选葡萄冲洗榨汁酒精发酵果酒醋酸发酵果醋12、酒精检验：果汁发酵后是否有酒精产生，可以用重铬酸钾来检验。在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反响呈现灰绿色。先在试管中参加发酵液2L，再滴入物质的量浓度为3mol/L的H2SO43滴，振荡混匀，最后滴加常温下饱和的重铬酸钾溶液3滴，振荡试管，观察颜色13、充气口是在醋酸发酵时连接充气泵进展充气用的；排气口是在酒精发酵时用来排出二氧化碳的；出料口是用来取样的。排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连接，其目的是防止空气中微生物的污染。开口向下的目的是有利于二氧化碳的排
4、出。使用该装置制酒时，应该关闭充气口；制醋时，应该充气口连接气泵，输入氧气。14 利用上图制作果酒、果醋时，在发酵过程中，每隔12h将瓶盖拧松一次注意，不能翻开瓶盖目的是放出二氧化碳。当发酵产生酒精后，对装置的处理是翻开瓶盖，盖上一层纱布，进展制葡萄醋的发酵15防止发酵液被污染：榨汁机要清洗干净，并晾干发酵装置要清洗干净，并用体积分数70%的酒精消毒，或用洗洁精洗涤。装入榨好的葡萄汁后，封闭充气口。16 控制好发酵条件：将葡萄汁装入发酵瓶，留大约三分之一的空间。制葡萄酒的过程中，将温度严格控制在1825，时间控制在10到20天，可通过出料口发酵的情况进展及时的监测。在制葡萄醋的过程中，将温度严
5、格控制在3035，时间控制在7到8天，并注意适时通过充气口充气。疑难解答1你认为应该先冲洗葡萄还是先除去枝梗.为什么.应该先冲洗，然后再除去枝梗，以防止除去枝梗时引起葡萄破损，增加被杂菌污染的时机。2你认为应该从哪些方面防止发酵液被污染.如：要先冲洗葡萄，再除去枝梗；榨汁机、发酵装置要清洗干净，并进展酒精消毒；每次排气时只需拧松瓶盖，不要完全揭开瓶盖等。3制葡萄酒时，为什么要将温度控制在1825.制葡萄醋时，为什么要将温度控制在3035.温度是酵母菌生长和发酵的重要条件。20左右最适合酵母菌的繁殖。因此需要将温度控制在其最适温度围。而醋酸菌是嗜温菌，最适生长温度为3035，因此要将温度控制在3
6、035。专题二 课题1 微生物的实验室培养培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，是进展微生物培养的物质根底。培养基按照物理性质可分为液体培养基 半固体培养基和固体培养基。在液体培养基中参加凝固剂琼脂后，制成琼脂固体培养基。微生物在固体培养基外表生长，可以形成肉眼可见的菌落。根据菌落的特征可以判断是哪一种菌。液体培养基应用于工业或生活生产，固体培养基应用于微生物的别离和鉴定，半固体培养基则常用于观察微生物的运动及菌种保藏等。培养基的化学成分包括 水 、 无机盐 、 碳源 、 氮源 ，此外还需要满足微生物生长对Ph、特殊营养物质以及氧气的要求培养基还要满足微生物
7、生长对PH、特殊营养物质以及氧气的要求。例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时须将培养基的pH调至酸性，培养细菌是需要将pH调至中性或微碱性，培养厌氧型微生物是则需要提供无氧的条件无菌技术获得纯洁培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，要注意以下几个方面：对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进展清洁和消毒。将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进展灭菌。为防止周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进展。实验操作时应防止已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的.答：无菌技术还能有效防止操作者自
8、身被微生物感染。消毒与灭菌的区别消毒指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体外表或部一局部对人体有害的微生物不包括芽孢和孢子。消毒方法常用煮沸消毒法，巴氏消毒法对于一些不耐高温的液体还有化学药剂如酒精、氯气、石炭酸等消毒、紫外线消毒。灭菌则是指使用强烈的理化因素杀死物体外所有的微生物，包括芽孢和孢子。灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。灭菌方法：接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法；玻璃器皿、金属用具等使用干热灭菌法，所用器械是干热灭菌箱 ；培养基、无菌水等使用高压蒸汽灭菌法，所用器械是高压蒸汽灭菌锅 。外表灭菌和空气灭菌等使用紫外线灭菌法，所用器械是紫外灯 。比拟项理化因素的作用强
9、度消灭微生物的数量芽孢和孢子能否被消灭消毒较为温和局部生活状态的微生物不能灭菌强烈全部微生物能制作牛肉膏蛋白胨固体培养基1方法步骤：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。 称量：牛肉膏比拟黏稠，可以用玻棒挑取，放在称量纸上称量。牛肉膏和蛋白胨都容易吸潮，称取时动作要迅速，称后要及时盖上瓶盖。倒平板时要待培养基冷却至50左右时，在酒精灯火焰附近进展，等平板冷凝将平板倒置倒平板操作的讨论1.培养基灭菌后，需要冷却到50左右时，才能用来倒平板。你用什么方法来估计培养基的温度.提示：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进展倒平板了。2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰.
10、答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置.答：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基外表的湿度也比拟高，将平板倒置，既可以使培养基外表的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗.为什么.答：空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。纯化大肠杆菌1微生物接种的方法最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。2平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基外表连续划线的操作。将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的外表
11、。在数次划线后培养，可以别离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，这就是菌落。3稀释涂布平板法是将菌液进展一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的外表，进展培养。分为系列稀释操作和涂布平板操作两步。4用平板划线法和稀释涂布平板法接种的目的是：使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在培养基外表形成单个的菌落，以便于纯化菌种。5平板划线法操作步骤：将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红。在火焰旁冷却接种环，并翻开棉塞。将试管口通过火焰。将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液。将试管通过火焰，并塞上棉塞。左手将皿盖翻开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板，
12、划三至五条平行线，盖上皿盖。注意不要划破培养皿。灼烧接种环，待其冷却后，从第一区域划线的末端开场往第二区域划线。重复以上操作，在三、四、五区域划线。注意不要将最后一区的划线与第一区相连。将平板倒置放入培养箱中培养。平板划线操作的讨论1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环.在划线操作完毕时，仍然需要灼烧接种环吗.为什么.答：操作的第一步灼烧接种环是为了防止接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线完毕后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。
13、划线完毕后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，防止细菌污染环境和感染操作者。2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进展划线.答：以免接种环温度太高，杀死菌种。3.在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开场划线.答：划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开场，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。6涂布平板操作的步骤：将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中。取少量菌液，滴加到培养基外表。将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃尽后，冷却810s。用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基外表。涂布平板操作的讨论
14、涂布平板的所有操作都应在火焰附近进展。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第2步应如何进展无菌操作.提示：应从操作的各个细节保证“无菌。例如，酒精灯与培养皿的距离要适宜、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围；等等。菌种的保存1对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法。临时保藏方法将菌种接种到试管的固体斜面培养基上，在适宜的温度下培养。当菌落长成后，将试管放入4的冰箱中保藏。以后每36个月，都要重新将菌种从旧的培养基上转移到新鲜的培养基上。缺点：这种方法保存的时间不长，菌种容易被污染或产生变异。2对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法。在3mL的甘油瓶中，装入1
15、mL甘油后灭菌。将1mL培养的菌液转移到甘油瓶中，与甘油充分混匀后，放在20的冷冻箱中保存。疑难解答确定培养基制作是否合格的方法将未接种的培养基在恒温箱中保温12天，无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。课题2 土壤中分解尿素的细菌的别离与计数尿素是一种重要的农业氮肥，尿素并不能直接被农作物吸收。只有当土壤中的细菌将尿素分解成氨之后，才能被植物利用。土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为他们能合成脲酶尿素最初是从人的尿液中发现的筛选菌株1实验室中微生物的筛选应用的原理人为提供有利于目的菌株生长的条件包括营养、温度、pH等，同时抑制或阻止其他微生物生长。2选择性培养基在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称作选择培养基。3配制选择培养基的依据根据选择培养的菌种的生理代特点参加*种物质以到达选择的目的。例如，培养基中不参加有机物可以选择培养自养微生物
