离子色谱操作教程

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1、一、准备工作：去离子水：必须准备足量的去离子水淋洗液：配制好要用的淋洗液配制标准溶液：提前准备好预分析离子的标准溶液（均用去离子水 配制）样品：进样前要用0.45 m的过滤膜过滤检查淋洗液的液面高度，不应低于200ml二、开关机：1、开机：打开N2保护气，调钢瓶分压在0.1-0.2Mpa之间，淋洗液前仪器压力 表3-6psi之间； 打开IC、PC电源开关；打开仪器软件开关、开泵；开泵稳定一段时间后压力大于1000psi后打开抑制器； 检验仪器是否正常:压力1300-1500psi以下，一般阳离子1140-1160psi 之间，阴离子在1140-1180之间；系统压力的波动应小于土 10psi；

2、 阴离子的背景电导应低于20 uS；阳离子的背景电导应低于10US； 内部无泄漏；抑制器、废液出口有连续气泡，泵出口无气泡2、关机：关抑制器关泵关软件关保护气关电源离子色谱程序设定方法1、打开色谱工作站，点击计算机代码，双击与控制面板2、 确认各模块的“connected”图标均为绿色后，点击红色正方形图标(stop flow)和绿 色三角图标(continue)，开泵(pump on/off)，设定流速3、点击蓝色圆形图标(acquisition on/off)，选ECD-ECD_1，选择抑制器类型，输入淋洗 液浓度，点击“确定”开始采集基线(如果这次和上次用的同一个系统，则可以直接连接后开

3、泵，点击蓝色图标采集基线)4、 阳离子分析：柱：CS12A抑制器：CAES淋洗液：20mM MSA淋洗液流量：1.0ml/min 测试电流：65mA阴离子分析:柱:AS14 抑制器:ASRS_4mm 淋洗液:3.5mM Na2CO3/1.0Mm NaHCO3 淋洗液流量：1.2ml/min测试电流：20mA5、设定运行程序(Program File) 依次点击file和new，选择program file，点击“OK”，点击“下一步”，确认泵的 工作方式(isocratic)、淋洗液通道人、高/低压极限(设为0-3000psi)和流速是 否正确，点击“下一步”。选择手动进样“manual”，进

4、样时间设为30s 将acquisition time调整至0-18min，点击“下一步”，确认以下参数:采样频率(5Hz)， 自动调零“Yes”池温柱温均为“35C”选择抑制器类型，输入淋洗液浓度，电流 为推荐值，点击“下一步” 选择“ review the program in a new window”，点击 “完成” 在程序的第一行添加一下提示信息：message “请进样”，删除“0.000”的“inject”(注意：绿色字体为注释信息，不起作用) 存盘退出(推荐存入独立的“ program ”子目录中)6、建立方法文件(mothed file) 依次点击file和new，选择meth

5、od file 依次点击file和save as，存盘退出(推荐存入独立的“method”子目录中)7、建立样品表(sequence) 依次点击file和new，选择sequence (using wizard)，点击“OK”，点击“下一步”(连 续两次次)填入未知样的数量“number of”和每个样的平行测定次数“injection per”， 点击“apply”，点击“下一步”，填入标准样品的数量“number of”和每个样的平行 测定次数“injection per”，点击“apply”，点击“下一步”，选择正确的程序文件，点 击“open”，选择正确的方法文件，点击“open”，选

6、择方法文件和程序文件，选择正 确的报告文件，点击“下一步”，为这个sequence起名“sequence name”，点击“完 成”8、运行标准样品 点击蓝色圆形图标（acquisition on/off），选择“yes”，停止采集基线 依次点击batch和start o 点击“ add”，打开需要运行的样品表点击“ready check”，如果样品表没有错误，将出现“ready check was successful”提示，点击“确定” 点击“start”，注入样品，点击“确定”8、处理标准曲线（以多点校正为例） 依次点击file和browser，双击需要处理的标准样品文件（第一个标准点）

7、，依次点击 view 和 QNT-Editer 点击屏幕左下角“General”，在“Dimension of”处输入浓度单位“mg/L” 点击相邻的“Detection”，设定最小峰面积为0.005。点击键盘“I”，选择“是（Y）” 将新生成的“Minimum Area” 重新选为 “Inhibit Integration”，按“Enter” 键 点击键盘的“I”后，将鼠标放在水负峰和F-之间的水平基线处，在Ret.Timemin的 第三行输入屏幕左下角显示的时间“2.5”点击相邻的“Peak Table”选择Edit、Autogenerate Peaktable，依次点击OK和确定，在“P

8、eak Name”下顺序输入离子名称，注意：定性分析到此结束。如需进行单点校正，直接执行下一步。在“Cal.Type”下“Lin”处双击左键，选择“Linear with Offset”，点 击“OK”，在“Loff”处点击右键，从弹出的对话框中选择“Fill Column” 点击相邻的“Amount Table”，注意：如果进行单点校正，在“Amount mg/L”处输入 各个组分的浓度，存盘退出 在“ Amount mg/L” 处点击右键，依次选择 Columns 和 Edit Amount Columns。点击“Auto-Generate”，按“Apply”键，按“。侦键退出 在“Amo

9、unt”下输入各个组分的标准点浓度，屏幕右上方立即出现某一离子的标准曲 线，点击“Integration”图标，选择“Calibration”，查标准曲线合格后，存盘退出离子色谱的基本操作一、淋洗液的配制： 阳离子20mM的MSA （甲磺酸）。配制：2.6mlMSA（分析纯即可）溶解在2升的淋洗液瓶中。注意配制过程中MSA 要用0.45um的滤膜过滤，以防止堵塞管路。 阴离子3.5mMNa2CO3/1.0mMNaHCO3。配制：称取37.1g Na2CO3/8.4g NaHCO3 （分析纯即可）定容于1升的容量瓶中，配 成350 mMNa2CO3/100mMNaHCO3的阴离子淋洗液母液（可保

10、留半年），用前需稀 释100倍，即取20ml母液于2升的淋洗瓶中。 注意：淋洗液配制过程中一定要充分摇匀。二、样品前处理 过滤：0.22pm, 0.45pm过滤膜 稀释：未知样品稀释100倍基体消除：去除样品中所包含的，有可能损坏仪器或者影响色谱柱/抑制器性能的成分（如：重 金属离子、有机大分子）去除样品中所包含的，有可能干扰目标离子测定的成分（如：高离子强度基体）三、SRS使用注意事项淋洗液中含有机溶剂时，使用外接水或者化学抑制； 尽量将电流设定为自动生成电流的最小值以延长抑制器的使用寿命； 抑制器与泵同时开关；或当泵压1000psi以上在开抑制器 每周至少开机一次，保持抑制器活性； 长期不

11、用应封存抑制器；重新启用前需要水化抑制器，具体操作如下： ASRS 从 ELUENT OUT 处注入 3mL H2O从 REGEN IN 处注入 5mL H2O CSRS 从 ELUENT OUT 处注入 3mL H2O从 REGEN IN 处注入 5mL H2O完成上述操作后，将抑制器平放30分钟。四、阴、阳离子色谱柱的更换： 准备工作：要在换柱之前开泵和抑制器洗柱，至少30min，直到仪器稳定为止，因为 仪器稳定才说明柱子内部液体以充满。 更换系统：更换淋洗液、保护柱、分离柱、抑制器；接通电源，停泵，设置淋洗液存 量；打开保护柱进口的接头，开泵；排气泡，调节流速；清洗管路，用试纸检验流出

12、溶液的pH值，与分离柱要求的淋洗液一致后停泵；拧紧保护柱进口的接头，进行正 常操作。 注意：每个接口的正确对应，保护柱和色谱柱连接时要注意液流方向，保护柱箭头向 下、色谱柱箭头向上。抑制器连接时注意阴阳离子的不同，阴离子的regen in/out均 为平头接口，而阳离子则只有regen out为平头接口，注意更换。换下来的柱子及抑 制器一定要密封好，已保持内部有溶液，防止内部溶液干掉，阴离子的抑制器regen in/out用专用堵头密封。柱子装好后先开泵看是否漏水（气），再装上外面的两块面板。五、排气泡：如果淋洗液被抽干或者更换需要排气泡。 具体操作：首先开泵，将注射器插入右侧主泵，旋松主泵的

13、旋钮，此时有液体从泵中 流出，流到8ml左右关闭泵，拧紧主泵旋钮，取出注射器，弹出注射器内气泡，然后 将注射器插回主泵，打开左侧副泵旋钮后，再缓慢打开主泵旋钮，慢慢将注射器内液 体推入泵内，从副泵流出，旋紧两个泵的旋钮。六、测柱头压：要检查是否是柱子被堵塞时要分别测不地方的柱头压力。 正常的柱头压力值：过六通阀到保护柱前正常压力100psi以下；过保护柱后压力小于 500-600psi；过分析柱后压力小于1500psi；系统正常压力1300-1500psi以下。七、分离柱的存储与清洗 分离柱的储存：在存储前用淋洗液正常运行至少10min，取下保护柱和分离柱，用死 接头将分离柱/保护柱两端封堵

14、分离柱的清洗：按清洗液一色谱柱一保护柱的流路进行清洗，流速为1.0ml/min ；清 洗程序及时间为：去离子水-15min，清洗液-60min，去离子水-15min，淋洗液-30min 清洗液的类型阴离子柱： 低价态亲水离子污染(常用 X10倍淋洗液 高价态疏水离子污 80%乙月青/20% 200mM NaCl(用 HCl调节pH=2.0) 金属离子污染一一0.1M草酸阳离子柱 高价阳离子/酸溶性污染 10mM HCl(15min)1M HCl(60min)10mM HCl(15min) 疏水性阳离子/有机污染 10% 100mM HCl/ 90%乙青(30min)八、抑制器的存储与清洗抑制器

15、的存储： 抑制器的清洗：以1.0mL/min的流速，按清洗液-ELUENT IN-ELUENT OUT-REGEN IN-REGEN OUT流路进行清洗 清洗液的类型阴离子抑制器 金属污染或沉淀 0.1M KCl/1.0M HCl(30min)去离子水(10min)0.2N硫酸淋洗液(10min) 有机污染 10%1.0M HCl/90%ACN(30min)去离子水(10min)0.2N硫酸淋洗液(10min) Na2CO3 阳离子抑制器 金属污染或沉淀 1.0M MSA(30min)去离子水(10min)0.2N NaOH淋洗液(10min) 有机污染10% 1.0M MSA/90%ACN(30min)其余同上