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1、 血液免疫学疑难问题 抗原、抗体的检测及其临床意义 上海血液中心 向东血液免疫学试验的要求安全的输血有效的输血合理的输血输血的简单和复杂 发现ABO血型,使输血变得简单和安全。 当输血的有效性和合理性越来越受到重视,输血也变得越来越复杂。 ABO亚型以及ABO以外血型 血液成分的输注 输血前的血液处理 输血的时机和输血量急性溶血性输血反应临床表现迟发型溶血性输血反应临床表现* 各种抗血清:抗A、抗B、抗D、抗E、抗M、抗P1* 各种红细胞试剂:Ac、Bc、Oc、筛选细胞、谱细胞* 各种辅助试剂:抗球蛋白、聚凝胺试剂、LIM、酶抗体筛选和鉴定检测不规则抗体的意义和方法抗-M总结抗体检测和鉴定 免
2、疫血液学的基本操作 耗时耗力 延误患者治疗 系统的方法是关键 指南少观察线索!温度酶反应强度反应方式剂量效应溶血提示: 反应强度 给反应强度准确打分非常重要 为鉴定抗体和判断抗体临床意义提供线索 如果血清反应有阳性和阴性,阳性越强,阴性反应越可信。 反应都弱的情况下阴性可能并非抗原缺失而是表达弱,如Ch, Rg, Kna, Yka一些通用的提示 反应温度 剂量效应( Rh,M, N, S, s, Jka, Jkb) 抗体排除时用纯合子细胞 观察溶血现象这可能是阳性反应 自身对照确定受检者血清是否与自身红细胞反应是重要的。这有助于决定是否存在自身抗体。7 病史很重要 在确定试验方法和解释试验结果
3、时,患者的病史有时起着关键性的作用。如孕产史、输血史、用药史等均可影响试验方法和结果。试验中的干扰因素自身抗体问题 自身抗体 冷自身抗体和温自身抗体 如何锁定目标? 针对红细胞的直抗试验和放散试验,针对血清的间抗试验 病史,输血史 它们的临床意义 是否为温抗体?药物抗体,类抗体,多凝集 是否能提供配合型的血?是否有权宜方案?复杂的温自身抗体不完全温自身抗体 主要是IgG IgA大约占1/100 温IgM大约也占1/100 有两种Ig同时致敏红细胞,溶血均很严重。IgG抗体致敏量 IgG1 每个红细胞上致敏不到1000个抗体,一般不会导致红细胞破坏,MMA也为阴性 一般AIHA红细胞上IgG1抗
4、体数量在1200以上 IgG3 在DAT阴性时也能导致红细胞破坏 这是部分DAT阴性AIHA患者的病因 IgG4致敏红细胞不导致红细胞破坏 IgG2致敏红细胞情况不祥自身抗体特异性 常见的特异性是抗-LW,抗-Rh,Wra、Wrb 大约有2/3和Rh蛋白和RhAg蛋白有关,其它主要和带3蛋白有关。 去除Rh相关抗体后有一半左右和Wra及Wrb反应。 偶见其它特异性如Kell系统、Kidd系统以及MNSs系统等。类同种抗体的输血对有类抗e的患者分别输入ee和EE血型的红细胞,结果后者的破坏速度比正常值仅略有升高。温盐水抗体和药物抗体 检出药物抗体3例占1.9%。 需要和临床医生沟通,避免进一步的
5、药物反应出现。 检出温盐水自身抗体2例占1.3%。 温盐水抗体效价均很低,输血后无明显反应。药物导致AIHA 约占AIHA总数的15 自从甲基多巴停用后数量减少 现多见于青霉素相关药物,特别是苄基物如:他佐巴坦、替考拉宁、头孢替坦、头孢曲松等 链霉素和红细胞上M、D抗原相关的结构结合 非类固醇类抗过敏药物可致致命AIHA 如双氯芬酸 其它如氟奎诺酮类(Fluoroquinolones)抗生素、环丙沙星、氧氟沙星对相关技术的评价 相对临床表现已足够灵敏 仍然有局限性 任何一种方法均具有漏检的可能 对IgA抗体的漏检 对IgG3亚类抗体的漏检 抗体产生也有窗口期已经发生溶血性输血反应的患者 区分自
6、身抗体和同种抗体 分离自身和输入的红细胞 正确鉴定血型 正确鉴定抗体 血浆置换 交换输血常见的错误概念 对ABO亚型的恐惧 Rh阴性的患者一定要输Rh阴性血 配血阳性即不能输注 血浆也要同型输注 配血出现问题可以输注洗涤O细胞中国人ABO亚型有多少? 上海地区44万正常献血者血样筛选结果 A2和A2B占总人群的0.6(筛选自3562例A型及AB型血样) 其它ABO亚型共占0.016%A2亚型 A2亚型下图可见B细胞在A型受者体内大部分在血管内溶血,而A2细胞在O型人体内部分在血管外溶血(RES,被单核巨噬细胞和中性粒细胞吞噬)初次免疫引起溶血 没有初次反应发生溶血的报道 通常初次免疫后检出抗体
7、的时间为26m有自身抗体患者的输血 大多数有自身抗体的患者,血清中自身抗体很弱,所能掩盖的同种抗体更弱。 同型输血是较好的解决办法。- Rh同型- MNSs同型- Kidd同型- Duffy同型血浆中存在抗体血浆中的抗A和抗B造成受者溶血效价为816的抗A或抗B没有可见的红细胞破坏。抗A抗B效价需要达到512,输注250ml才能使受者明显溶血并出现血尿。效价2500的抗A25ml可使A型受血者出现血尿,以相应血型物质中和后即无反应。只有60O型献血者是万能献血者。输入抗D输入200ml抗D(IAT效价128)直抗阳性见球形红细胞达24hHb 1周内降低2.5g/dl。输入200ml抗D(IAT效价1000)12天内PCV从0.48降至0.22溶血持续2周。输入250ml抗D(IAT效价1000,患者在进行冠状动脉搭桥)6h后出现溶血症状,出现肾衰和肝坏死经抢救成活。洗涤O细胞不能解决的问题 ABO亚型中的类孟买型 冷自身抗体中常见的抗HI 患者存在ABO以外抗体 对IgA过敏反应普通的洗涤细胞无效34