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1、1. （一）（改编自 2015 天津理综、“金华十校”联考、“金丽衢”联考）请回 答与“a -淀粉酶的固定化及淀粉水解作用检测”的有关问题：（1）在工业化生产中，酶的固定化有多种方法，例如共价偶联法和吸附法。 与吸附法相比，共价偶联法对a -淀粉酶活性的影响 （更大/更小/ 差不多/无法确定）。（2）在该实验中，固相淀粉酶水解淀粉的鉴定试验结果为：淀粉溶液加指示剂呈蓝色； 加指示剂呈红色。（3）枯草芽抱杆菌也是制备蛋白酶的良好原料，为筛选枯草芽抱杆菌的蛋 白酶高产菌株，将分别浸过不同菌株的分泌物提取液（ae）及无菌水（f） 的无菌圆纸片置于含某种高浓度蛋白质的平板培养基表面，在37C恒温培宀艮
2、$中為沽度的养箱中放置23天，结果如右图所示。圆纸片 b周围没有形成明显清晰区的原因是 （答对两点即可）。若要保存菌株a,可将其 接种至保藏斜面上，培养后置于4C冰箱中保 存。在后续取用之前要先将菌种恢复至室温并 进行两次传代培养， 此操作的目的是 。下列不是制备枯草芽抱杆菌固体蛋白酶的工艺步骤的是（）A. 过滤 B.干燥 C.破碎 D.浓缩（4）纯化后的a -淀粉酶可用电泳法检测其相对分子量大小。在相同条件 下，带电荷量相同的蛋白质电泳速度越快，说明其分子量越_。（5）相对于唾液淀粉酶，枯草杆菌产生的a -淀粉酶具有 特性而 有利于工业生产。（二）（改编自镇海中学模拟题）人肌红蛋白（Myo）
3、是早期诊断急性心肌梗塞 的生化标志物之一。为制备抗Myo的单克隆抗体，科研人员进行了有关研究。（1）科研人员以 Myo 作为抗原免疫小鼠，取小鼠的脾脏细胞与骨髓瘤细胞 诱导融合并用选择培养基筛选融合细胞。在培养能产生抗体的阳性细胞时需降低 培养液血清浓度的原因是 。最终得到 细胞，该细胞具有A. 一个细胞核、同源二倍体核型B. 一个细胞核、异源四倍体核型C.两个细 胞核、同源二倍体核型D.两个细胞核、异源四倍体核型）。（2）双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法，具体原理如下图：标本（含抗原）固相抗体固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于单抗可以识别抗原分子的 。该检测方法中，酶标抗
4、体的作用是 。（3）研究人员获得三种Myo单克隆抗体，分别标记为A、B、C。为检测它 们之中哪两种适合用于双抗体夹心法，科研人员至少需进行 组实验,检 测并比较各组实验的 。2. (一)请回答下列酵母菌的有关问题(1) 若要对某液体内的酵母菌进行计数，可采用涂布分离法，而此法统计的 结果往往较实际值偏低，原因可能是(写出一点即可)(2) 对于频繁使用的酵母菌菌种可以将试管放入 保存(3) 酵母菌可以用于制果酒，需要将葡萄浆放入发酵瓶中，但装量不能超过2/3,原因是(写出两点即可)。发酵完毕后将发酵液用两层纱布过滤，将获得的滤液加盖密封，静置。待沉淀后，_即 为葡萄酒(4) 假丝酵母是一种酵母菌
5、，可用于生产泡菜，发酵产物中有亚硝酸，亚硝 酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后的产物与N-1-萘基乙二胺 ，形成 紫红色产物(5) 测定光密度值时，取10ml样品溶液，加入4.5ml氯化铵缓冲液2.5ml溶液和5ml显色液，定容后混匀。若测得OD值偏大，则应A.增大光的波长，光程不变B.减小光的波长，光程不变C. 增大光程，光的波长不变D. 减小光程，光的波长不变(二)下面是将乙肝病毒控制合成病毒表面蛋白的基因 HBsAg 导入巴斯德毕赤 酵母菌生产乙肝疫苗的过程及有关资料： 资料1： 巴斯德毕赤酵母菌可用培养基中甲醇作为其生活的唯一碳源，此时 AOX1基因受到诱导而表达5 AOX1和3 AO
6、X1 (TT)分别是基因AOX1的启动子 和终止子 资料 2：巴斯德毕赤酵母菌内无天然质粒，所以改造出了图 1 所示的 pPIC9K 质 粒作为载体，其与目的基因形成的重组质粒经酶切后可以与酵母菌染色体发生同 源重组，将目的基因整合到染色体中进行表达资料3：启动子是RNA聚合酶识别、结合和开始转录的一段DNA序列，终止子 是给予RNA聚合酶转录终止信号的DNA序列庚料3:国制臨關切也限制稱SnaB Sac IBg il识刖叶：9.TACGTA.ATGCAT.CCTAGG.GGATCC.T.CAGCTC.CTCGAG.T.AGAICT.TCTAGA.t请你回答下列有关问题：（1）该实验中可使用双
7、酶切获得HBsAg基因，双酶切的优点有（写出一点即 可）（2）用DNA连接酶将切割后的HBsAg基因和pPIC9K质粒连接成重组质粒，导入大肠杆菌体内，这样做的目的是图】 图2（3）如果用限制性核酸内切酶 SnaB I、Avr II、Sac I 对图中质粒进行切割，用一种酶、两种酶和三种酶分别切割 时形成的 DNA 片段种类与用一种酶和两种酶分别切割时形 成的DNA片段种类 （填“相同”或“不同”）（4）右图为HBsAg某DNA片段一条链的碱基排列顺序。其中图1的碱基序列已经解读，其顺序是GGTTATGCGT,请你解读图2 的碱基排列顺序（5）写出质粒载体作为基因工程的工具，应具备的条件（写出
8、两个即可）（6）该酵母菌可用于降解工业废水中的甲醇，这属于 的生态 工程，而有些农村地区将农作物秸秆发酵处理，利用沼气作为能源属于 的生态工程。3（一）请回答下列有关酶的制取与利用的问题。（1）不同的酶有不同的特性，可应用于不同领域，如TaqDNA聚合酶有耐高温特性可用于（2） 耐高温的a-淀粉酶在工业上有很大用途，可利用 生产。首先要筛选高表达量的菌株，可采用涂布分离法，一般先稀释 倍。涂布之后要将培养皿倒置培养，所以标签要贴在(3) 获得该酶后要进行固定化处理，下列说法正确的是 A. 固定化酶技术就是固定反应物，并将酶依附着载体围绕反应物旋转的技术B. 固定化酶的优势在于能催化一系列的酶促
9、反应C. 固定化酶中的酶无法重复利用D. 固定化酶是将酶固定在一定空间内的(4) a-淀粉酶催化淀粉反应生成的糊精可使淀粉指示剂显红色，为测定反应后液体中糊精含量，可用光电比色法测量其，然后与比较得出结果。(二)农药的长期使用，导致棉铃虫的抗药性不断增强。某科研单位成功地 将能产生抗虫毒蛋白的细菌的抗虫基因导入棉花细胞中，得到的棉花新品种对棉 铃虫的毒杀效果高达80%以上。请回答下列问题。(1) 农药的使用在消灭农业害虫的同时，也污染了水、空气和土壤等无机环境,更为严重的是使得 迅速下降。为了改变现状,除了培育抗虫棉以外,科学家还利用生物种间关系如捕食、寄生等,发展技术。(2) 抗虫基因之所以
10、能整合到植物DNA分子上,原因是。(3) 抗虫棉花主要用到了基因工程技术，该技术的主要原理是单个棉花细胞经过克隆培养可发育成完整植株，但动物细胞的克隆要难得多，因 为随着它们在发育过程中 的变化，分化使其在形态和功能上已高度 特化。(4) 基因工程还可获得净化污水的植物，这属于生态工程中的工程。(5) 由于不同种类植物或同种植物的不同基因型个体之间 ，细胞全能性的表达能力大不相同。4. (一)请回答关于生物选修一课本的有关问题(1) 在做“大肠杆菌的培养与分离”有关实验时，小锋同学利用划线分离法分 离纯化菌株。假如他严格按照书中的示意图进行操作，则他共需要给接种环灼烧 灭菌 次;经一段时间培养
11、，他发现有些划线区域没有菌落生长，则可能的 原因是 。(2) 在制作果醋的时候需要扩大培养醋化醋杆菌，小锋需要配置液体培养基：蛋白胨3g， 5g，甘露醇25g。用500ml的锥形瓶在 中振摇培养48h,为保证发酵瓶中有空气，实验中采取的措施有(写一点) 。(3) 植物组培时，可以将大量元素、微量元素、配成母液,用时稀释。逐渐降低湿度进行锻炼后，将其转移至中培养，即可长成植株并开花(二) a.大肠杆菌pUC118质粒的某限制酶唯一酶切序列，位于该质粒的lacZ 基因中，lacZ基因中如果没有插入外源基因，lacZ基因便可表达出b-半乳糖苷 酶，当培养基中含有IPTG和X-gal时，X-gal便会
12、被b-半乳糖苷酶水解成蓝色， 大肠杆菌将形成蓝色菌落；如果lacZ基因中插入了外源基因，带有PUC118质粒 的大肠杆菌便不能表达b-半乳糖苷酶，培养基中的X-gal不会被水解成蓝色， 大肠杆菌将形成白色菌落。PUC118还携带了氨苄青霉素抗性基因。下图是利用 lacZ基因的插入失活筛选重组质粒示意图。据图回答下列问题：(1) 选择大肠杆菌作为研究材料，主要原因是：它体积小，结构简单 易培养, , 等。(2) 作为受体的大肠杆菌，为了方便筛选导入重组质粒的菌体，则需要图2ffil o5. （一）某些土壤细菌可将尿素分解成二氧化碳和氨气供植物吸收和利用。请回 答下列问题。（1 ）用来筛选分解尿素
13、细 菌的培养基通常要加入 KHPO 其作用 是24 。与出两点），培养基加上封口膜后灭菌，待冷却至加入通过G6玻璃砂漏 斗过滤的尿素溶液。G6玻璃砂漏斗使用后需要用lmol/L的盐酸浸泡，并, 用蒸馏水洗至中性2） 用划线分离法纯化尿素细菌过程中，在第二次及其后的划线操作须从上一次划线末端开始划线的原因是，通常对获得的纯菌种可以依据菌落的大小体积等菌落特征对细菌进行初步。（3）如图研究人员采用交联法固定化酶，以戊二醛作为交联剂，发现 酶活性降低的原因可能。A.增加了酶的分子量B.改变了部分酶的活性部位的空间结构C. 占据了酶的活性部位 D. 分解了部分酶（4）含尿素的牛羊粪便可作为肥料施投到农
14、田，这样也就实现了 （二）请回答有关动植物克隆的问题（1）在植物组织培养过程中，原生质体的分离和培养在解决整体植株上研究植 物性状及其遗传特性的困难中，起到了重要作用，则原生质体融合完成的标志是 。直到处于自然湿度下。 （一）下面是通过转基因技术利用植物生产聚羟基烷酯的过程，回答相关问题。（1）科学家首先在特定细菌中获取目的基因，若其序列未知，则可以米用 方法获取;若根据其蛋白质产物逆推基因序列，则所获得的序列与实际序列A.基本相同B.完全相同C.有较大差别D.无法比较（2）细胞壁的存在，给植物细胞转基因过程造成了一定的阻碍，所以科学家通 常利用植物原生质体完成转化过程，其获取方法是：在 甘露
15、醇溶液环境 中（较高渗透压）用纤维素酶与果胶酶水解细胞壁；获取原生质体后，通常采用 方法（写出两种）将目的基因导入细胞。（3）诱导转基因原生质体 后，再通过植物组织培养过程 植物 体。（4）利用该植物生产的聚羟基烷酯制造可降解塑料，这属于生态工程应用领域的 。（填一种生态工程类型）(3) 在培养扩大重组细菌的操作中，需要用到每分钟200转的摇床进行培养， 使用摇床培养的好处是, Qb.研究过程中发现有一种D基因可以有效转移到另一种大肠杆菌质粒中，图 表示含有目的基因 D 的 DNA 片段长度 (bp 即碱基对 )和部分碱基序列， 图表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有Mps I、BamH I、Mbo I、Sma I 4种限制性核酸内切酶，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为
