微生物检验知识点

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1、 1、微生物的分类:(三型八大类)*全部是重点*三型八大类特点非细胞型微生物病毒、亚病毒和朊粒无细胞结构,结构最简单,体积最微小,能通过滤菌器;单一核酸;活细胞内寄生。自我复制方式进行增殖原核细胞型微生物细菌、放线菌、螺旋体、支原体、衣原体、立克次体仅有原始核;缺乏完整细胞器。真核细胞型微生物真菌、原虫细胞核分化程度较高;有丝分裂进行繁殖;有多种完整细胞器。2、(正常菌群)条件致病性微生物临床上多引起内源性感染。3、G+菌特有成分:磷壁酸(重要表面抗原,可用于细菌血清学分型)(外毒素)4、G-菌特有成分:外膜层(由脂多糖(内毒素)、脂质双层(磷脂)、脂蛋白)5、G+菌和G-菌细胞壁的共同成分是

2、肽聚糖。结构由聚糖骨架、四肽侧链和五肽交联桥(G-菌无。是溶菌酶、青霉素作用部位)6、细菌的主要遗传物质:核质(染色体)、质粒(存在于胞质,双链闭合环状DNA分子)、转位因子7、细菌特殊结构:荚膜(保护,致病,抗原性,鉴别)、芽胞、鞭毛(运动器官)、菌毛(普通菌毛粘附,致病性;性菌毛接合方式转移遗传物质)*将芽胞是否被杀死而作为判断灭菌效果的指标8、L型(细胞壁缺陷)菌落:“油煎蛋”(荷包蛋)样菌落(典型L型细菌)。颗粒型菌落(简称G型菌落)丝状菌落(简称F型菌落)。高渗环境生长。(环丙沙星)9、自营菌:以无机物为原料;异营菌(腐生菌:以无生命的有机物质为营养物质;寄生菌:以宿主体内有机物为原

3、料),所有致病菌都是异营菌。10、细菌营养物质:水、碳源、氮源、无机盐类和生长因子。11、细菌个体的生长繁殖方式:无性二分裂,在对数期以几何级数增长12、细菌分类(伯杰)等级依次为界、门、纲、目、科、属、种(最小分类单位)。13、常用的细菌培养方法是:需氧培养法、二氧化碳培养法和厌氧培养法;14、通常由正常无菌部位采取的标本接种血平板,置于空气或含5%10%CO2的气缸中培养,大部分细菌可于2448h生长良好。15、血清学诊断时,一般要在病程早期和晚期分别采血清标本23份检查,抗体效价呈4倍或以上增长才有价值。16、透射电子显微镜适于观察细菌内部的超微结构;扫描电子显微镜适于对细菌表面结构及附

4、件的观察。17、细菌染色的基本程序:涂片(干燥)固定初染染色(媒染)(脱色)(复染,使脱色菌体着色)。18、胃部细菌喜酸,肠道细菌喜碱19、SS琼脂有较强的抑菌力,用于志贺菌和沙门菌的分离。因选择性过强,可影响检出率,所以,使用时最好加一种弱选择平板以配对互补。20、碱性琼脂或TCBS琼脂用于从粪便中分离霍乱弧菌及其他弧菌。21、痰标本:血平板、中国蓝麦康凯、巧克力平板作分离。22、中国蓝麦康凯用于筛选G-杆菌;23、含杆菌肽的巧克力平板(含有V和X因子)用于筛选嗜血杆菌24、连续划线分离法:杂菌不多的标本。分区划线分离法:杂菌量较多的标本。25、斜面接种法:该法主要用于单个菌落的纯培养、保存

5、菌种或观察细菌的某些特性26、倾注平板法:牛乳、饮水和尿液细菌计数27、涂布接种法:常用于纸片法药物敏感性测定,也可用于被检标本中的细菌计数。28、半固体培养基用于观察细菌的动力(沿穿刺线生长呈模糊或根须状,并使培养基变混浊为动力阳性)29、溶血:菌落周围血培养基变为绿色环状;红细胞外形完整无缺。溶血:红细胞的溶解在菌落周围形成一个完全清晰透明的环。溶血:无溶血。双环:在菌落周围完全溶解的晕圈外有一个部分溶血的第二圆圈。30、氧化-发酵试验(O/F试验):有氧参加氧化型;无氧降解发酵型;不分解葡萄糖而分解蛋白胨产碱型。(肠杆菌科细菌发酵型全+)31、甲基红试验(与V-P试验相反):阳性红色,阴

6、性黄色。大肠埃希菌(+),产气肠杆菌(-)32、白喉棒状杆菌:G+,异染颗粒、毒力试验,Elek平板,亚碲酸钾血琼脂。外毒素(毒血症)只有携带-棒状噬菌体的溶原性白喉杆菌才能产生外毒素。33、内毒素测定主要用于确诊患者是否发生G-细菌感染。常采用鲎试验。本方法灵敏度高,可检查出0.00050.005g/ml内毒素。外毒素主要用于确诊患者是否感染革兰阳性菌及部分阴性菌。常用体内及体外毒力试验检测,也可通过ELISA法测定。34、葡萄球菌属:G+,耐热、耐干燥、耐高盐,是抵抗力最强的无芽胞细菌。凝固酶阳性葡萄球菌:金黄色葡萄球菌、中间型葡萄球菌和家畜葡萄球菌凝固酶阴性葡萄球菌(S):表皮葡萄球菌(

7、新生霉素敏感,医院感染,血培养污染)、腐生葡萄球菌(新生霉素耐药,凝固酶阴性。尿路感染)蛋白抗原:葡萄球菌A蛋白(SPA):完全抗原,有种属特异性,无型特异性。抗吞噬作用。多糖抗原:半抗原,型特异性。35、金黄色葡萄球菌:触酶试验、凝固酶试验(最简单)、耐热DNA酶试验、甘露醇发酵试验均阳性。对新生霉素敏感。透明溶血环。致病性:感染(化脓性感染,食物中毒,表现为急性胃肠炎),医院内感染,毒素性疾病。主要致病物质有血浆凝固酶、葡萄球菌溶血素、杀白细胞素、肠毒素、表皮溶解毒素和毒性休克综合征毒素等。耐药性检测:检耐甲氧西林金葡菌(MRSA),耐甲氧西林的凝固酶阴性葡萄球菌(MRSE),耐万古霉素金

8、葡菌(VRSA),耐万古霉素表皮葡萄球菌(VRSE)。NCCLS/CLSI推荐用头孢西丁纸片法检测mecA基因介导对苯唑西林耐药的葡萄球菌。36、链球菌属:G+球菌,触酶阴性。在液体培养基中生长时易形成长链而表现为沉淀生长。5%CO2环境。抵抗力不强,对各种常用消毒剂敏感,60加热30分钟即可杀灭。A群链球菌(猩红热)杆菌肽敏感;B群链球菌(败血症、肺炎、脑膜炎、咽喉炎)CAMP试验阳性(与金葡菌,箭头状溶血),水解马尿酸;D群链球菌七叶苷试验阳性(40%胆汁培养基,变黑);甲型()溶血性链球菌:菌落呈灰色针尖状,菌落周围有12mm宽的草绿色溶血环,故又称草绿色链球菌。本菌为条件致病菌。乙型(

9、)溶血性链球菌:通称溶血性链球菌,菌落较小,灰白色,菌落周围有24mm宽的透明溶血环。该型细菌致病性最强,常引起人和动物多种疾病。丙型()链球菌:呈灰白色细小菌落,在菌落周围无溶血环。一般无致病性。致病物质:链球菌溶血素、致热外毒素、透明质酸酶、链激酶、链道酶及M蛋白等。人类链球菌感染中85%以上由A群链球菌引起,对青霉素G高度敏感化脓型链球菌:杆菌肽敏感试验阳性。*肺炎链球菌:混浊生长,有荚膜(荚膜肿胀试验:阳性),大叶性肺炎。分解菊糖、胆汁溶解试验阳性、Optochin敏感试验阳性与草绿色链球菌鉴别。37、肠球菌属:G+,触酶试验阴性,与同科链球菌的显著区别在于肠球菌能在高盐(6.5%Na

10、Cl)、高碱(pH9.6)、40%胆汁培养基上和1045环境下生长,并对许多抗菌药物表现为固有耐药。重要医院感染病原菌,常引起尿路感染,其中大部分为医院感染,38、奈瑟菌属:G-双球菌,无鞭毛,无芽胞,有菌毛。专性需氧,氧化酶阳性。脑膜炎奈瑟菌:流行性脑脊髓膜炎(简称流脑),空气传播,对人致病的主要是A群。氧化酶、触酶试验阳性;分解葡萄糖、麦芽糖产酸不产气。39、淋病奈瑟菌:不酵解麦芽糖与蔗糖、30%H202试验阳性(与脑膜炎奈瑟菌鉴别)、40、卡他莫拉菌:社区呼吸道感染的主要病原体之一41、肠杆菌科:均为G-杆菌。均不形成芽胞。多数有周鞭毛(运动),少数菌属细菌可形成荚膜。发酵葡萄糖产酸、产

11、气,触酶阳性。(鉴别肠道致病菌和非致病菌常选用葡萄糖发酵试验)*菌体(O)抗原,鞭毛(H)抗原和表面抗原(如Vi抗原、K抗原)少数菌属如志贺菌属和克雷伯菌属无鞭毛,无运动能力。42、大肠埃希菌:俗称大肠杆菌,肠道正常菌群。泌尿系统感染。超广谱-内酰胺酶(ESBLs)的主要产酶株。尿素酶试验阴性,吲哚、甲基红、V-P、枸橼酸盐试验(IMViC),克氏双糖铁琼脂(KIA)上斜面和底层均产酸产气,H2S阴性,动力、吲哚、尿素(MIU)。硝酸盐还原、动力多数阳性。*引起肠道感染的大肠埃希菌有下列五个病原群。(1)肠产毒性大肠埃希菌(ETEC):引起霍乱样肠毒素腹泻(水泻)。(2)肠致病性大肠埃希菌(E

12、PEC):主要引起婴儿腹泻。(3)肠侵袭性大肠埃希菌(EIEC):可侵入结肠黏膜上皮,引起痢疾样腹泻(黏液脓血便)。(4)肠出血性大肠埃希菌(EHEC):又称产志贺样毒素(VT)大肠埃希氏菌(SLTEC或UTEC),其中O157:H7(常规检测项目)可引起出血性大肠炎和溶血性尿毒综合征(HUS)。临床特征为严重的腹痛、痉挛,反复出血性腹泻,伴发热、呕吐等。严重者可发展为急性肾衰竭。(5)肠黏附性大肠埃希菌(EAggEC):腹泻*与志贺菌相鉴别:醋酸钠和葡萄糖铵利用试验及粘质酸盐产酸三种试验。大肠埃希菌均为阳性,而志贺菌均为阴性。43、志贺菌属:痢疾杆菌(细菌性痢疾)。我国以福氏和宋内志贺菌引起

13、的菌痢最常见。强选择鉴别培养基沙门、志贺菌选择培养基(SS);弱选择培养基麦康凯或中国蓝培养基。分解葡萄糖产酸不产气,不分解乳糖(宋内志贺菌可迟缓分解乳糖),MR试验阳性,只有O抗原而无鞭毛抗原,伤寒沙门菌硫化氢和动力阳性致病因素为侵袭力、内毒素及外毒素44、沙门菌属:无芽胞,无荚膜的革兰阴性直杆菌。有周身鞭毛(除鸡沙门菌外),能运动,多数有菌毛。*伤寒沙门菌:产酸不产气。动力、脲酶,氧化酶一,触酶,硝酸盐还原。肥达试验。SR变异(光滑变粗糙,生理盐水中自凝);HO变异(失去鞭毛);相位变异(双相变单相);VW变异(失去Vi抗原)。肠热症(伤寒与副伤寒病,慢性发热症状)。第1、2周采血液,第2

14、、3周采粪便与尿液。整个病程中骨髓分离细菌阳性率较高。)45、变形杆菌属:迁徙生长。具有尿素酶,可以水解尿素,产生氨普通变形杆菌:靛基质和麦芽糖均阳性,鸟氨酸脱羧酶阴性;奇异变形杆菌相反。外-斐反应:普通变形杆菌OX19、OX2、0Xk的菌体抗原与某些立克次体有共同抗原,是用以诊断某些立克次体病的依据。46、鼠疫耶尔森菌:鼠疫。两极浓染。“钟乳石”状。2830。KIA结果利用葡萄糖,不利用乳糖,不产H2S,MIU均为阴性反应,丙氨酸脱氨酶试验呈阴性反应即可初步鉴定。47、小肠结肠炎耶尔森菌:翻滚旋转状运动。VP试验25阳性,37阴性,鸟氨酸脱羧酶阳性。脲酶阳性48、假结核耶尔森菌:两端浓染。2

15、5培养有周鞭毛,有动力,37培养无动力。49、肺炎克雷伯菌:医院感染,有荚膜,G-杆菌。灰白色大而黏的菌落,长丝状。触酶阳性、脲酶阳性。动力和鸟氨酸脱羧酶阴性是本菌的最大特点。易产超广谱-内酰胺酶。对氨苄西林天然耐药。50、肠杆菌属(阴沟肠杆菌、产气肠杆菌)有周鞭毛,能运动。IMVC:肠杆菌属多为;而大肠埃希菌是。51、黏质沙雷菌:革兰阴性细小杆菌。沙雷菌具DNA酶和葡萄糖酸盐阳性(与其他菌属细菌的根本区别)52、弧菌科:G-杆菌。共同特点是一群氧化酶阳性、具有极端鞭毛、动力阳性、发酵葡萄糖。弧菌属极端鞭毛、甘露醇、脂酶、生长需要NaCl、对O129敏感五项为*霍乱弧菌(耐碱不耐酸,pH8.49.2时生长最好)霍乱(米泔水样粪便);副溶血性弧菌(无盐不生长,绿色菌落)食物中毒(海产品)。*不染色标本穿梭流星状运动(鱼群状);O1群霍乱弧菌诊断血清,如果原运动活泼的现象停止(为制动试验阳性)在碱性琼脂平板上水滴状菌落。在TCBS(强选择)上黄色菌落。在含亚碲酸钾(或庆大霉素)琼脂平板上菌落中心呈灰褐色氧化酶、明胶酶试验和ONPG试验均阳性。能产生靛基质,霍乱红反应(即亚硝基

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