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1、专业实践能力一、病理解剖技术1. 病理尸体解剖的方法和步骤（ 1）病理尸体解剖的准备（ 2）体表检查（一） 体表检查 称体重，量体长，观察发育、营养状况，检查体表有无黄疸，发疳，出血点，疤痕，创口等，及其部位，大小；眼、耳、鼻、口腔等有无溃疡、分泌物或液体流出，外生殖器有病变，浅表淋巴结肿大否；有无尸冷、僵、腐败现象。（ 3）胸腹腔检查（二） 体腔检查 1， 胸、腹壁皮肤切开及剥离：根据情况，选择Y 形、 T 形或直线切口切开皮肤。切开腹膜时，先切一小孔，插入两指，再从两指之间剪开，以免划破内脏。剥离胸壁皮肤时，应注意将胸肌一并剥离，但勿损及肋间肌。2， 腹腔检查：检查腹腔内有无积液和积气，腹
2、膜情况，各器官的位置。与关系，有无粘连，肝脾肿大否，其边缘在锁骨中线肋缘下及剑突下几厘米，检查左右横膈的高度。（三） 胸腔检查 1、必要时在胸腔未切开前检查有无气胸。可有注射器吸水后，在第一肋间处自胸壁刺入，观察有无气体自水面下上升。2. 在肋骨软骨联接线内侧约 0.5cm 处，将第二肋骨到肋弓的软骨切断，紧沿胸骨后壁将横及纵隔割离，注意勿损及心包及大血管，然后检查胸腔有无积液，其量及性质，必要时涂片检查与细菌培养。3. 切断第一肋骨，分离胸锁关节，将胸骨及肋骨取下，观察各器官的位置，两肺表面情况，胸腺是否已经脂肪化。锯开胸骨，看骨髓造血情况。4. 自心尖部向上，作人形剪开心包，检查腔内液量，
3、心包膜内壁情况，必要时取心血作细菌培养。5. 疑有空气体栓塞时，将心包剪开一小口，用镊子拉紧切口两侧心包膜，心包腔内注满水，然后，在水上剪开右心房及肺动脉，观察有无气泡逸出，或者先结扎进出心脏的大血管，取出心脏，淹没于水下剪开右心，观察有无气泡逸出。（ 4）内脏器官的取出及检查（四） 各脏器的取出 各器官取出前，应仔细检查周围情况及与其他器官的关系，检查有困难时，一时不能明确者，可与其它器官一并取出，然后再仔细检查。检查各器官前，应称其重量，量大小。1. 心脏的取出与检查，在体内剖开右心，检查肺动脉有无栓塞后，将心脏提起，从根部或心包膜内壁分别剪断上、下腔静脉，（于距瓣膜2cm处）肺静脉和主动
4、脉（于距瓣膜5cm 处），取出心脏，（若有心、血管畸形，则应将心脏连同肺脏一并取出）。检查心脏增大否，外膜光滑度，有无渗出物等，心脏按血流方向剖开，测量各瓣膜的周径及左右心室的厚度。A ：右心剖开法：第一步，用刀或剪将右心从上、下静脉入口处直线剖开，如欲避免破坏窦房结，从下腔静脉向上，剖至房室间沟上1cm 处，向右心耳剪开，保持上腔静脉口完整，上腔静脉至少保留1cm。第二步，从此线中点沿心脏右缘剖至心尖部，检查三尖瓣，并用手指检查动脉有无血栓或狭窄。第三步，从心尖部沿心室中隔剖至肺动脉，检查肺动脉瓣。B ：左心剖开法：第一步，用刀或剪将左心房从左、右静脉入口之间作直线剖开，以手指检查二尖瓣是否
5、狭窄。第二步，从此线的左端沿心脏左缘剖开至心尖剖。第三步，从心尖部沿心室中隔，避开肺动脉剖开肺动脉剖开主动脉，检查二尖瓣与主动脉瓣。剖开有瓣膜病变的心脏时，应注意避免破坏有病变的瓣膜。心脏剖开后，检查心肌厚度、硬度、色泽、心内膜光滑度，瓣膜周围有无增厚，及赘生物，有无狭窄或关闭不全，检查冠状动脉开口情况。2. 肺脏的取出：可由肺根部将主支气管和血管切断取出，或与颈部器官一并取出。如两层胸膜间有粘连，需细心分离，勿损及肺，如粘连牢固，可连同胸膜壁层一并剥离，取出肺脏。取出后检查其表面情况。切开检查肺切面的改变，有无病灶、气肿、萎陷等，肺门淋巴结肿大否，切面情况。3. 颈部器官的取出： A，充分分
6、离颈部皮肤与软组织， 用长刀刺入割断舌下系带， 紧沿下颌骨内面向左、右尽量地将下颌与舌间的软组织分离。B，将舌拉下，自硬腭后缘割离软腭，注意应将两侧扁桃体完全取下。 C，将舌、咽、喉头、气管、食管、肺拉下于横膈上将食管、下腔静脉及主动脉切断，连同胸腔器官一并取出。4. 腹腔及盆腔器官的取出：一般先将脾脏摘出，继之取出小肠、肾上腺、肝、胆囊、胃、十二指肠、胰，最后取出肾及盆腔器官。 将脾脏提至腹腔前方，割断脾门部血管，取出脾脏。检查其大小，重量，硬度，表面色泽。切面有无外翻；有无糊状物刮下，脾门血管及脾小体、脾小梁的情况等。 小肠与大肠的取出前， 应检查肠系膜 淋巴结及血管，找出空肠的起端，切断
7、，自肠系膜附着处将肠割下，直至直肠处将其切断取出，肠的断端应钳紧或结扎，以免粪便污染腹腔。待其他器官检查完毕后再检查肠。先量其长度，在肠系膜附着处沿纵轴剪开肠腔，检查粘膜有无病变，腔内有无寄生虫等，必要时可保持肠与肠系膜的关系，并将其一并取出。 十二指肠在原位从前面剪开，用手挤压胆囊：看胆道通畅否。沿胃大弯剪开胃，检查粘膜病变，将胃及十二指肠从后壁分离，与胰脏一并取出，在检查胰脏前，注意观察脾静脉有何变化。检察胰脏重量，大小，硬度，作多横切面，检查切面情况。小心分离肾上腺周围组织，取出肾上腺，分离右侧肾上腺时，将肝向上方推，注意分离与皮肤上腺相连的肝组织，肾上腺取出后，作多人横切面，检察皮质与
8、髓质的特征，有无出血等。取出肝与胆囊前，应仔细检查胆管、门静脉、肝静脉，然后剪断肝门的胆管及血管，分离镰状韧带，将门静脉及肝背部部一段下腔静脉与肝一并取出。检查肝的大小，重量，硬度，色泽，注意检查肝静脉及腔静脉，切面外翻否，小叶结构清楚否及有无其它病变。分离肾周围脂肪结缔组织，将肾提出，凸面向上剖开，注意包膜剥离要难否，检查表面的性状，切面皮质及髓质纹理是否清楚，肾盂粘膜有无病变。然后连输尿管一起取出肾脏。盆腔内器官的取出：先分离腹膜及周围组织，再取盆腔器官，男性可将直肠、膀胱一并取出，结肠断端应结扎或缝合。（ 5）尸检后的修复尸检时应尽少破坏尸体的外形， 检查完毕后， 应吸去体腔内的血水，
9、凡不需保留的器官， 均应放回体腔内，并应以木屑或其它吸水物质填塞，逢合切口。缝合时要尽量注意整副尸体外形，将体表洗净擦干，包裹或穿着妥善后放入尸箱内。（ 6）微生物和寄生虫检查 采取细菌培养的方法1. 心血培养标本：1.1用无菌镊子提起右心耳，在下腔静脉入口处的上方进行烧灼消毒，（用一有柄铜片在酒精灯上烧红，烧灼器官表面，面积约2*2cm） .1.2用无菌吸管或注射器从消毒部位插入，顺下腔静脉入口推进，取血液2-3ml1.3在无菌操作下，将吸取之血液立即注入无菌的肉汤培养基，或有玻璃珠的培养瓶内，立即洗净吸管或注射器，以免凝固，若在右心取不到血液，可从下腔静脉吸取。1.4腔（胸腔、腹腔）内渗出
10、液，心包腔内积液，必要时作细菌培养，采取液体时应尽量避免污染。采取脑脊液培养时，于尸检前用无菌手术， 在第二及第三腰椎间隙作穿刺，取脑脊液 2-3ml, 置于无菌试管内送检。1.5肠内容物培养：在回肠末端及乙状结肠下端，或病变明显处的浆膜面经烧灼灭菌后剪开，用棉花拭子插入肠腔内，在粘膜面擦取粘液、渗出物粘膜，放入无菌试管或培养基内送检。1.6脏器细菌培养：脏器表面灼烧灭菌，切取不小于2*2*1.5cm 的组织块，装无菌容器内送检。1.7脑组织作病毒分离：用无菌手术取大脑皮质，中脑，海马，脑桥组织块，每块不小于2*2*1.5cm ，以冰瓶保藏迅速送检。路途遥远者，可将检材放入无菌甘油瓶内，在低温
11、下送检。（ 7）化学和毒物检查（ 8）尸检记录尸体检时所见由尸检室技术人员或指定工作人员，按剖检者口述填写临时记录单，必要时摄影记录，做为书写尸检记录的基础二、病理大标本制作技术1. 大体标本的收集、取材、固定和保存（ 1）收集 ( 尸体解剖和活体组织检查、其次是动物实验的模型收集标本)（ 2）取材（越新鲜越好，标本应仔细处理，尽可能的修掉多余的组织）（ 3）固定（甲醛气饱和于水的甲醛液，浓度40%；体积 10%，浓度 4%的甲醛固定， 10%福尔马林）（ 4）保存（含血多的标本用凯氏法；胆色素用柯氏法；虐色素、脂肪等标本用甲醛）4. 大体标本的装缸与封存法（封存在玻璃或有机玻璃标本缸）: 修
12、整标本、适当标本缸、标本支架、拴好的标本略加冲洗、封口（松香蜂蜡、502胶、玻璃胶封口法）三、组织的取材、固定方法和切片技术2. 组织固定（ 1）固定的方法单纯固定液（甲醛、重铬酸钾、苦味酸、升汞、醋酸、铬酸、饿酸、丙酮、三氯醋酸、乙醇）和混合固定液（ B-5 液淋巴组织、 Bouin 液结缔组织三色染色、 Carnoy 液染色体、 Muller 液媒染和硬化组织、 Orth 液胚胎神经脂肪、 PFG液肽类抗原、 PLP和 PLPD液糖类组织、 Rossman液糖原、 Zenker 液细胞核细胞质三色染色、 4%多聚甲醛免疫组化、甲醛钙液脂肪组织组织化学、乙醇甲醛皮下组织肥大细胞、乙醚乙醇细胞
13、涂片、中性缓冲甲醛液免疫组化、中性甲醛液常用）（ 2）固定后洗涤：一般冲洗24h小组织 210h（ 1用水配制的固定液固定的组织洗涤法、2用含乙醇固定液固定的组织洗涤法、3特殊固定液固定的组织洗涤法）3. 组织的脱水（ 1）脱水的方法：（ 2）注意事项乙醇（纯乙醇不宜过长否则组织过度硬化）丙酮（收缩比乙醇更严重）异丙醇、过氧己环、四氢呋喃、环己酮、松脂醇4. 组织的透明（ 1）透明的方法（ 2）注意事项二甲苯（易使组织变硬变脆）氯仿（易挥发和吸收水分）香柏油（透明时间长）松油醇、丁香油、冬青油 5. 组织的浸蜡及组织处理程序（ 1）浸蜡的方法（ 2）石蜡的应用（ 3）自动组织处理机的应用（ 4
14、）组织处理程序人工操作程序自动组织处理机程序6. 骨和含钙组织脱钙方法（ 1）脱钙的方法硝酸脱钙法： 10%硝酸水溶液、硝酸 10ml和 10%甲醛 90ml的混合液。盐酸脱钙法：盐酸 8.5ml ，甲酸 5ml ，氯化铝 7g，蒸馏水 100ml ；盐酸和甲酸各 20ml，蒸馏水 100ml。8. 石蜡切片法（ 1）切片前准备和黏附剂：固定后标本经脱水、透明、浸蜡和包埋后，制成蜡块。锋利的刀片；充足的经处理的载玻片和恒温烤箱，毛笔和铅笔。（ 2）切片制作方法：组织经石蜡包埋制成蜡块，用切片机制成切片的过程。（ 3）切片的注意事项：组织的固定和取材；组织的脱水、透明和浸蜡；切片；切片刀和切片机；特殊切片的制作。9. 冰冻切片方法（ 1）直接冰冻切片法：恒冷箱切片；半导体制冷冷冻切片法；甲醇制冷器；二氧化碳冷冻法。（ 2）冰冻切片粘片法：蛋白甘油粘片法； Lille 明胶粘片法；乙醇明胶粘片法四、苏木精 -伊红染色方法（ HE染色）1.HE染色的方法（ 1）人工操作程序（ 2）自动染色机程序（ 3）冰冻切片染色方法2.HE染色试剂的配制（ 1）苏木精染液配制Harris 苏木精的配制：苏木精1g；硫酸铝钾 15g；氧化汞 0.5g ；乙醇 10ml ，蒸馏水 200ml；先用蒸馏水加热溶解硫酸铝钾，用无水乙醇溶解苏木精再倒入已溶解的
