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1、选修3现代生物科技专题知识点总结 专题1 基因工程一、基因工程的基本工具1.“分子手术刀” （1）来源：主要是从 生物中分离纯化出来的。（2）功能：能够识别 DNA分子的某种 的核苷酸序列，并且使每一条链中 部位的两个核苷酸之间的 断开，因此具有 性。（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式： 和 。2.“分子缝合针” (1)两种DNA连接酶（EcoliDNA连接酶和T4-DNA连接酶）的比较：相同点：都缝合 键。区别：EcoliDNA连接酶来源于 ，只能将双链DNA片段互补的 之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合 ，但连接平末端的之间的效率较 。(2)与DNA
2、聚合酶作用的异同：DNA聚合酶只能将 加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接 的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶DNA聚合酶不同点连接的DNA 链 链模板 模板 模板连接的对象2个DNA片段单个脱氧核苷酸加到已存在的单链DNA片段上相同点作用实质形成 化学本质蛋白质3.“分子运输车” （1）运载体具备的条件： 。 。具有 ，供 。（2）最常用的运载体是 ，它是一种裸露的、结构简单的、独立于 ，并具有 的双链 。二、基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取1.目的基主要是指： ，也可以是一些具有 的因子。2.原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成。人工合成目的
3、基因的常用方法有 法和 法。3.PCR技术扩增目的基因（1）PCR的含义：是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。（2）目的：获取大量的目的基因（3）原理： （4）过程：第一步：加热至9095，DNA解链为 ；第二步：冷却到5560， 与两条单链DNA结合；第三步：加热至7075， 从引物起始进行 的合成。第二步：基因表达载体的构建1.目的：使目的基因在受体细胞中 ，并且可以 ，使目的基因能够 。2.组成： （1）启动子：是一段有特殊结构的 ，位于基因的 ，是 识别和结合的部位，能驱动基因 ，最终获得所需的 。（2）终止子：也是一段有特殊结构的 ，位于基因的 。（3）标记基因的作用：
4、是为了鉴定受体细胞中 ，从而将 筛选出来。常用的标记基因是 。第三步：将目的基因导入受体细胞_1. ：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。2.常用的转化方法：将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是 ，其次还有 和 等。将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是 。方法的受体细胞多是 。将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是 ，最常用的原核细胞是 ，其转化方法是：先用 处理细胞，使其成为 ，再将 溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。3.重组细胞导入受体细胞后，筛选含基因表达载体受体细胞的依据是 。第四步
5、：目的基因的检测和表达1.首先要检测转基因生物DNA上是否 ，方法是采用 技术。2.其次还要检测目的基因是否 ，方法是采用 技术。3.最后检测目的基因是否 ，方法是采用 技术。4.有时还需进行 的鉴定。如生物抗虫或抗病的鉴定等。专题2 细胞工程一、植物细胞工程 1.理论基础（原理）： 全能性表达的难易程度：受精卵生殖细胞干细胞体细胞；植物细胞 动物细胞2.植物组织培养技术（1）过程：离体的植物器官、组织或细胞 愈伤组织 试管苗 植物体（2）用途：微型繁殖、作物脱毒、制造人工种子、单倍体育种、细胞产物的工厂化生产。（3）地位：是培育 、 培育植物新品种的最后一道工序。3.植物体细胞杂交技术（1）
6、过程：（2）诱导融合的方法：物理法包括 等。化学法一般是用 （ ）作为诱导剂。（3）意义： 。二、动物细胞工程 1. 动物细胞培养（1）概念：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的 ，将它分散成 ，然后放在适宜的 中，让这些细胞 。（2）动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织） 剪碎 用 处理分散成 制成 转入培养瓶中进行 培养 贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续 培养。（3）细胞贴壁和接触抑制：悬液中分散的细胞很快就 上，称为 。细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面 时，细胞就会 ，这种现象称为 。（4）动物细胞培养需要满足以下条件
7、 ：培养液应进行 处理。通常还要在培养液中添加一定量的 ，以防培养过程中的污染。此外，应定期 ，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。 ：合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常需加入 等天然成分。 ：适宜温度：哺乳动物多是36.50.5；pH：7.27.4。 ：95% 5% 。O2是 所必需的，CO2的主要作用 。（5）动物细胞培养技术的应用：制备病毒疫苗、制备单克隆抗体、检测 、培养医学研究的各种细胞。2.动物体细胞核移植技术和克隆动物（1）哺乳动物核移植可以分为 核移植（比较容易）和 核移植（比较难）。（2）选用去核卵(母)细胞的原因：卵(母)细胞 ；卵(母)细胞
8、； 卵(母)细胞含有 。（3）体细胞核移植的大致过程是：（左图）核移植 胚胎移植3.动物细胞融合（1）动物细胞融合也称 ，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融合后形成的具有原来 细胞遗传信息的单核细胞，称为 。（2）动物细胞融合与植物原生质体融合原理基本相同，诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体融合方法类似，常用的诱导因素有 等。（3）动物细胞融合的意义：克服了 ，成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物生物新品种培育的重要手段。（4）动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较：比较项目原理方法诱导手段用法植物体细胞杂交细胞膜的流动性去除细胞壁后诱导原生质体融合离心、电刺激、振动，聚乙二醇等试剂诱导克服了远缘杂交的不亲和性，获得杂种植株动物细胞融合细胞膜的流动性使细胞分散后诱导细胞融合除应用植物细胞杂交手段外，再加灭活的病毒诱导制备单克隆抗体的技术之一4.单克隆抗体（1）抗体：一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。从血清中分离出的抗体产量 、纯度 、特异性 。（2）单克隆抗体的制备过程：注入小鼠细胞融合分
