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1、沈阳药科大学本科毕业论文 目录沈 阳 药 科 大 学本 科 毕 业 论 文论文题目： 骨疏丹方剂的大孔树脂纯化工艺研究起止时间： 2011年3月2日 6月24日姓名学号： 所在学院： 药学院年级班级： 2007级药学一班指导教师： 实习单位： 沈阳药科大学分析化学教研室29目 录摘 要1Abstracts2第一章 前 言31.1 骨疏丹处方简介及研究概况31.1.1 处方各味药材的介绍31.1.2 骨疏丹处方的药理学研究31.1.3 配伍机制研究41.1.4 促成骨细胞活性成分群研究41.1.5 提取工艺与质量控制方法41.2 中药的现代除杂技术51.2.1 大孔吸附树脂51.2.2 大孔吸附
2、树脂的类型51.2.3 大孔吸附树脂分离技术操作流程61.2.4 影响大孔吸附树脂技术的因素61.2.5 大孔吸附树脂的优缺点71.3 本文的立题依据及研究思路71.3.1 立题依据71.3.2 研究思路8第二章 实验部分92.1 实验材料92.1.1 仪器92.1.2 试剂92.1.3 药材102.2上柱药液的制备102.3 指标成分的含量测定102.3.1 总黄酮的含量测定102.3.1.1 对照品溶液的制备102.3.1.2 标准曲线的绘制102.3.1.3 样品的测定102.3.2总香豆素的含量测定102.3.2.1 对照品溶液的制备102.3.2.2 标准曲线的绘制112.3.2.3
3、 样品的测定112.3.3 HPLC同时测定5种活性成分112.3.3.1 5种活性成分的结构式112.3.3.2 色谱条件及系统适用性试验112.2.3.3 混合对照品溶液的制备122.2.3.4 供试品溶液的制备122.3.3.5 样品的测定132.4 浸膏的测定132.5 大孔吸附树脂的选择132.5.1 大孔树脂的静态吸附试验142.5.2 大孔树脂的静态解吸附试验142.5.3 试验结果142.6 D101型树脂吸附工艺研究152.6.1 吸附工艺正交设计152.6.2 吸附工艺正交试验结果152.6.3正交试验结果分析162.6.4 验证试验172.7 D101型树脂洗脱工艺研究1
4、82.7.1 洗脱工艺正交设计182.7.2 洗脱工艺正交试验结果192.7.3 洗脱工艺正交试验结果分析192.7.4 验证试验212.8 大孔吸附树脂的重复使用次数23第三章 讨论243.1 讨论243.1.1 正交试验指标成分的确定243.1.2 上样溶液温度243.1.3 上样浓度的选择243.1.4 预吸附时间的确定243.1.5 吸附正交试验中上样体积因素下水平的选择及确定243.1.6 洗脱正交试验中洗脱体积因素下水平的选择253.1.7 洗脱流速的确定25第四章 结论26参考文献27致 谢28沈阳药科大学本科毕业论文 摘要摘 要本文建立了骨疏丹提取物的大孔吸附树脂纯化工艺，通过
5、静态和动态试验以总黄酮、总香豆素保留率及纯度为指标，对影响大孔树脂富集纯化因素进行优化，最后通过HPLC法测定的5个活性成分含量之和的保留率将最优条件加以验证。结果表明：D101型大孔吸附树脂对骨疏丹中总黄酮、总香豆素的吸附、解吸能力较强。骨疏丹提取物的上样浓度为0.250gml-1(生药浓度)，室温上样，上样体积为2.5BV，吸附速度为2BVh-1，上样后立即洗脱，水洗体积为7BV，弃去水洗液后，用5BV80%乙醇洗脱，收集醇洗脱液，结果总黄酮、总香豆素纯度之和提高2.99倍，树脂可重复使用15次以上需再生。此纯化工艺稳定可靠，为工业上大规模纯化骨疏丹提取物提供了科学依据。关键词：骨疏丹，大
6、孔吸附树脂，纯化沈阳药科大学本科毕业论文 英文摘要AbstractsThe purification progress for Gushudan extracts was established with macroporous adsorption resin.The static and dynamic adsorption tests were employed to investigate effects of separation and purification for the total flavonoisd and coumarins from Gushudan extract
7、s with the recovery rate of the total flavonoids and coumarins,degree of purity as index. At last, the recovery rate of five active compound was verify by HPLC. The result showed that D101 type resin had better adsorption and desorption properties to total flavonoids and coumarins of Gushudan extrac
8、ts.And the optimal purifying condition was as follows: the Gushudan extracts solution of 2.5times volumes of the resin(0.250mgml-1of the Crude drug oncentration)was loaded with a speed of 2 times volume of the resinh-1in room temperate, and the diamter-height ratio of the resin is 1:3, the impurity
9、was washed away with 7 times volume of the resin wates.And then,the total flavonoids and coumarins were eluated with 80% ethanol. And the eluant volume was 5times of the resin. The eluting rate was 5 times volume of the resinh-1. The results showed that the degree of purity total flavonoisd and coum
10、arins is higher by 2.99 times, and the resin is reuseable for 15 times.The optimized process was stable and feasible. For industry purification Gushudan extract offer scientific basis.Keyword: Gushudan, macroporous adsorption resin, purificati沈阳药科大学本科毕业论文 前言第一章 前 言1.1 骨疏丹处方简介及研究概况骨疏丹处方是根据骨质疏松症的发病机理，
11、以中医药理论和多年临床实践为基础，利用其“中药小复方精选系统操作技术平台1”和“普济方数据库管理系统”精心拟定而成，由淫羊藿、骨碎补、蛇床子、丹参四味中药组成。具有补益肝肾，强壮筋骨，活血止痛的功效。用于肝肾不足证原发性骨质疏松症。我实验室前期已对其进行深入的研究。1.1.1 处方各味药材的介绍淫羊藿为小檗科植物淫羊藿(Epimedium brevicornu Maxim.)、箭叶淫羊藿(Epimedium sagittatum(Sieb.et Zucc.) Maxim.)、柔毛淫羊藿(Epimedium pubescens Maxim.)、或朝鲜淫羊藿(Epimedium koreanum
12、Nakai)的干燥叶，夏、秋季茎叶茂盛时采集，晒干或阴干。味辛甘、性温，归肝肾经。有补肾阳、强筋骨之效，用于治疗筋骨痿软、麻木拘挛2。淫羊藿中主要含黄酮类化合物，包括淫羊藿苷、朝藿定B、朝藿定C等3。骨碎补为水龙骨科植物槲蕨Drynaria fortunei (Kunze) J. Sm.的干燥根茎，呈扁平长条状，多弯曲，有分枝，表面覆盖深棕色的小鳞片，柔软如毛，经火燎着呈棕褐色或暗褐色。味苦性温，入肝肾经，可疗伤止痛，补肾强骨，外用消风祛斑4。骨碎补中含有柚皮苷、木犀草素-7-O-D-葡萄糖醛酸苷、咖啡酸-4-O-D-吡喃葡萄糖苷、4-O-D-吡喃葡萄糖基香豆酸、对羟基反式肉桂酸、反式桂皮酸、
13、3,4-二羟基苯甲酸、5-羟甲基糠醛、蔗糖等5。蛇床子为伞形科植物蛇床Cnidium monnieri (L.)Cuss.的干燥成熟果实，夏秋二季果实成熟时采集，除去杂质，晒干。果实为双悬果细小，呈椭圆形。其有温肾壮阳，燥湿，祛风，杀虫止痒之效6。蛇床子含有多种化学成分，主要含香豆素类化合物，此外还有色原酮类，苯并呋喃类，糖类，以及萜醇类等多种化合物7。丹参为唇形科植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge.的干燥根及根茎，春秋二季采挖，除去泥沙干燥，其有祛瘀止痛，活血通经，清心除烦的功能8。8药典?（70-71）。丹参的化学成分分为脂溶性和水溶性两类。脂溶性成分主要包含丹参酮I、
14、丹参酮a、丹参酮b、隐丹参酮等，水溶性成分主要为酚酸类物质，其中包含：丹参素、丹参酸乙、丹参酸丙、丹参酚酸A、丹酚酸B、咖啡酸、迷迭香酸9。1.1.2 骨疏丹处方的药理学研究10选用双侧去卵巢所致的雌性大鼠骨质疏松模型，考察了骨疏丹方剂醇提物的抗骨质疏松药效和在动物体内的促骨形成作用。结果表明，给予骨疏丹提取物后，高、中剂量给药组大鼠的骨密度明显增加，碱性磷酸酶活性明显降低，血清骨钙素、雌二醇水平有显著性的提高，提示骨疏丹方剂可有效抑制过高的骨转换率，促进骨形成而发挥抗骨质疏松作用；给药高剂量组的骨钙、骨磷含量与模型组相比均显著增加，骨干重、去脂干重及灰重有显著增加的趋势。中、高剂量给药组的骨强度均显著高于模型组，提示骨疏丹方剂可促进骨矿物质在骨的沉积，提高大鼠骨矿量和骨密度。骨质疏松症临床以疼痛为主，采用醋酸扭体法考察了骨疏丹方剂的镇痛作用。研究表
