中药药理学实验

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1、实验 1 附子炮制前后致小白鼠中毒表现的影响(6学时)【目的】观察生附子和制附子致小白鼠的死亡数量,评价炮制对附子毒性的作用。【器材】1ml注射器、鼠笼、天平。【药品】生附子水煎醇沉液(上清液) 0.5g/ml 、制附子水煎醇沉液(上清液)0.5g/ml。【动物】小鼠,雌雄各半,体重1822 go【方法】小鼠20只,雌雄各半,随机分为2组。按0.2ml/10g腹腔注射给药,第 1组给予生附子水煎醇沉液,第2组给予制附子水煎醇沉液。观察并记录30min 内各组小鼠死亡情况。【结果】记录生附子水煎醇沉液组与制附子水煎醇沉液组动物死亡数,比较两者毒性的大小。【注意事项】生附子和制附子水煎液制备时均应

2、煎煮 4 小时以上。【思考题】根据实验结果讨论炮制前后附子毒性作用差异的原因。实验 2 生大黄、制大黄以及大黄、芒硝配伍对小白鼠小肠运动的影响(炭末法)(4 学时)目的了解生大黄、制大黄对肠蠕动的影响以及大黄与芒硝配伍的药理意义。 原理 利用黑色炭末作为指示剂,观察炭末在肠道的推进距离。口服生大黄可 刺激肠蠕动加速,有泻下作用,故对胃肠实热有“釜底抽薪”之功。大黄久煎或炮 制之后,致泻成份分解,作用减弱,而芒硝在肠内不易被吸收,使肠内渗透压升 高,大量水分保留在肠腔,机械性刺激肠壁而致泻。故生大黄与芒硝配伍有“增 水行舟,润燥软坚”之功效,致泻作用增强。器材 手术剪、眼科镊、直尺、注射器、灌胃

3、针头、天平,烧杯,搪瓷盘或蛙 板。药品炭末生理盐水混悬液O.lg/m (炭末为活性炭),生大黄水煎液lg/m 1(含炭 末O.lg/ml),制大黄水煎液lg/ml(含炭末O.lg/m 1,生大黄水煎液加芒硝(生大 黄lg/m1+芒硝0.5g/m1+炭末O.lg/ml),苦味酸。动物 小白鼠。方法取禁食2024h成年、体重相近的l2只小白鼠,随机分为4组,每组3 只,用苦味酸标记。分别用上述4种炭末液0.3m1/l0g体重灌胃。给药30min后 脱颈椎处死,打开腹腔分离肠系膜,剪取上端至幽门,下端至回盲部的肠管,置 于托盘上。轻轻将小肠拉成直线,测量肠管长度作为“小肠总长度”。从幽门至炭 末前沿

4、的距离作为“炭末在肠内推进距离”。取各组3只小自鼠平均值,用公式汁 算炭末推进百分率,并注意观察各组小肠容积是否增大。炭末在肠内推进距离( cm)炭末推进率二 xlOO%小肠全长( cm)结果按结果记录分析并填表。生大黄、制大黄及大黄加芒硝对小白鼠肠蠕动的影响组别 动物数 剂 量 小肠总长度 炭末推 进 炭末推进 l 肠容积变(只)(g/kg)(cm)距离(cm)率() 化生理盐水生大黄制大黄生大黄加芒硝注意( 1)开始给药至处死动物的时间必须准确,以免时间不同造成实验误差。 ( 2 )实验动物体重越接近越好,平均体重最好用 2325g 小鼠,肠管比较粗大, 易于操作。( 3)肠容积变化可以上

5、下端接扎,称取重量,以定量化。附(1)生大黄制剂的制备:取生大黄100g,砸成小块后,以水浸没。冷浸 24h后.过滤,40C水浴浓缩至1g/ml。(2)制大黄制剂的制备:取制大黄l00g,加水煎沸1.5h以上,过滤,药液水浴 浓缩至 1g/ml。思考题 (1)大黄致泻的主要成分及作用机理是什么?(2)大黄加芒硝为何 致泻作用增强?有哪些主要方剂有大黄与芒硝配伍使用?实验 3 天麻对小白鼠的镇静作用(活动计数法)(2学时)【目的】通过天麻注射液对小鼠自发活动的影响,了解其镇静作用。【原理】天麻可使小鼠自发活动明显减少,从而认为平肝息风药功效的发挥似与 它们的镇静作用有关。【器材】注射器、天平。【

6、药品】天麻注射液0.12g/ml、生理盐水、苦味酸溶液。【动物】小白鼠。【方法】取活动度近似的小鼠,按体重随机分为2 组,用苦味酸标记。分别腹腔 注射天麻注射液0.2ml/10g及等容量生理盐水。给药30min后将各组小鼠分别放 人自主活动箱中,连续观察到 20min 比较给药组与对照组小鼠活动数,用公式计 算各给药组小鼠20min累计自发活动抑制率:对照组小鼠自发活动数给药组小鼠自发活动数自发活动抑制率=X100 %对照组小鼠自发活动数【结果】实验结果按表记录。天麻对小白鼠的镇静作用(活动计数法)组别给药途径剂量 给药后20min活动数自发活动抑制率( g/kg)(%)生理盐水组天麻注射液组

7、【注意事项】(1)在测小鼠自发活动时注意保持实验环境的安静及实验条件的一 致,否则对实验结果的影响很大。(2)第一只小鼠测完自发活动后,把自发活动 箱檫拭干净、尽量去除气味后再放入第二只小鼠,以减少小鼠之间的相互干扰。实验 4 人参、灵芝对小白鼠游泳时间的影响(4学时)目的 观察人参、灵芝对小鼠游泳时间的影响,掌握抗疲劳作用药物的常用筛选 方法。原理 人参、灵芝能促进人体对糖原和三磷酸腺苷等能量物质的合理利用,并使 剧烈运动时产生的乳酸转化为丙酮酸进入三羧酸循环,为机体提供更多的能量, 减轻体力运动时的疲劳。本实验以小鼠游泳时间为指标观察人参、灵芝的抗疲劳 作用。器材天平、50cmx30cmx

8、25cm的玻璃缸(或塑料盆)、负重物、温度计、小鼠灌 胃器、秒表。药品人参、灵芝水煎液2.5g/ml、生理盐水、苦味酸液。动物小鼠,体重1822g。方法玻璃缸内加水,水深20cm,水温保持在200.5C。取4只小鼠,雌雄不限, 称重,用苦味酸标记,随机分为两组。给药组每只灌胃人参、灵芝水煎液0.25ml/10g, 对照组每只灌胃等容量的生理盐水,给药后30min在尾部束一 2g的重物(可不用), 并分别放入玻璃缸内游泳,立即计时并注意观察,当小鼠头部沉入水中 10s 不能 浮出水面者即为体力耗竭,停止计时,记录小鼠游泳时间。与对照组比较并进行 统计学处理。综合全实验室的结果,分别算出两组的平均游泳时间结果 按表记录人参、灵芝对小鼠游泳时间的影响组别动物数(n)剂量( ml/10g)游泳时间( min)生理盐水人参水煎液灵芝水煎液注意(1,小鼠应该单只游泳,如果两只以上同时游泳,会影响实验结果。(2, 水温过高或小鼠负重物较轻均可使小鼠游泳时间明显延长。思考题影响小鼠游泳时间的因素有哪些?

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