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1、实验室生物安全标准操作规程HYEY-PGC-2016（第三版） 2016年1月11日发布 2016年1月20日实施怀远县第二人民医院实验室生物安全标准操作规程（SOP）HYEY-PGC-2016修 订 表第 1 页 共 1 页第3版 第 0 次 修订2016年 1月 11日发布/1月20日实施修 订 表版 号规程号修订次序修 订 内 容批 准日 期实验室生物安全标准操作规程（SOP）HYEY-PGC-2016目 录第 1 页 共 1 页第3 版 第 0 次 修订2016年 1月 11日发布/1月20日实施目 录HYEY-PGC01-2016实验室人员进出实验室HYEY-PGC02-2016实验
2、室检测样品采集HYEY-PGC03-2016实验室检测样品包装和运送HYEY-PGC04-2016实验室检测样品接收HYEY-PGC05-2016样品检测操作规程HYEY-PGC06-2016电气设备操作规程HYEY-PGC07-2016实验室消毒剂配制标准操作规程HYEY-PGC08-2016无菌间使用标准操作规程HYEY-PGC09-2016实验室废弃物处理标准操作规程HYEY-PGC10-2016实验室消毒标准操作程序HYEY-PGC11-2016实验室意外事故处理实验室生物安全标准操作规程（SOP）HYEY-PGC01-2016检验科实验室人员进出实验室第 1 页 共 1 页第3版 第
3、 0 次 修订201年 1月 11日发布/1月20日实施1 目的制定检验科实验室人员进出的标准操作程序，保障实验室生物安全。2 适用范围适用于检验科实验室人员进出程序。3 职责实验室工作人员执行本程序的规定。实验室负责人负责监督执行。4 规程要求4.1进入程序实验室人员需将外衣挂入（避免将外衣与工作服混放），穿上工作服，按要求戴手套、口罩等防护用品方可进入实验室。4.2 退出程序工作结束后，实验室人员在实验室将一次性口罩、手套、鞋套等放入指定容器。先用0.5%新洁尔灭对手进行消毒，再用消毒肥皂洗手。在指定区域脱下工作服，必要时进行紫外消毒。实验室人员退出实验室后，必须将实验室入口门关好，方可离
4、开实验室。实验室生物安全标准操作规程（SOP）HYEY-PGC02-2016实验室检测样品采集第 1 页 共 4 页第3版 第 0 次 修订2016年 1月 11日发布/1月20日实施1 目的为保障检测实验的顺利进行，规范采样程序，防止病原微生物在实验室采样过程中产生污染。2 适用范围适用于实验室内采集、处理动物样品。3 职责3.1 采集检测样品的工作人员在采集过程中应当防止病原扩散，并对样本的来源、采集过程和处理方法等作详细记录。3.2 检验人员必须严格按照本操作规程操作，不可擅自做出超出本规程的操作，所有实验人员对所从事的工作负相应的责任。4 过程要求4.1 工作条件4.1.1 具有采集、
5、处理样品所需要的生物安全防护设备；4.1.2 具有掌握相关专业知识和操作技能的工作人员；4.1.3 具有有效的防止病原扩散的措施；4.1.4 具有保证检测样品质量的技术方法和手段。4.2实验材料准备灭菌的解剖器械（剪刀、镊子、手术刀、大刀、斧头等）、灭菌试管、平皿或自封袋、载玻片、棉签、营养肉汤、30%、50%甘油盐水缓冲液、加抗生素的PBS（病毒保存液）、50甘油磷酸盐缓冲液、酒精灯、灭菌注射器、15mL的离心管、1.5mLEP管、记号笔、签字笔、防护服、无粉乳胶手套、防护口罩、铅笔、空白标签纸、胶布、75%酒精棉球、碘酒棉球、冰袋、冷藏容器、消毒药品、采样单等。4.3 活畜样品的采集4.3
6、.1 血清样品的采集实验室生物安全标准操作规程（SOP）HYEY-PGC03-2016实验室检测样品采集第 2 页 共 4 页第3版 第 0 次 修订2016年 1月 11日发布/1月20日实施4.3.1.1 采血方法对采血部位的皮肤先剃（拔）毛，碘酊消毒， 75%的酒精消毒，待干燥后采血。采血方法推行生猪站立式前腔静脉、牛羊站立式颈静脉、禽类翅静脉采血，采血过程严格无菌。4.3.1.2 采血数量单一病种抗体监测的每头（只）采集23mL全血，多病种抗体检测的每头（只）采集510mL全血。4.3.1.3 全血保存采集好的全血转入盛血试管，斜面存放，室温凝固后直接放在盛有冰块的保温箱，送实验室。从
7、全血采出到血清分出的时间不超过10h。4.3.1.4 血清分离 凝固全血在室温24h后，有血清析出时，用无菌针剥离血凝块，然后放入4冰箱48h后，待大量血清析出时，吸出血清。必要时经离心机3000rpm 、30min离心，吸出血清。分离的血清，一般不加防腐剂。血清若在12周内即可检验，可放在4冰箱内保存；如果保存时间较长，应放在-20-80冰箱内保存。运送血清时可将血清放在盛有冰块的保温箱中运送。4.3.2 全血样品的采集 全血采集后应直接注入盛有抗凝剂的试管中，立即摇动，充分混合。也可将全血液注入盛有玻璃珠的灭菌瓶中，立即连续振荡脱纤维蛋白。4.4 活禽样品的采集咽喉拭子的采集：将棉签插入喉
8、头口及上颚裂处来回刮35次取咽喉分泌液，泄殖腔拭子的采集：将棉签插入取泄殖腔转23圈并沾取少量粪便，再将咽喉拭子、泄殖腔拭子一并放入盛有0.81.0mL加有抗生素PBS的EP管中，加盖，编号。4.5 病死（屠宰）畜禽样品的采集4.5.1 解剖前检查实验室生物安全标准操作规程（SOP）HYEY-PGC03-2016实验室检测样品采集第 3 页 共 4 页第3版 第 0 次 修订2016年 1月 11日发布/1月20日实施急性死亡的牛、羊、猪、马等动物，解剖之前应作临床检查，疑似炭疽病的应采血、镜检，排除炭疽病时，方可解剖。动物死亡后应在6h内进行剖检。解剖人员要做好自我防护工作。4.5.2 肝、
9、脾、肾、淋巴结、肺和牛、马心脏样品的采集 在肝、脾、肾、淋巴结、肺和牛、马心脏有病变的部位各采取23cm3的小方块，分别置于灭菌的试管或平皿中。其他畜禽采集整个心脏，置于自封袋中。细菌分离样品的采集可用烧红的刀片烫烙脏器表面，在烧烙部位刺一孔，用灭菌后的铂金耳伸入孔内，取少量组织或液体，作涂片镜检或划线接种于适宜的培养基上。4.5.3 脑、脊髓样品的采集取脑、脊髓23cm3浸入50%甘油盐水中或将整个头部（猪、牛、马除外）割下，用消毒纱布包裹，置于不漏水的容器中。4.5.4 肠、肠内容物及粪便样品的采集肠样品的采集：选择病变最严重的部分，将其中的内容物弃去，用灭菌的生理盐水轻轻冲洗后，置于试管
10、中。肠内容物样品的采集：烧烙肠壁表面，用吸管扎穿肠壁，从肠腔内吸取肠内容物，放入盛有30%甘油盐水中或者直接将带有粪便的肠管两端结扎，从两端剪断。粪便样品的采集：用棉签插到直肠黏膜表面采集粪便，然后将拭子放入盛有30%甘油盐水中。4.5.5液体病料样品的采集采集胆汁、脓、粘液、关节液、水泡液等样品时，用药物或烫烙法消毒采样部位，用灭菌吸管（毛细吸管、注射器）经消毒部位插入，吸取内部液体，然后将病料注入灭菌试管中，加盖。也可用接种环经消毒部位插入，提取病料直接接种在培养基上。4.5.6 胎儿样品的采集取流产后的整个胎儿，装入自封袋或不透水塑料薄膜中。4.5.7 皮肤样品的采集 用清水清洗病变皮肤
11、后，取病变皮肤35g放入灭菌小瓶中，加适量50甘油磷实验室生物安全标准操作规程（SOP）HYEY-PGC03-2016实验室检测样品采集第 4 页 共 4 页第3版 第 0 次 修订2016年 1月 11日发布/1月20日实施酸盐缓冲液(pH7.4)，加盖密封。4.5.8 死（屠宰）禽样品的采集死（屠宰）禽样品的采集除按上述方法采集，也可将整个死禽装入不透水塑料薄膜袋或自封袋中或其他容器内。4.6 组织样品采集完后的无害化处理活畜禽、病死畜禽组织样品采集完后，应做好样品外包装和环境消毒以及病死畜禽及其产品的无害化处理。4.7 样品编号、抽样单填写4.7.1 样品编号每头动物的不同部位的组织样品
12、应单独包装。包装好后，在样品袋或平皿外贴上标签，标签注明样品名、样品编号、采样日期等。采集好不同部位的样品后，同一动物的样品集中包装。4.7.2 采样单填写可根据具体要求填写。实验室生物安全标准操作规程（SOP）HYEY-PGC03-2016实验室检测样品包装和运送第 1 页 共 2 页第3版 第 0 次 修订2016年 1月 11日发布/1月20日实施1 目的维护检测样品的质量，防止病原的泄漏和扩散，保障样品检测的顺利开展。2 适用范围适用于检测样品的包装和运送。3 职责3.1 操作者必须严格按照本程序操作，不可擅自做出超出本程序的操作，所有实验人员对所从事的工作负相应的责任。3.2实验室负
13、责人负有对样品包装、运输的监督和管理职责，并监督检查相关工作人员的安全工作程序和行为。4 过程要求拟运输的样品，要求严密包装，外表加以消毒，编号、登记后，贴上“生物危险”标识，并严防标识脱落。样品必须经三层包装。4.1 样品的包装4.1.1 内包装4.1.1.1 必须是不透水、防泄漏的主容器，保证完全密封。4.1.1.2 必须是结实、不透水和防泄漏的辅助包装。4.1.1.3 必须在主容器和辅助包装之间填充吸附材料。吸附材料必须充足，能够吸收所有的内装物。多个主容器装入一个辅助包装时，必须将它们分别包装。4.1.1.4 主容器的表面贴上标签，注明样品类别、编号、名称、数量等信息。4.1.1.5 相关文件，例如毒种或样本数量表格、危险性声明、信件、毒种或样本鉴定资料、发送者和接收者的信息等应当放入一个防水袋中，并贴在辅助包装的外面。4.1.2 外包装4.1.2.1 外包装的强度应当充分满足对于其容器、重量及预期使用方式的要求。4.1.2.2 外包装应当印上生物危险标识。实验室生物安全标准操作规程（SO
