《抑菌圈直径和MIC解释标准》由会员分享，可在线阅读，更多相关《抑菌圈直径和MIC解释标准（14页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、缩写： ATCC，美国模式菌种保藏所；CAMHB，调节过阳离子的Mueller-Hinton肉汤；FDA，美国食品和药品管理局；MHA， Mueller-Hinton琼脂；MIC，最低抑菌浓度；MRS，耐甲氧西林葡萄球菌；MRSA，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌；MOD-SA，修饰的金黄色葡萄球菌；PBP，青霉素结合蛋白；PCR，聚合酶链反应；QC，质量控制；VRSA，耐万古霉素金黄色葡萄球菌；vanA，万古霉素耐药基因。BHI，脑心浸液；AST，抗菌药物敏感性试验； ATCC，美国模式菌种保藏所；BSC，生物安全柜； BSL-2，二级生物安全水平；BSL-3，三级生物安全水平；CAMHB，调节过阳
2、离子的 MuellerHinton肉汤；CDC，疾病预防控制中心；CFU，菌落形成单位；LHB，溶解马血； MHA， Mueller-Hinton琼脂； MIC，最低抑菌浓度；QC，质量控制。抑菌圈直径和MIC解释标准铜绿假单胞菌抑菌圈直径和MIC解释标准试验条件培养基: 纸片扩散法：MHA肉汤稀释法：CAMHB琼脂稀释法： MHA接种物: 生长法或直接菌落悬液法，相当于 0.5麦氏标准孵育: 35 2 C；空气环境纸片扩散法：16 -18 h稀释法：16 - 20 h (1)对于纸片扩散法，直径150mm平板最大放置12只，直径100mm平板放置5只进行试验(见M02第9.2节)。测量抑菌圈
3、直径（用肉眼判读），包括纸片直径。保持平板在反射光照明的、非反射黑的背景上方几英寸，肉眼观察无明显生长的地区作为抑菌圈边缘。在抑菌圈边缘借助放大镜才能观察到的微小菌落生长可忽略不计。(2)用纸片扩散法和稀释法能可靠地测定分离于囊性纤维化病人的铜绿假单胞菌的敏感性，但在作为敏感结果报告前，应将孵育时间延长至24小时。(3)所有抗菌药物在延长治疗期间可致铜绿假单胞菌发生耐药。因此，初次分离的敏感菌株在开始治疗后34不动杆菌属抑菌圈直径和MIC解释标准试验条件培养基：纸片扩散法： MHA肉汤稀释法： CAMHB琼脂稀释法： MHA接种物：生长法或直接菌落悬液法，相当于0.5麦氏标准孵 育： 352C
4、；空气环境；20-24h，所有方法由于培养基中可能存在拮抗剂，甲氧苄啶和磺胺类药物抑菌圈内可允许出现菌株轻微生长；因此，在测量抑菌圈直径时可忽视轻微生长（20%或较少的菌苔）而测量较明显抑制的边缘。（2）对四环素敏感的菌株被认为对多西环素和米诺环素也敏感。然而，某些对四环素中介或耐药的菌株可以对多西环素或米诺环素或二者敏感。洋葱伯克霍尔德菌抑菌圈直径和MIC解释标准试验条件培养基：纸片扩散法： MHA肉汤稀释法：CAMHB琼脂稀释法： MHA接种物：生长法或直接菌落悬液法，相当于0.5麦氏标准孵 育： 352C；空气环境；所有方法，20-24h嗜麦芽窄食单胞菌抑菌圈直径和MIC解释标准试验条件
5、培养基：纸片扩散法： MHA肉汤稀释法： CAMHB琼脂稀释法： MHA接种物：生长法或直接菌落悬液法，相当于0.5麦氏标准孵 育： 352C；空气环境，所有方法，20-24 h由于培养基中可能存在拮抗剂，甲氧苄啶和磺胺类药物抑菌圈内可允许出现菌株轻微生长；因此，在测量抑菌圈直径时可忽视轻微生长（20%或较少的菌苔）而测量较明显抑制的边缘。氯霉素：分离于泌尿道菌株不常规报告。其他非- 肠杆菌科细菌MIC解释标准(mg/mL)葡萄球菌属抑菌圈直径和MIC解释标准试验条件培养基：纸片扩散法：MHA肉汤稀释法：CAMHB； CAMHB+2% NaCl用于苯唑西林、甲氧西林和奈夫西林； CAMHB补充
6、 50 g/mL钙用于达托霉素琼脂稀释法：MHA； MHA+2% NaCl用于苯唑西林、甲氧西林和奈夫西林；琼脂稀释测试达托霉素还未被批准接种物：直接菌落悬液法，相当于 0.5麦氏标准孵 育： 352C；空气环境纸片扩散法：16-18 h； 24 h (凝固酶阴性葡萄球菌与头孢西丁)稀释法： 16-20 h所有方法：苯唑西林、甲氧西林、奈夫西林和万古霉素需24h试验温度超过35C可能检测不出MRS(1)对于纸片扩散法，直径150mm平板最大放置12只纸片，直径100mm平板放置5只进行试验(见M02第9.2节)。测量抑菌环直径(用肉眼判读)，包括纸片直径。保持平板在反射光照明的、非反射黑的背景
7、上方几英寸，除外利奈唑胺、苯唑西林、万古霉素应用透射光阅读（平板正对光源）。肉眼观察无明显生长的地区作为抑菌圈边缘。在抑菌圈边缘借助放大镜才能观察到的微小菌落生长可忽略不计。由于培养基中可能存在拮抗剂，甲氧苄啶和磺胺类药物抑菌环内可允许出现菌株轻微生长；因此，在测量抑菌环直径时可忽视轻微生长（20%或较少的菌苔）而测量较明显抑制的边缘。在抑菌环内任何可辨别的菌落生长提示苯唑西林、利奈唑胺或万古霉素耐药。(2)过去，将对青霉素酶稳定的青霉素类(见术语表 I)耐药称为“ 耐甲氧西林” 或“ 耐苯唑西林” ， MRSAs是指表达mecA或具有另一种甲氧西林耐药机制，如青霉素结合蛋白与苯唑西林的亲和力
8、改变 (修饰的金黄色葡萄球菌MOD-SA菌株)的金黄色葡萄球菌。(3)对于耐苯唑西林金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌 (MRS)， 被认为对其它b- 内酰胺类药物，即，青霉素类、b- 内酰胺/b- 内酰胺酶抑制剂复合物，头孢类(新的“ 具有抗-MRSA活性的头孢菌素” 例外)和碳青霉烯类等是耐药。这是因为大多数文献报道了MRS(4)在大部分葡萄球菌中，苯唑西林耐药是由mecA基因介导，此基因编码青霉素结合蛋白2a (PBP 2a,也称为PBP2)。测试分离菌株mecA或PBP 2a阳性应报告苯唑西林耐药。通过苯唑西林MIC、头孢西丁MIC或头孢西丁纸片法测试分离菌株为耐药，应报告苯唑西林耐药
9、。非mecA介导的耐药机制较罕见，包括新的mecA同系物mecC 1 。具有mecC菌株的头孢西丁和/或苯唑西林MICs典型地落在耐药范围；通过直接检测mecA或PBP 2a不能检测出mecC介导的药。(5)由于对常规用于治疗急性、无并发症的泌尿道感染的抗菌药物(如，呋喃妥因、甲氧苄啶磺胺甲恶唑或一种氟喹诺酮)在尿液中可达到浓度的治疗反应是敏感的，因此，不建议对尿液中分离的腐生葡萄球菌进行常规试验。(6)对于某些细菌/抗菌药物组合，尚不存在或罕见耐药菌株，因此，除了“ 敏感” 以外没有标明任何其他药敏类型。如果菌株的结果提示“ 非敏感” ，应确证菌株鉴定和抗菌药物敏感性试验结果。 (见附录 A
10、)。(7)- 内酰胺酶、苯唑西林耐药性、使用头孢西丁检测mecA-介导的苯唑西林耐药性、万古霉素敏感性减低、诱导型克林霉素耐药和高水平莫匹罗星耐药(仅金黄色葡萄球菌)等筛选试验，金黄色葡萄球菌查阅表2C补充表1和2，凝固酶阴性葡萄球菌查阅表2C补充表3。另外，使用头孢西丁预报mecA介导的苯唑西林耐药性的进一步解释参见M07-A9第12青霉素酶不稳定青霉素类(8)青霉素敏感葡萄球菌也对葡萄球菌感染有临床疗效的其他- 内酰胺类药物敏感。青霉素耐药葡萄球菌对青霉素酶不稳定青霉素耐药，包括氨苄西林、阿莫西林、阿洛西林、羧苄西林、美洛西林、哌拉西林和替卡西林。(9)青霉素可被用于测试葡萄球菌对所有青霉
11、素酶不稳定青霉素类的敏感性。青霉素耐药葡萄球菌产生b- 内酰胺酶。当青霉素对葡萄球菌分离株MICs 0.12 g/mL或抑菌圈直径 29 mm，在报告青霉素结果为敏感前，应对葡萄球菌执行- 内酰胺酶试验。罕见葡萄球菌含b- 内酰胺酶基因而b- 内酰胺酶试验结果为阴性。因此，对需青霉素治疗的严重感染，从相同患者随后分离的所有菌株，实验室应测定青霉素MIC和执行诱导- 内酰胺酶试验。也可考虑用PCR测试分离菌株bla Zb- 内酰胺酶基因。见表2C后的表2C补充表1和 3(10)苯唑西林耐药葡萄球菌应报告对青霉素耐药或不报告。青霉素酶稳定青霉素类(11)苯唑西林(或头孢西丁)结果可应用于其他青霉素
12、酶稳定青霉素类 (邻氯西林、双氯西林、氟氯西林、甲氧西林和萘夫西林)。 具有确切临床疗效的抗菌药物，考虑感染部位和适当的剂量，苯唑西林 (头孢西丁)敏感葡萄球菌可考虑对下列抗菌药物也敏感：b- 内酰胺/b- 内酰胺酶抑制剂复合物 (阿莫西林- 克拉维酸、氨苄西林- 舒巴坦、哌拉西林- 他唑巴坦、替卡西林- 克拉维酸)； 口服头孢烯类 (头孢克罗、头孢地尼、头孢泊肟、头孢丙烯、头孢呋辛、氯碳头孢)； 注射用头孢烯类包括I、 II、 III和 IV代头孢菌素(头孢孟多、头孢唑啉、头孢吡肟、头孢美唑、头孢尼西、头孢哌酮、头孢噻肟、头孢替坦、头孢唑肟、头孢曲松、头孢呋辛、头孢噻吩、头孢洛林、拉氧头孢)
13、；和碳青霉烯 (多利培南、厄他培南、亚胺培南、美罗培南)。除了新的具有抗MRSA活性的头孢菌素外，耐苯唑西林葡萄球菌对目前所有b- 内酰胺类药物耐药。因此，对各种b- 内酰胺类抗菌药物敏感或耐药结果，可以通过只检测青霉素和头孢西丁或苯唑西林而推测得到。除不建议常规测试其他b- 内酰胺类药物，具有抗-MRSA活性药物除外。见注释 (4)。苯唑西林用于金黄色葡萄球菌和路登葡萄球菌(12)苯唑西林纸片试验不可靠，当使用头孢西丁作为替代试验报告苯唑西林纸片试验结果时见头孢西丁和注释(13)。(13)头孢西丁可被用作苯唑西林的替代品；r 根据头孢西丁结果来报告苯唑西林敏感或耐药。(14)如果用头孢西丁和
14、苯唑西林测试金黄色葡萄球菌或路登葡萄球菌，二种药物中有任一结果为耐药，则应报告受试菌株对苯唑西林耐药。苯唑西林用于除路登葡萄球菌外的凝固酶阴性葡萄球菌（CoNS）(15)对于某些 CoNS，由于某些非表皮葡萄球菌苯唑西林MIC为0.52g/ml，而缺乏mecA基因，因此，苯唑西林MIC解释标准可能高估了耐药性。除表皮葡萄球菌外，对于苯唑西林MIC为0.52g/mlCoNS引起的严重感染，适合于测试分离菌株mecA基因或PBP2a或头孢西丁纸片扩散法敏感性。.万古霉素用于金黄色葡萄球菌。(18)测定所有葡萄球菌分离株对万古霉素敏感性应执行MIC试验。纸片扩散法既不能区别万古霉素敏感与中介金黄色葡
15、萄球菌，也不能区分万古霉素敏感、中介和耐药凝固酶阴性葡萄球菌，对所有分离菌株给出相似大小抑菌圈。(19)除了下述情况外，葡萄球菌纸片扩散法抑菌圈直径大小与万古霉素MIC不存在相关性。30g万古霉素纸片试验可检测含vanA基因的万古霉素耐药金黄色葡萄球菌 (VRSA)。上述菌株在纸片周围表现无抑菌圈 (直径 = 6 mm)。应确证无抑菌圈分离菌的鉴定结果。对未测定万古霉素MIC，而万古霉素抑菌圈直径 7 mm葡萄球菌分离株，不能报告其对万古霉素敏感。(20)检测到万古霉素 MIC 8mg/mL的任何金黄色葡萄球菌，应送到参考实验室。见附录A。(VRSA)耐万古霉素金黄色葡萄球菌(21)检测到万古霉素 MIC 32mg/mL的任何凝固酶阴性葡萄球菌，应送到参考实验室。(23)分离于呼吸道的菌株不报告达托霉素结果。(24)对试验敏感的葡萄球菌，可使用氨基糖苷类与试验敏感的具有活性的其他药物一起进行联合。大环内酯类(25)对泌尿道分离的菌株不常规报告。四环素类(26)对四环素敏感的菌株被认为对多西环素和米诺环素也敏感。然而，某些对四环素中介或耐药菌株可对多西环素、米诺环素或二者敏感。氟喹诺酮类(27)用喹诺酮类治疗葡萄球菌引起的感染，在延长治疗期间，葡萄球菌敏感株可发展为耐药株。因此，起初敏感菌株在开始治疗后34天内可
