几种常见疾病的造模方法

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1、几种常见疾病的造模方法1血管性痴呆大鼠模型动物选取选用健康II级SD雄性大鼠，体重280- 320 g,动物于安静环境下分笼饲养，室温 控制在(22 士 1)C的范围内，相对湿度60%，光线自动控制，明(07: 00- 19: 00) 暗(19: 00-07)交替，给予充足清洁饮水、摄食。处理大鼠10%水合氯醛腹腔注射(1 g/ kg)麻醉后，将其仰卧固定。分离右颈总动脉(CCA)，颈内动脉(ICA)及颈外动脉(ECA)并挂线备用，结扎ECA与CCA，用动脉 夹夹闭ICA远心端后，迅速于ECA与ICA分义处作一切切口，从切口处插入一端 加热成光滑球形尼龙线(直径为0. 25 mm,距球端2cm

2、处作标记)。线插入ICA后， 于入日处稍稍结扎尼龙线与入口处ICA段，然后松开夹闭ICA的动脉夹，继续插 入尼龙线至稍有阻力后略回撤，至线插入深度为(18. 5 士 0. 5)mm左右，实现大 脑中动脉阻塞导致脑缺血。再次结扎入口处，尼龙线外留约1缝合皮肤。2h后轻轻提拉所留线头至有阻力，实现大脑中动脉再灌，则造模完 成。纳入动物入选的标准(按照Zea Longa 5级评分法取评分为2,3,4分的动物，动物于缺血 2h后出现对侧前肢倦曲或行走转圈或行走向对侧倒体征则纳入，动物无此体征 或于缺血2h后仍不清醒者弃去。2大鼠酒精性肝病模型取材体重125- 155g雄性SD大鼠，环境温度18C 20

3、 0C,湿度70%左右，自由采 食全价营养颗粒饲料，垫料为紫外线消毒后的卫生纸。将酒精体积分数为0. 52的红星二锅头自酒(北京酿酒总厂生产)，按体积比分别稀 释成 400Io .45010 .500lo ( v/ v)备用。处理按每周所测得的体重给子每日早晚白酒灌胃各1次。第1周将稀释成40%的白酒 按剂量4g/(kg.d)、每次 0. 5m1/ 100g 灌胃，第 2 周按剂量 8g/(kg.d)、每次 1. 0ml/ 100g, 灌胃，第5周开始将稀释成45%的自酒按9g/(kg.d)，每次1. 0m1/ 100g灌胃，第9 周将稀释成50%的白酒按10g/ (kg.d)、每次1. 0m

4、1/ 100g灌胃，第11周起改用自由饮酒至 第12周，以浓度50%白酒作为主要饮料，日供给量40ml，同时限制饮水。纳入弃去死亡的大鼠，即为模型大鼠。3肝郁脾虚证大鼠模型取材健康雄性SD大鼠，体重(230 士 10) g，SPF级，所有动物提前购入，适应性饲养 3d, 5只/笼。光照节律12L: 12D(6 : 001 & 00),室温(22 士 2) C，保持动物室 安静。相对湿度保持3%一 40%，喂常规颗粒饲料及饮用水。处理大鼠适应性饲养3d后进行初步筛选，将过于活跃和过于安静的大鼠排除，以慢性 束缚方法制作慢性应激大鼠模型，束缚架自制(T型束缚台:底座宽10 cm,长20 cm, 厚

5、2 8 cm)上端束缚台长22 cm,最宽处66 cm,两侧分别有适合四肢放置的四槽及 一条可调节的粘贴软带)，将大鼠束缚于束缚架上，两条粘贴软带分别固定大鼠 的胸部和腹部，放入饲养箱中，每日3h,早8点到11点，连续21d,.纳入弃去死亡大鼠，即为模型大鼠。4糖尿病大鼠模型取材健康SD大鼠60只，SPF级，雄性，体重190 230g.大鼠预先饲养3d.处理造模前动物禁食16 h,按50 mg/ kg的剂量一次性快速腹腔注射0. 5%的链脲佐菌 素。注射完后给食给水，2h后灌胃给予25%的葡萄糖水，防止大鼠低血糖的发 生。于造模后第3天、第10天分别测定尿糖和空腹6h的血糖。尿糖阳性且空腹 6

6、h血糖16.7 mmol/ L者为糖尿病大鼠。纳入如上所述。5类风湿关节炎肾虚证大鼠模型取材选用6周龄无特殊病原体级SD大鼠，雌雄各半。正常饲料适应性喂养1周。处理去势法:按常规方法做去势手术，即摘除双侧卵巢与睾丸，术后28 d,取适量牛 II型胶原溶液（浓度为2 g/ L）逐滴加入至等容积的不完全弗氏佐剂中，牛1型胶原 终浓度为1 g/ L;冰浴中用匀浆器充分乳化以滴入水中不打扩散为度;取乳化后的混合物，按0. 2 mL/只，即200ug牛ll型胶原/只，于尾根部皮下注射;7d后按0. 1 mL/只，即100 ug牛11型胶原/只，于尾根部皮下加强免疫一次。纳入弃去死亡大鼠，即为模型大鼠。6

7、虚寒证大鼠模型取材SPF级雄性SD大鼠雌雄各半，体质量（240 士 10）g。处理以注射用氢化可的松琥珀酸钠（20 mg/ kg）肌肉注射，每天1次，连续14 do 纳入弃去死亡大鼠，即为模型大鼠。7骨质疏松大鼠模型 取材健康SPF级雄性SD大鼠，12月龄，体质量(330 士 10) g。室温1923C室内饲养， 每日12h光照，定量给食，自由饮水。处理经苯巴比妥钠(110 mg/ kg) ip麻醉后，经腰背部切口切除双侧卵巢，手术后分笼饲养。纳入手术4周后，弃去死亡大鼠，即为模型大鼠。8血瘀型颈椎病大鼠模型取材健康SPF级雄性SD大鼠，3月龄，体质量(330 士 10) g。处理首先采用动静

8、力失衡造大鼠颈椎间盘退变模型。将大鼠颈后部剪毛和清洁后，按 氯氨酮0. 1/kg体质量行腹腔注射麻醉，取颈背部正中纵向切口，长约2 一 2.5 cm，切 开皮肤后，横向切断颈夹肌和头、颈、寰最长肌，切除颈骼肋肌与头半棘肌，然 后依次切除棘上和棘间韧带，建立动静力失衡性大鼠颈椎间盘退变模型。观察 2.5个月后，采用肾上腺皮质激素加肾上腺素应用法造出血瘀症型，氢化可的松 10mg/kg体质量肌肉注射，用药13 d，然后肾上腺素0.36 mg/kg体质量皮下注射， 用药1 d。纳入弃去死亡大鼠，即为模型大鼠。9激素性股骨头坏死大鼠模型取材4月龄健康Wistar大白鼠雌雄各半。以正常饲料适应性喂养2周。处理精确称重后，肌肉注射地塞米松磷酸钠(10 mg/kg )，每周1次，共注射14周.纳入弃去死亡大鼠，即为模型大鼠。10膝关节骨性关节炎兔模型取材健康6月龄新西兰大白兔52只，雌雄各半，空腹体重22.5kg.处理先剪去兔左后肢踩关节以上1cm 一腹股沟下1. 5 cm区域兔毛，树脂绷带经65 一 85C热水浸泡软化后，以兔膝关节为中心缠绕，松紧以不脱落为度，使兔膝 关节仲直位固定，模型制备过程中随时观察绷带固定情况，若出现松动或脱落者 要及时重新固定，制动满6周。纳入若制备的模型兔出现足底溃烂、感染、上呼吸道感染、骨折等动物，均予以排除。