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1、包埋时间50%酒精:1 个小时70%酒精:1 个小时80%酒精:1 个小时90%酒精:1 个小时95%酒精:1 个小时无水酒精 1:1 个小时无水酒精 2:1 个小时 无水酒精: 二甲苯 1:11 个小时二甲苯透明:时间不定 二甲苯:石蜡 1:1 20- 1 个小时不等 石蜡1:1 个半小时 石蜡2:1 个半小时包埋的时间不确定,由组织块的大小来决定,像一般的比较 小的而且比较容易脱水的如消化道的胃、小肠等脱水半个小时至 四十分就行,蝌蚪整体的话因为有皮肤包着所以时间要长一些至 少一个小时这样算下来包完一套需要至少 12 个小时,包埋的关键 不是脱水,而是在那两步 1:1 上,只要这两个过度做
2、好了其余的 就很顺畅了,只要1:1 时间够了透明时间就可以适当的短一些,一 般不要超过 1 分钟,30 秒左右就可以。想做好石蜡切片从取材到染色每一步都很重要,可以说是环 环相扣,哪一步没做好都会影响最终的结果。现在从取材说起,取材时要迅速,以免组织自溶,固定要充 分,固定液我们一般用的有两种,一是 10%中性福尔马林溶液, 第二是 Bouin 氏液,这个根据组织来决定用哪个,要是整体固定 蝌蚪的话可以用浓度稍高一些的福尔马林,一般可以用 1215% 的福尔马林。取下的材料需固定一段时间,至少要过夜,若是固 定时间比较长的话需要用流水冲洗一个晚上第二天再脱水包埋, 时间短的话,第二天可以直接用
3、水泡一个半小时即可进行包埋, 当然这其中要换几次水。包埋完切片,捞出的片子至少烘干一个晚上的时间。二甲苯2:30 分钟二甲苯1:30 分钟酒精:二甲苯 1:1:10 分钟无水酒精 2:5 分钟无水酒精 1:5分钟95%;5 分钟90%:5 分钟80%:5 分钟70%:5 分钟50%:5 分钟流水冲洗 苏木精时间不定,视当时染液的情况而定。一般 5-10 分钟,甚至 更长。流水冲洗50%:5 分钟70%:5 分钟80%:5 分钟90%:5 分钟伊红30 秒,吸水纸上吸一下染液95%:蘸三下无水酒精 1:5分钟无水酒精 2:5 分钟酒精:二甲苯 1:1 10 分钟二甲苯1:30 分钟二甲苯2:30 分钟染色整个过程大约需要四个小时,每一步都要用吸水纸蘸几下; 整个实验下来至少需要两天半时间。具体问题不明白的话再问我吧,也可以上网去查一下别人怎么做 的。