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1、实验九、饲料中粗纤维的测定一、实验目的使学生掌握用饲料中粗纤维的测定方法，了解粗纤维测定方法中存在问题及解决的方案。二、实验原理用固定量的酸和碱，在特定条件下消煮样品，再用乙醚、乙醇除去醚溶物， 经高温灼烧扣除矿物质的量，所余量称为粗纤维。它不是一个确切的化学实体， 只是在公认强制规定的条件下，测出的概略养分。其中以纤维素为主，还有少量 半纤维素和木质素。三、实验设备1实验室用样品粉碎机或研钵；2、分样筛：孔径0.45mm（40 目）;3、分析天平：感量 0.0001g ;4、电热恒温箱：可控制温度在 130C；5、高温炉：电加热，可控制温度在 550600 C；6、古氏坩埚：30ml，预先加
2、入30ml酸洗石棉悬浮液。再抽干，以石棉厚度 均匀，不透光为宜；7、消煮器：由冷凝球的高型烧杯（50ml ）或有冷凝管的锥形瓶；8锅滤装置：抽真空装置，吸滤瓶及漏斗；9、滤器：200目不锈钢网和尼龙网，或 G2号玻璃滤器；10、干燥器：用氯化钙（干燥试剂）或变色硅胶作干燥剂。四、实验内容1、称样：称取12g试样，准确至0.0002g，如果脂肪1新不脱脂，110% 可不必脱脂，但建议脱脂，脂肪10%、须脱脂，或用测脂肪后残渣。2、酸煮：加入0.255 0.005mol/L煮沸的硫酸200ml和1滴正辛醇，使其 在2min沸腾，且连续微沸30 1min。注意保持硫酸浓度不变，样品不可损失。3、过滤
3、：用沸蒸馏水洗至不含酸。4、 碱煮：将酸洗不溶物放入原容器中，加浓度准确为0.313 0.005mol/L且已沸的氢氧化钠溶液200ml，同样微沸30min5、过滤：先用25ml0.255mol/L硫酸洗涤，再用沸蒸馏水洗至中性，用乙醇 15ml洗残渣。6、 烘干灰化：取下坩埚，130C烘干至恒重。550 25C灼烧30min,冷却 称重至恒重。7、计算结果：粗纤维（） = m 一 m2100mmi :130C烘干后坩埚 亠样残渣重（g）m2 :550C灼烧后坩埚-样残渣重（g）m :风干样重（g）1976年Van Soet提出了中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维、酸性洗涤木质素作 为评价饲草纤维类物
4、质的指标。軒!I索和残兪矿鞫喷K质素置比揭比纤堆素技感解木Oft矿物质采分木荒鳶就燃愷NDF木质素、纤维素、二氧化硅、半纤维素、细胞壁的成分如镶嵌微量的蛋白质ADE木质素、纤维素、二氧化硅4-中性抚谦环耋（NDF）ADF-NDF半纤维素ADF-ADL纤维素该法可以分别测出纤维素，半纤维素、木质素和硅酸盐，这量一大进步，但 该法提取出的纤维物质中残留含氮尚有 2050%（有可能不消化），在NDF还有淀 粉残留，使准确性下降，该法不适于纤维量低的精料（蛋白质或淀粉多的试样）， 因此也叫饲草分析方案。Fonnesback （冯列士贝克）于19701974年提出冯氏法。（1）先用蛋白酶将饲料进行消化（pH=3.5）,然后用酸性洗涤剂煮沸 1h，使原饲料中95%以上的蛋白质被消化。(2) 将上步分离出的细胞壁用 40僦酸煮1h,使半纤维素水解，过滤残渣 为纤维素和木质素，酸不溶灰分，1步-2步二半纤维素含量。(3) 将上步所得的残渣用72僦酸处理3h,过滤洗涤残渣，105土2C烘干, 称重，然后灼烧称重，木质素逸失，剩余为二氧化硅。试样pH=3.5蛋白前消化蛋白质细胞壁酸性洗涤剂煮勢升水中含15克十二烷硫験钠+12rnl冰酯酸细胞壁斗硫酸煮比卜十半纤维素纤维素、木质素sio72%硫鬣3h|j 纤维蓋木质素f SiOa灼烧卜木质素SiC3五、作业完成计算的全过程及计算结果
