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1、中药新药选题与设计中药新药选题与设计邱明丰邱明丰上海交通大学药学院上海交通大学药学院1内容v科学选题科学选题v方案设计方案设计v实例实例v选题原则选题原则 需要性需要性 科学性科学性 可行性可行性 创新性创新性 效益性效益性v选题方法选题方法 调查研究调查研究 选题途径选题途径 课题来源课题来源3科学选题科学选题选题原则选题原则v需要性需要性 临床疾病谱需要性、发展性临床疾病谱需要性、发展性 市场紧缺或未饱和的药物市场紧缺或未饱和的药物 中医药有较大的优势中医药有较大的优势10类常见、多发、市场容量大的疾类常见、多发、市场容量大的疾病治疗药物：病治疗药物： （1） 心脑血管疾病（包括高血压、高
2、脂血症）心脑血管疾病（包括高血压、高脂血症） （2） 抗肿瘤药抗肿瘤药 （3） 肝炎防治药肝炎防治药 4v60亿人口中亿人口中20亿感染了乙型肝炎病毒。亿感染了乙型肝炎病毒。v慢性乙型肝炎病毒感染的为慢性乙型肝炎病毒感染的为3.84亿（全球人口的亿（全球人口的5%）。）。 亚洲占亚洲占2/3，中国占，中国占1/3，有，有9300万病毒携带者。万病毒携带者。v中国每年与乙肝相关的死亡是中国每年与乙肝相关的死亡是75万人，占到死因的第七位。万人，占到死因的第七位。 每年每年34万死于乙肝感染，万死于乙肝感染，33万人死于乙肝相关疾病，其他人万人死于乙肝相关疾病，其他人死于丙肝等其它肝炎，多数人死于
3、劳动力最强的年龄。死于丙肝等其它肝炎，多数人死于劳动力最强的年龄。5 （4）抗病毒性疾病药（包括抗艾滋病药）抗病毒性疾病药（包括抗艾滋病药） 12月月1日为世界艾滋病日日为世界艾滋病日 2007.10月底，中国艾滋病病毒感染者和艾滋病病人月底，中国艾滋病病毒感染者和艾滋病病人 22万万3501例（艾滋病病人例（艾滋病病人62838例，死亡报告例，死亡报告22205例）例） 2009.11.30上上海海艾艾滋滋病病疫疫情情仍仍呈呈上上升升态态势势，且且新新报报告告艾艾滋滋病病病病毒毒感感染者和病人以染者和病人以45岁以下人群为主、以男性居多岁以下人群为主、以男性居多 1987年年上上海海报报告告
4、第第一一例例艾艾滋滋病病病病毒毒感感染染者者、1996年年报报告告第第一一例例艾艾滋滋病病病病人人以以来来，截截至至2009年年11月月20日日，上上海海累累计计报报告告艾艾滋滋病病病病毒毒感感染染者者4828例例。2009艾艾滋滋病病病病毒毒感感染染者者人人数数比比2008年年同同期期增增加加四四分分之之一一。截截至至2009年年底底，估估计计上上海海目目前存活的艾滋病病毒感染者和病人约前存活的艾滋病病毒感染者和病人约7000人。人。 6 （5）免疫功能调节药（如系统性红斑狼疮、硬皮病、皮肌炎、）免疫功能调节药（如系统性红斑狼疮、硬皮病、皮肌炎、 结节性动脉周围炎、股骨头无菌性坏死等）结节性
5、动脉周围炎、股骨头无菌性坏死等） （6）功能紊乱调节药（包括抗抑郁、抗焦虑、神经衰弱、胃肠功能紊乱、）功能紊乱调节药（包括抗抑郁、抗焦虑、神经衰弱、胃肠功能紊乱、 功能性子宫出血、月经不调、性功能障碍）功能性子宫出血、月经不调、性功能障碍） （7） 急性热病用药（包括抗感染和镇静药）急性热病用药（包括抗感染和镇静药） （8） 延缓衰老药延缓衰老药 （9） 抗风湿病类药（包括类风湿药等）抗风湿病类药（包括类风湿药等） （10）补益药、养生保健类药）补益药、养生保健类药 对对比比同同类类产产品品，应应该该有有2条条以以上上优优势势，如如更更有有效效、更更低低毒毒、更更廉廉价价、更更方便等方便等 治
6、疗肝炎的水飞蓟素片改滴丸：更有效、更速效治疗肝炎的水飞蓟素片改滴丸：更有效、更速效7水飞蓟素水飞蓟素现有剂型现有剂型v片剂v胶囊8水飞蓟素水飞蓟素滴丸滴丸水飞蓟素水飞蓟宾口服tid15丸/次固体分散技术滴丸机水飞蓟素：PEG910体外溶出度体外溶出度11水飞蓟素滴丸和益肝灵片的药时曲线水飞蓟素滴丸和益肝灵片的药时曲线 12Ming-feng Qiu, Wei Jia, Shao-shun Li, et,al. A New Silymarin Preparation Using Solid Dispersion Technique, Advances in Therapy (IF = 0.829
7、), Vol. 22, (6) 595-600, 2005v科学性科学性 组方科学：清开灵注射液（牛黄、水牛角、珍珠母代海珠母、组方科学：清开灵注射液（牛黄、水牛角、珍珠母代海珠母、 黄芩、栀子、板蓝根）以安宫牛黄丸为基础黄芩、栀子、板蓝根）以安宫牛黄丸为基础 单粒包金衣的是单粒包金衣的是350元一粒（元一粒（3g） 双粒包金衣的是双粒包金衣的是700元一盒元一盒 （3g2）v剂型科学：清开灵注射液中以板蓝根代黄连，主要防止小檗剂型科学：清开灵注射液中以板蓝根代黄连，主要防止小檗 碱沉淀黄芩中黄芩苷（丸剂中不影响）碱沉淀黄芩中黄芩苷（丸剂中不影响） 动物模型科学：动物模型科学：(太阳病模型太阳
8、病模型) 临床以临床以“证证”设计科学：胸痹冠心病设计科学：胸痹冠心病13v可行性可行性 人力、物力（设备、经费等）、情报等综合配套人力、物力（设备、经费等）、情报等综合配套 规范化：规范化： 依法（药品注册管理办法等）设计实施申报依法（药品注册管理办法等）设计实施申报 原辅料有标准，来源充足原辅料有标准，来源充足 工艺合理，厂家可产工艺合理，厂家可产 药理有相应病种原则药理有相应病种原则 临床方案可行临床方案可行14v创新性创新性 以安宫牛黄丸为基础以安宫牛黄丸为基础保效保效改剂开发清改剂开发清开灵注射液，急诊用药开灵注射液，急诊用药 微波干燥和喷雾干燥的粉状阿胶，加微波干燥和喷雾干燥的粉状
9、阿胶，加入泡腾剂制成入泡腾剂制成“阿胶泡腾颗粒剂阿胶泡腾颗粒剂”速溶、速溶、碳酸型饮料风味碳酸型饮料风味 v效益性效益性：社会效益、经济效益：社会效益、经济效益15选题方法选题方法v调查研究调查研究 临床调研：临床需要（临床调研：临床需要（肾炎水肿肾炎水肿）、病证选择）、病证选择 文献调研文献调研:科技图书（药典、部标、地标）、科技图书（药典、部标、地标）、 期刊杂志、会议论文、研究生论文、期刊杂志、会议论文、研究生论文、 专利网、药监局网、其他网络专利网、药监局网、其他网络 市场调研（特别是同类产品）、信息咨询市场调研（特别是同类产品）、信息咨询 随时关注同类产品开发动态随时关注同类产品开发
10、动态 16v选题途径选题途径 古典医籍：日本后生省古典医籍：日本后生省210个汉方个汉方80来源于来源于伤寒伤寒金匮金匮 治疗冠心病良药苏冰滴丸由宋代治疗冠心病良药苏冰滴丸由宋代太平惠民和剂局方太平惠民和剂局方苏合苏合 香丸（香丸（15味）味） 名医经验方：枕中健脑液源于凌一揆名医名医经验方：枕中健脑液源于凌一揆名医 法定处方（复方丹参片改滴丸）、单验秘方法定处方（复方丹参片改滴丸）、单验秘方 协定处方、临床科研方（复方丹参片）协定处方、临床科研方（复方丹参片） 国家部省招标、世界新药研究动态国家部省招标、世界新药研究动态17v课题来源课题来源 政府组织项目政府组织项目:纵向课题，十一五、纵向
11、课题，十一五、863、973、重大科学计划、中药现代化、重大科学计划、中药现代化 横向课题横向课题:企业、研究机构等委托、合作企业、研究机构等委托、合作 自选课题：兴趣自选课题：兴趣18方案设计方案设计19v目的目的v依据依据v程序程序v内容内容 根据现有条件确定研究方向根据现有条件确定研究方向 集中构思、设想和意图，描绘路线、方法和步骤集中构思、设想和意图，描绘路线、方法和步骤 计划阶段目标和最终目标计划阶段目标和最终目标 按照制定的方案进行研究按照制定的方案进行研究20目的目的v增强项目预见性、减少风险性增强项目预见性、减少风险性 高技术：现代药学技术、现代药理毒理技术、现代临床技术高技术
12、：现代药学技术、现代药理毒理技术、现代临床技术 高投入：临床前的药学、药理、毒理等投入高投入：临床前的药学、药理、毒理等投入50万以上万以上 高风险：批临床风险、批生产风险高风险：批临床风险、批生产风险 生产成本投入风险（多糖生产车间）、市场开拓风险生产成本投入风险（多糖生产车间）、市场开拓风险 周期长：周期长：3-5年年21v保证研究质量保证研究质量 项目齐全：充分理解法规技术要求，保证报临床或生产资料齐全项目齐全：充分理解法规技术要求，保证报临床或生产资料齐全 （综述（综述1-6药学药学7-18药理毒理药理毒理19-28临床临床29-33） 方法规范：法定标准或方法（如方法规范：法定标准或
13、方法（如浸膏测定浸膏测定），方法学考察规定项目），方法学考察规定项目 前后照应：做长毒后再做药效有时出现毒理剂量低于药效剂量前后照应：做长毒后再做药效有时出现毒理剂量低于药效剂量 小试样品做质量标准和药理毒理小试样品做质量标准和药理毒理 中试样品中试样品药理毒理数量、形态对应（药理毒理数量、形态对应（复黄片复黄片GLP报告报告）22v提高研究水平提高研究水平：制剂水平、质控水平、疗效：制剂水平、质控水平、疗效 速效高效（固体分散技术滴丸）速效高效（固体分散技术滴丸） 长效（缓释控释）长效（缓释控释） 剂量小（提取纯化，复方丹参缓释片，一天剂量小（提取纯化，复方丹参缓释片，一天2片）片） 毒性小
14、（缓释控释）毒性小（缓释控释） TLC一般要求一般要求10味以上处方鉴别不少于味以上处方鉴别不少于1/3 10味以下处方鉴别不少于味以下处方鉴别不少于1/2 5味以下处方全部鉴别（味以下处方全部鉴别（复黄片复黄片）23v降低科研成本降低科研成本 合理设计合理设计 专家论证专家论证 预试调整预试调整 少走弯路少走弯路 控制成本控制成本 处方、工艺为基石，不能随意变动处方、工艺为基石，不能随意变动24v处方、方解、功能主治处方、方解、功能主治： 保证组方合理性保证组方合理性(中医药理论中医药理论) 鉴别药味按君臣佐使选择鉴别药味按君臣佐使选择(麻黄、桂枝、杏仁、甘草麻黄、桂枝、杏仁、甘草) 含测指
15、标按君臣佐使选择含测指标按君臣佐使选择 药理模型根据功能主治设计药理模型根据功能主治设计依据依据25v各药成分理化性质各药成分理化性质： 剂型选择（剂型选择（水飞蓟素溶解性、黄连苦味水飞蓟素溶解性、黄连苦味） 工艺路线工艺路线 （人参提取皂苷、多糖人参提取皂苷、多糖） 提取分离条件提取分离条件(大孔吸附树脂提纯人参皂苷大孔吸附树脂提纯人参皂苷) 质量标准方案（质量标准方案（醇提人参皂苷醇提人参皂苷Rg1进行含测进行含测） 稳定性考察（稳定性考察（一般不选挥发油指标一般不选挥发油指标）26v办法办法、指导原则等有关、指导原则等有关法规法规： 新药类别新药类别 研究内容研究内容 申报资料申报资料v
16、药典、部标等药典、部标等法定法定标准：标准： 制剂通则检查项目、鉴别和含量测定方法制剂通则检查项目、鉴别和含量测定方法 复方丹参滴丸中丹参素复方丹参滴丸中丹参素HPLC测定含量测定含量27v文献调研文献调研v预试：如浸膏收率与剂型选择预试：如浸膏收率与剂型选择 （片一天最多（片一天最多24片，胶囊一天最多片，胶囊一天最多24粒）粒）v设计：尽可能查全文献的基础上进行设计：尽可能查全文献的基础上进行v论证调整：科学、合理、可行论证调整：科学、合理、可行程序程序28v科学依据（必要性、理论依据）和意义、预期目的；科学依据（必要性、理论依据）和意义、预期目的；v研究内容和技术路线：研究内容和技术路线
17、： 核心和关键包括剂型、工艺、质量标准、稳定性、核心和关键包括剂型、工艺、质量标准、稳定性、 药效、毒理、临床药效、毒理、临床 v需具备的工作条件、人员、设备等需具备的工作条件、人员、设备等v经费预算（经费预算（按预算计划使用按预算计划使用）v工作进度（工作进度（项目年度检查项目年度检查）内容内容29水飞蓟素水飞蓟素临床需要、药物性质临床需要、药物性质用药对象、给药剂量用药对象、给药剂量剂型选择剂型选择性状、鉴别、含量测定性状、鉴别、含量测定检查检查-溶出度（溶散时限）溶出度（溶散时限）生物利用度、微生物限度生物利用度、微生物限度质量标准质量标准稳定性稳定性水飞蓟素滴丸水飞蓟素滴丸处方设计处方
18、设计成型工艺成型工艺制剂成型制剂成型有效性有效性水水飞蓟素滴丸研究素滴丸研究实例例技技术路路线示意示意图安全性安全性主要药效学主要药效学急毒、长毒急毒、长毒30v 目的目的 根据根据药品注册管理办法药品注册管理办法（试行试行），按），按中药中药八类新药八类新药申报（申报（“改变国内已上市销售药品剂型的改变国内已上市销售药品剂型的制剂制剂”），集中突破新剂型研究、提高生物利用度），集中突破新剂型研究、提高生物利用度与溶出、使其在同类产品中具有独到之处，力争获与溶出、使其在同类产品中具有独到之处，力争获得国家新药证书得国家新药证书。 一、一、选题目的与意目的与意义31v意义意义临床病证需要角度临床
19、病证需要角度市场产品需要角度市场产品需要角度本品种特色及预试验情况本品种特色及预试验情况32 临床病证需要角度：临床病证需要角度： 病毒性肝炎病毒性肝炎是是由多种肝炎病毒引起的常见传染病，具有由多种肝炎病毒引起的常见传染病，具有传染性强、传播途径复杂，流行面广泛、发病率较高等特点。传染性强、传播途径复杂，流行面广泛、发病率较高等特点。临床主要临床主要表现表现为乏力、食欲减退、恶心、上腹部不适、肝脏为乏力、食欲减退、恶心、上腹部不适、肝脏肿大及肝功能损害，部分病人可有黄疸和发热。病毒性肝炎肿大及肝功能损害，部分病人可有黄疸和发热。病毒性肝炎从病源学上分为甲型、乙型、丙型、丁型和戊型五种，临床从病
20、源学上分为甲型、乙型、丙型、丁型和戊型五种，临床分型分型可分为急性肝炎、慢性肝炎、重型肝炎和肝炎肝应变等。可分为急性肝炎、慢性肝炎、重型肝炎和肝炎肝应变等。急性肝炎病人大多在急性肝炎病人大多在6个月以内恢复，乙型、丙型和丁型肝个月以内恢复，乙型、丙型和丁型肝炎易于演变成慢性，慢性肝炎具有病程长、缠绵难愈的炎易于演变成慢性，慢性肝炎具有病程长、缠绵难愈的特点特点，最终导致肝硬化或肝癌。慢性乙型肝炎、丙型肝炎与原发性最终导致肝硬化或肝癌。慢性乙型肝炎、丙型肝炎与原发性肝细胞癌的发生密切相关。肝细胞癌的发生密切相关。33 目前病毒性肝炎患者目前病毒性肝炎患者数量数量呈增加趋势，据调查，目前我呈增加趋
21、势，据调查，目前我国病毒性肝炎患者和乙肝病毒携带者分别占全国总人口的国病毒性肝炎患者和乙肝病毒携带者分别占全国总人口的10%15（约（约1.32.0亿人），其中慢性肝炎病患者约有亿人），其中慢性肝炎病患者约有2000多万例，每年死于肝炎的人口有多万例，每年死于肝炎的人口有50万左右万左右,且每年大约且每年大约有有200万新的肝炎患者。因此该病正严重万新的肝炎患者。因此该病正严重危害危害着我国人民的着我国人民的身心健康、正常工作与生活，已经成为影响我国人民健康的身心健康、正常工作与生活，已经成为影响我国人民健康的重大疾病之一。重大疾病之一。34 市场产品需要角度市场产品需要角度 目前，目前，20
22、02年全国肝病用药年全国肝病用药市场规模市场规模就已经达到就已经达到32.5亿人民币，市亿人民币，市场潜力与前景巨大。临床上用于病毒性肝炎的药物多达场潜力与前景巨大。临床上用于病毒性肝炎的药物多达300多种多种（中成（中成药药40余种）按其药理作用可余种）按其药理作用可分类分类为以下三类：为以下三类： （1）抗肝炎病毒药：主要抑制乙型肝炎病毒的复制，以）抗肝炎病毒药：主要抑制乙型肝炎病毒的复制，以干扰素、干扰素、贺普丁、拉米夫定等为代表。贺普丁、拉米夫定等为代表。 （2）免疫调节剂：增强免疫力，如免疫核糖核酸、胸腺肽、甘利欣、）免疫调节剂：增强免疫力，如免疫核糖核酸、胸腺肽、甘利欣、香菇多糖等
23、。香菇多糖等。 （3）保肝降酶药：可改善肝细胞功能、促进肝细胞修复、降低血清）保肝降酶药：可改善肝细胞功能、促进肝细胞修复、降低血清谷丙转氨酶等，如益肝灵片、谷丙转氨酶等，如益肝灵片、五酯胶囊五酯胶囊等。等。 35本品种特色及预试验情况本品种特色及预试验情况 益肝灵片益肝灵片为为第一代第一代肝炎治疗中成药，已经于肝炎治疗中成药，已经于1993年列入卫生部中年列入卫生部中药成方制剂第八册，并进入国家药成方制剂第八册，并进入国家基本药物基本药物目录，已经具有稳定的目录，已经具有稳定的市市场场，单品种销售达，单品种销售达3000万元人民币以上，为新型中药制剂开发奠定万元人民币以上，为新型中药制剂开发
24、奠定了市场基础。国内现有的水飞蓟素制剂益肝灵片（包括糖衣片和薄了市场基础。国内现有的水飞蓟素制剂益肝灵片（包括糖衣片和薄膜衣片）主要由上海复星朝晖药业有限公司生产。膜衣片）主要由上海复星朝晖药业有限公司生产。 预试验结果预试验结果发现：我们制备滴丸发现：我们制备滴丸10分钟内溶出即超过分钟内溶出即超过50，是，是益肝灵片和水飞蓟素胶囊的益肝灵片和水飞蓟素胶囊的56倍，倍，45分钟内溶出达分钟内溶出达70；60分钟分钟内的溶出是片剂和胶囊的内的溶出是片剂和胶囊的23倍，见图。倍，见图。3637v制备工艺设计制备工艺设计v质量标准设计质量标准设计v稳定性设计稳定性设计v(药效学设计药效学设计)v(
25、毒理学设计毒理学设计)二、研究内容二、研究内容设计38v原料的前处理原料的前处理v提取纯化提取纯化v制剂成型制剂成型v中试中试制制备工工艺设计39原料的前处理设计原料的前处理设计鉴定与检验鉴定与检验v鉴定依据鉴定依据:化学药品地标转国家药品标准化学药品地标转国家药品标准第七册，标准第七册，标准编号为编号为WS-10001-(HD-0600)-2002，药品批准文号为国药，药品批准文号为国药准字准字H32025677 v检验内容检验内容: （方法、指标、标准物质、标准要求等）（方法、指标、标准物质、标准要求等）性状性状鉴别鉴别检查检查含量测定含量测定40性状性状:应为浅黄色松散粉末，无特殊气味。
26、（或应符合标准）应为浅黄色松散粉末，无特殊气味。（或应符合标准）鉴别鉴别：进行黄酮类的醋酸铅沉淀反应和盐酸锌粉反应。：进行黄酮类的醋酸铅沉淀反应和盐酸锌粉反应。 取水飞蓟素取水飞蓟素0.1g，加甲醇，加甲醇10ml，振摇，滤过。，振摇，滤过。v取续滤液取续滤液3ml，加醋酸铅试液，加醋酸铅试液1ml，即产生黄色沉淀。，即产生黄色沉淀。v取续滤液取续滤液1ml，加锌粉少许及盐酸数滴，即显玫瑰红色。，加锌粉少许及盐酸数滴，即显玫瑰红色。41检查检查：按照中国药典：按照中国药典2005年版一部附录年版一部附录L项下方法进行项下方法进行干燥失重（干燥失重（4%），按照），按照方法进行重金属方法进行重金
27、属(20ppm)砷盐检查砷盐检查 (5ppm)含量测定含量测定:以水飞蓟宾对照品采用标准以水飞蓟宾对照品采用标准HPLC方法测定含方法测定含量量 42原料的前处理设计原料的前处理设计药材的炮制与加工药材的炮制与加工v炮制炮制：依据、方法、要求：依据、方法、要求v加工加工：规格、方法、要求：规格、方法、要求 如粉碎：药物选择、程度、方法、收率如粉碎：药物选择、程度、方法、收率 本项目未涉及本项目未涉及43提取纯化设计提取纯化设计v工艺路线设计工艺路线设计：依据（成分等）、药物分组、具体路线：依据（成分等）、药物分组、具体路线v工艺条件选择工艺条件选择： 提取纯化：药物选择、方法、条件设计提取纯化
28、：药物选择、方法、条件设计浓缩干燥：方法、条件设计浓缩干燥：方法、条件设计v评价指标与实验方法选择评价指标与实验方法选择：指标选择依据与方法：指标选择依据与方法 本项目未涉及本项目未涉及 44制剂成型设计制剂成型设计v成型方法成型方法v制剂处方：辅料种类、用量、用法制剂处方：辅料种类、用量、用法v成型工艺条件成型工艺条件45v制备方法选择或设计制备方法选择或设计：有熔融法、溶剂法、熔融溶剂法以：有熔融法、溶剂法、熔融溶剂法以及表面分散法等，由于聚乙二醇（及表面分散法等，由于聚乙二醇（PEG）为结晶性聚合物，）为结晶性聚合物，熔点较低，适宜用熔融法制备。熔点较低，适宜用熔融法制备。 （理论依据或
29、根据成分性质（理论依据或根据成分性质拟比较方法）拟比较方法）v配液条件设计配液条件设计：PEG的熔点约为的熔点约为60，因此选择熔料及保温，因此选择熔料及保温温度选择为温度选择为6090制备滴丸，看成型性，并测定加热前后制备滴丸，看成型性，并测定加热前后水飞蓟素含量看药物稳定性。水飞蓟素含量看药物稳定性。46v制剂处方设计制剂处方设计基质选择依据基质选择依据：本试验旨在提高水飞蓟素的溶出，须选用水溶性基质，：本试验旨在提高水飞蓟素的溶出，须选用水溶性基质，聚乙二醇类无生理活性，化学稳定性好，易溶于水，可用于释放水聚乙二醇类无生理活性，化学稳定性好，易溶于水，可用于释放水溶性或油溶性药物，且其熔
30、点低，极易与药物熔融形成固体分散体，溶性或油溶性药物，且其熔点低，极易与药物熔融形成固体分散体，宜于药物的溶解、熔融、滴制和成型，是滴丸中最常用的水溶性固宜于药物的溶解、熔融、滴制和成型，是滴丸中最常用的水溶性固体基质。故本试验选择体基质。故本试验选择PEG4000、PEG6000或者两者不同比例的混或者两者不同比例的混合物为基质。合物为基质。配比试验配比试验：以成型性、体外溶出度等为评价指标，采用单因素试验法：以成型性、体外溶出度等为评价指标，采用单因素试验法初选基质、冷凝液、助溶剂以及基质与药物的比例，再使用正交实初选基质、冷凝液、助溶剂以及基质与药物的比例，再使用正交实验确定最终的处方。
31、验确定最终的处方。 47基基质中中PEG6000PEG6000含量含量（% %）基基质用量用量（g g）圆整整度度丸重丸重差异差异（% %）硬硬度度15min15min溶出溶出（% %）0%0%10100.70.721214.784.78一一般般48.1448.1440%40%10100.80.872724.554.55一一般般47.8247.8250%50%10100.80.871712.742.74较好好53.1353.1360%60%10100.90.960604.204.20好好53.4953.4980%80%10100.90.988883.983.98很很好好56.0456.0490
32、%90%10100.90.912123.493.49很很好好56.2356.23100%100%10100.90.966663.163.16很很好好57.5157.5148基质比例设计基质比例设计药物：基物：基质（g/gg/g）基基质用量用量/g/g滴制滴制难易易成型性成型性硬度硬度1 1：2 22 2一般一般不能成型不能成型1 1：3 33 3一般一般不能成型不能成型2 2：7 73.53.5较好好一般一般一般一般1 1：4 44 4较好好好好较好好2 2：9 94.54.5好好好好较好好1 1：5 55 5好好好好好好1 1：6 66 6很好很好很好很好很好很好49药物基质比例设计药物基质
33、比例设计v冷凝液选择：冷凝液选择：种类、温度与去除方法选择种类、温度与去除方法选择试剂成型性成型性液体石蜡液体石蜡一般一般二甲硅油二甲硅油较好好液体石蜡：二甲硅油液体石蜡：二甲硅油=1=1：1 1（v/vv/v）好好50冷凝液种类设计冷凝液种类设计温度（温度（）成型性成型性5 5一般一般1010好好1515较好好方法方法理理论含量含量（）（）处理后含量理后含量（）（）洁净度度石油石油醚洗洗涤161613.8213.82好好试纸擦拭擦拭161615.3815.38好好51冷凝温度设计冷凝温度设计冷凝液去除方法设计冷凝液去除方法设计v滴制条件选择滴制条件选择 在滴制过程中，对滴丸的影响因素较多，如
34、滴制温度及在滴制过程中，对滴丸的影响因素较多，如滴制温度及速度、滴管口径（内径和外径）、冷却液温度等均可能影响速度、滴管口径（内径和外径）、冷却液温度等均可能影响滴丸的圆整度、硬度、溶散时间、丸重差异等。拟选用滴制滴丸的圆整度、硬度、溶散时间、丸重差异等。拟选用滴制温度（温度（）、滴速（）、滴速（d/min）、滴距（）、滴距（cm）、滴头内外经）、滴头内外经（mm/mm）为因素，设计四因素三水平的正交实验，以圆）为因素，设计四因素三水平的正交实验，以圆整度及丸重差异为评价指标，优选最佳方案。整度及丸重差异为评价指标，优选最佳方案。 52滴距（滴距（cmcm）成型情况成型情况 4 4很好很好6
35、6好好8 8较好好1010一般一般水平水平因素因素A AB BC CD D滴制温度滴制温度（）滴速滴速（d/mind/min）滴滴头内外径内外径（mm/mmmm/mm）空白空白1 1707030302.4/3.42.4/3.42 2808040403/3.63/3.63 3909050503.6/53.6/553滴距设计滴距设计滴制条件设计滴制条件设计试验号号A AB BC CD D圆整度整度丸重差异丸重差异/%/%溶出溶出/%/%综合合评分分实验1 11 11 11 11 10.9330.9332.982.9864.1164.1163.70263.702实验2 21 12 22 22 20.
36、8660.8665.635.6365.6265.6257.55657.556实验3 31 13 33 33 30.7800.7809.929.9264.2364.2352.11652.116实验4 42 21 12 23 30.9210.9213.623.6266.1566.1563.29163.291实验5 52 22 23 31 10.8210.8219.809.8066.6566.6554.35054.350实验6 62 23 31 12 20.9450.9452.762.7664.0364.0364.84364.843实验7 73 31 13 32 20.8450.8458.718.7
37、166.4466.4455.37055.370实验8 83 32 21 13 30.9400.9403.913.9168.3268.3263.20263.202实验9 93 33 32 21 10.8850.8853.713.7171.9871.9863.42763.42757.79157.79160.78860.78863.91663.91660.49360.49360.82860.82858.36958.36961.42561.42559.25659.25660.66660.66660.12960.12953.94553.94559.53659.536R R3.0373.0372.4192
38、.4199.9719.9711.2371.23754实验号号因素因素圆整度整度丸重丸重差异差异（% %）溶出溶出（% %）A AB BC C滴制温度滴制温度（）滴速滴速（d/mind/min）滴滴头内外径内外径（mm/mmmm/mm）1 1808030302.4/3.42.4/3.49.8619.8615.415.4168.9368.932 2808030302.4/3.42.4/3.49.8709.8705.345.3469.0969.093 3808030302.4/3.42.4/3.49.8659.8655.385.3870.0370.0355工艺验证设计工艺验证设计中试与三批样品制备中
39、试与三批样品制备 按制剂处方量的按制剂处方量的10倍以上进行样品制备，考察倍以上进行样品制备，考察中试制备工艺的关键技术参数，考察工艺质量是否中试制备工艺的关键技术参数，考察工艺质量是否稳定可行，设备及其性能的适应性，修订和完善适稳定可行，设备及其性能的适应性，修订和完善适合生产的制备工艺，并制得样品。合生产的制备工艺，并制得样品。56批号批号031015031016031017水水飞蓟素（素（g）132013201320PEG6000（g）422442244224PEG4000（g）105610561056应收成品（丸）收成品（丸）100000100000100000实收成品（丸）收成品（丸
40、）926429435195949成品率（）成品率（）92.6494.3595.95水水飞蓟素（素（mg/丸）丸）5.135.125.14水水飞蓟宾（mg/丸）丸）1.841.881.89性状性状棕色棕色圆形滴丸，气形滴丸，气微，味微甜、苦微，味微甜、苦棕色棕色圆形滴丸，气形滴丸，气微，味微甜、苦微，味微甜、苦棕色棕色圆形滴丸，气形滴丸，气微，味微甜、苦微，味微甜、苦鉴别（水（水飞蓟宾、水水飞蓟素）素）可可检出出可可检出出可可检出出重量差异限度重量差异限度合格合格合格合格合格合格溶出度溶出度检查合格合格合格合格合格合格微生物限度微生物限度合格合格合格合格合格合格中试设计中试设计57（1）依据中国
41、药典（）依据中国药典（2005年版）一部滴丸项下的规定对水飞年版）一部滴丸项下的规定对水飞蓟素滴丸进行丸重差异检查及溶出度的考察。蓟素滴丸进行丸重差异检查及溶出度的考察。（2）采用薄层色谱法鉴别滴丸中的水飞蓟宾。）采用薄层色谱法鉴别滴丸中的水飞蓟宾。（3）采用紫外分光光度法和高效液相色谱法检测滴丸中水飞）采用紫外分光光度法和高效液相色谱法检测滴丸中水飞蓟素的含量。蓟素的含量。质量量标准准设计58v性状性状：根据三批中试样品实际性状拟定。：根据三批中试样品实际性状拟定。v鉴别鉴别：拟以水飞蓟宾为对照采用：拟以水飞蓟宾为对照采用HPLC方法进行鉴别方法进行鉴别v检查检查：按药典规定拟进行重量差异、
42、溶出度、微生物限度检：按药典规定拟进行重量差异、溶出度、微生物限度检查、重金属、砷盐检查等项目。本品的丸重为查、重金属、砷盐检查等项目。本品的丸重为34mg，重量，重量差异限度为差异限度为10%，超出限度的丸数不多于，超出限度的丸数不多于2，超出限度一倍，超出限度一倍的丸数不多于的丸数不多于1。 45分钟内释放不低于分钟内释放不低于75%。 59批号批号细菌数菌数霉菌、酵母菌霉菌、酵母菌数数大大肠杆菌数杆菌数结论040315040315 10001000100100未未检出出符合要求符合要求040316040316 10001000100100未未检出出符合要求符合要求040317040317
43、 10001000100100未未检出出符合要求符合要求60微生物限度设计微生物限度设计批号批号重金属重金属砷砷盐0403150403153.46ppm3.46ppm未未检出出0403160403163.50ppm3.50ppm未未检出出0403170403173.46ppm3.46ppm未未检出出61重金属砷盐重金属砷盐v含量测定设计含量测定设计：指标选择、方法学考察、样品测定：指标选择、方法学考察、样品测定 为了控制本品中水飞蓟素和水飞蓟宾的含量，分别采用紫外为了控制本品中水飞蓟素和水飞蓟宾的含量，分别采用紫外分光光度法和高效液相色谱法分别测定本品中水飞蓟素和水分光光度法和高效液相色谱法分
44、别测定本品中水飞蓟素和水飞蓟宾的含量。飞蓟宾的含量。 62v专属性专属性 ：拟比较对照品、溶剂、空白滴丸、原料、：拟比较对照品、溶剂、空白滴丸、原料、制剂色谱图，看专属性。制剂色谱图，看专属性。v线性和范围考察线性和范围考察：拟选择五种浓度对照品溶液进行：拟选择五种浓度对照品溶液进行测定。相关系数测定。相关系数R应为应为0.999以上。以上。v精密度考察精密度考察：拟进行对照品和样品的精密度考察，：拟进行对照品和样品的精密度考察，RSD不应超过不应超过2%水飞蓟宾水飞蓟宾HPLC含量测定设计含量测定设计63溶剂溶剂空白滴丸空白滴丸水飞蓟宾水飞蓟宾水飞蓟素水飞蓟素水飞蓟素滴丸水飞蓟素滴丸64专专
45、属属性性两个非对映体的混合物两个非对映体的混合物 No.No.进样量（量（gg）峰面峰面积1 10.08480.0848194.77194.772 20.16960.1696389.62389.623 30.25440.2544525.63525.634 40.4240.424938.15938.155 50.8480.8482007.472007.476 61.2721.2723002.783002.78回回归方程方程A=2391X-40.12A=2391X-40.12r=0.9996r=0.999665线性和范围线性和范围No.No.对照品溶液峰面照品溶液峰面积供供试品溶液峰面品溶液峰面积
46、1 1980.51980.511619.171619.172 2982.40982.401608.581608.583 3981.26981.261614.051614.054 4983.80983.801603.771603.775 5980.12980.121619.831619.83平均峰面平均峰面积981.62981.621613.081613.08RSDRSD0.15%0.15%0.43%0.43%66精密度设计精密度设计v稳定性稳定性：拟进行对照品和样品的精密度考察，：拟进行对照品和样品的精密度考察，RSD不应超过不应超过2%v重复性重复性：拟对样品重复制备五份进行测定。：拟对样品
47、重复制备五份进行测定。v回收率试验回收率试验v样品测定样品测定67测定定时间（h h）对照品溶液峰面照品溶液峰面积供供试品溶液峰面品溶液峰面积0 0944.51944.511639.171639.172 2952.40952.401608.581608.584 4951.26951.261614.051614.056 6983.80983.801603.771603.778 8980.12980.121629.831629.83平均峰面平均峰面积962.42962.421619.081619.08RSDRSD1.88%1.88%0.92%0.92%测定定时间（天）（天）对照品溶液峰面照品溶液峰
48、面积供供试品溶液峰面品溶液峰面积0 0980.12980.121629.831629.831 1979.43979.431663.561663.562 2982.19982.191677.451677.453 31000.191000.191654.951654.95平均峰面平均峰面积985.48985.481656.451656.45RSDRSD1.00%1.00%1.21%1.21%68稳稳定定性性设设计计No.No.取取样量（量（mgmg）峰面峰面积含量（）含量（）1 117.617.6469.08469.085.445.442 254.854.81450.681450.685.425.
49、423 358.258.21522.301522.305.355.354 465.065.01596.381596.385.315.315 563.963.91606.131606.135.445.44平均含量平均含量5.395.39RSDRSD1.09%1.09%69重复性设计重复性设计No.No.加入量加入量（gg）测得量得量（gg）回收率（回收率（% %）1 1339.2339.2337.5337.599.5099.502 2339.2339.2336.8336.899.2899.283 3678.4678.4674.8674.899.4799.474 4678.4678.4683.56
50、83.5100.75100.755 51017.61017.61019.01019.0100.14100.146 61017.61017.61027.51027.5100.97100.97平均回收率平均回收率100.02100.02RSDRSD0.72%0.72%70回收率设计回收率设计批号批号平均丸平均丸重重（mgmg）含量含量（mg/mg/丸）丸）04031040315 533.933.91.841.8404031040316 634.634.61.881.8804031040317 734.534.51.891.8971样品测定样品测定v制备三批样品，根据制订的质量标准草案对其进行，制备
51、三批样品，根据制订的质量标准草案对其进行，采用室温留样法，进行稳定性考察。考察项目包括采用室温留样法，进行稳定性考察。考察项目包括外观性状、鉴别、含量测定及卫生学检查等。外观性状、鉴别、含量测定及卫生学检查等。v将市售包装制剂，置于室温自然条件下，于将市售包装制剂，置于室温自然条件下，于0、1、2、3、6、12月，分别取样观察。月，分别取样观察。稳定性定性设计72制制剂稳定性定性试验报告告样品名称：水飞蓟素滴丸 批号：031201 生产日期：2003年12月1日 检验日期日期结果果项目目0月月2003.121月月2004.12月月2004.23月月2004.36月月2004.612月月2004
52、.12性状性状棕黄色圆形滴丸，棕黄色圆形滴丸，气微，味微气微，味微甜、苦甜、苦棕黄色圆形滴丸，棕黄色圆形滴丸，气微，味微甜、气微，味微甜、苦苦棕黄色圆形滴丸，棕黄色圆形滴丸，气微，味微甜、苦气微，味微甜、苦棕黄色圆形滴丸，棕黄色圆形滴丸，气微，味微甜、气微，味微甜、苦苦棕黄色圆形滴丸，棕黄色圆形滴丸，气微，味微甜、气微，味微甜、苦苦棕黄色圆形滴丸棕黄色圆形滴丸气微味微甜、苦气微味微甜、苦鉴别检出水出水飞蓟素和水素和水飞蓟宾检出水出水飞蓟素和素和水水飞蓟宾检出水出水飞蓟素和水素和水飞蓟宾检出水出水飞蓟素和素和水水飞蓟宾检出水出水飞蓟素和素和水水飞蓟宾检出水出水飞蓟素和素和水水飞蓟宾检查重量差异重
53、量差异限度限度符合符合规定定符合符合规定定符合符合规定定符合符合规定定符合符合规定定符合符合规定定溶出度溶出度87.2087.9086.5086.5886.7887.55含量含量测定定水水飞蓟素素含量含量5.08mg/丸丸5.11mg/丸丸5.12mg/丸丸5.09mg/丸丸5.11mg/丸丸5.12mg/丸丸水水飞蓟宾含量含量1.89mg/丸丸1.82mg/丸丸1.88mg/丸丸1.85mg/丸丸1.88mg/丸丸1.88mg/丸丸微生微生物限物限度度细菌数菌数10个个/g10个个/g10个个/g10个个/g霉菌数、霉菌数、酵母菌数酵母菌数10个个/g10个个/g10个个/g10个个/g大大
54、肠杆菌杆菌未未检出出未未检出出未未检出出未未检出出73v对小鼠四氯化碳急性肝损伤模型的保护作用对小鼠四氯化碳急性肝损伤模型的保护作用 选用体重约选用体重约18g23g的昆明种小鼠，随机分成的昆明种小鼠，随机分成7组，每组，每组组12只，分别为新剂型水飞蓟素滴丸高、低剂量组，原剂型只，分别为新剂型水飞蓟素滴丸高、低剂量组，原剂型益肝灵片高、低剂量组，空白对照组，四氯化碳组和联苯双益肝灵片高、低剂量组，空白对照组，四氯化碳组和联苯双酯组。每日口服给药一次，共给药四次，最后一次给药后酯组。每日口服给药一次，共给药四次，最后一次给药后1小时，给小鼠（空白对照组除外）腹腔注射小时，给小鼠（空白对照组除外
55、）腹腔注射0.2ml/20g 1%的的四氯化碳油溶液，四氯化碳油溶液，20小时后有眼底静脉丛（或摘眼球）取血，小时后有眼底静脉丛（或摘眼球）取血，分离血清，在自动生化分析仪上测定血清谷丙转氨酶分离血清，在自动生化分析仪上测定血清谷丙转氨酶SGPT含量。含量。（药效学研究依据及效学研究依据及设计）74 按新药研究要求进行新剂型与原剂型的试验比较。按新药研究要求进行新剂型与原剂型的试验比较。 急性毒性试验急性毒性试验 口服急性毒性试验：取体重约口服急性毒性试验：取体重约20g的小鼠的小鼠20只，雌雄各半，按规定剂只，雌雄各半，按规定剂量于上午量于上午8时分别给药新剂型，一次性灌胃，然后连续观察时分
56、别给药新剂型，一次性灌胃，然后连续观察7天。同时进天。同时进行原剂型试验。行原剂型试验。 腹腔注射急性毒性试验：取体重约腹腔注射急性毒性试验：取体重约20g的小鼠的小鼠140只，雌雄各半，随机只，雌雄各半，随机分成分成7组，按规定剂量给药于上午组，按规定剂量给药于上午8时一次性腹腔注射，然后连续观察时一次性腹腔注射，然后连续观察7天，记录逐日的小鼠毒性反应及死亡数，用天，记录逐日的小鼠毒性反应及死亡数，用Bliss法以法以NDST程序计算小程序计算小鼠的半数致死量。同时进行原剂型试验。鼠的半数致死量。同时进行原剂型试验。75（毒理学研究依据及（毒理学研究依据及设计） 长期毒性试验长期毒性试验
57、取体重约取体重约120g的的SD大鼠大鼠100只，雌雄各半，随机分只，雌雄各半，随机分5组，组，每组每组20只，分别为原剂型大剂量组、小剂量组，新剂型大剂只，分别为原剂型大剂量组、小剂量组，新剂型大剂量组、小剂量组，对照组。单笼饲养，投药前观察量组、小剂量组，对照组。单笼饲养，投药前观察2周，各周，各组动物活动、进食、粪便情况均无异常，然后开始给药，连组动物活动、进食、粪便情况均无异常，然后开始给药，连续续90天，每周称体重天，每周称体重1次，并观察动物活动、毛发、粪便情次，并观察动物活动、毛发、粪便情况，用药结束后，采血检查血常规肝肾功能，每组取况，用药结束后，采血检查血常规肝肾功能，每组取12只动只动物（其余动物继续饲养观察物（其余动物继续饲养观察2周）放血致死，取以下脏器作周）放血致死，取以下脏器作病理学检查：心、肝、脾、肺、肾、脑垂体、甲状腺、胃、病理学检查：心、肝、脾、肺、肾、脑垂体、甲状腺、胃、子宫、卵巢或睾丸共子宫、卵巢或睾丸共11种脏器组织。种脏器组织。76Xiexie !77
