胶体金法与ELIsA快检方法比较

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1、胶体金法与 ELISA法比较1Elisa方法1.1 ELISA方法简介ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相 载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体, 也通过反应而结合在固相载体上。 此时固相上的酶量与标本中受 检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相 关,故可根据呈色的深浅进行定

2、性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。1.2 elisa方法的原理iimijin;LiflAiiwiy1.3 elisa方法的特点(1)敏感性高,一般是胶体金产品的10倍的灵敏度。(2)特异性取决于抗原、抗体制备,特异性很高,假阳性、假阴性均比胶体金法低很多。(3)重复性高,一般批内小于5%批间小于10%(4)结果判断客观,并且是定量分析样品的浓度。胶体金法有主观因素。(5)在野外条件下用于大量标标本的检测可以。同样胶体金法也可以做到,而且更好些。(6)分 析自动化可以,有大型的自动酶免仪,包括加样、洗涤、显色、读数等一系列过程可以自动完

3、成。胶体金产品现在还很困难做到自动化。(7) 主要设备酶标仪;胶体金法无需任何设备,(8) 试验成本低,特别是检测大量样本时,明显降低单个的检测时间及成本。(9) 试剂稳定性在4C 一般可以保存一年。胶体金法试剂的稳定性更好。(10) 对人的危害性无或很少。(11 )应用范围小的诊断实验室。2.胶体金方法2.1简介免疫胶体金技术(Immune colloidal gold technique)是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的 免疫标记技术。胶体金是由氯金酸(HAuCI4 )在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,聚合成为特定大 小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定

4、的胶体状态,称为胶体金。胶体金在弱碱环境下带负电荷,可与蛋白质分 子的正电荷基团形成牢固的结合,由于这种结合是静电结合,所以不影响蛋白质的生物特性。胶体金层析抗原抗体反应在纤维素膜上,从而使标记胶体金的抗体在检测线、质控线上聚集,从而形成 可以被肉眼观察到的红色条带。2.2原理原理竞争法阴性结据样品中的杂质含测綾和控制线全部出现,说明样品中不竟争法阳性结來待测物或待测物半折原 样品中的杂质I癇蒙制统出现,说頤样品中含有2.3 主要特点:(1 )操作简便 无需或仅需极小的操作经验即可完成的。无需任何仪器。(2)检测时间短 通常加样后 5-10分钟可得到结果。(但食品安全检测时常需进行样品的前处理, 会花大量时间, 常常使这种优势变弱。)(3) 便携方便携带,现场检测。(4 )保存方便 通常在室温下可以稳定保存1 年以上。3胶体金法、酶联免疫法(ELISA )及其他蛋白标记物快速检测方法的比较。特征金银碳乳胶燃料酶重复性*kkkkkkkkk放大性*kkkrH步*kkk*敏感性*kkkkkkkkk多重分析检测*kkk*kkk稳定性*kkk*结果清晰*kkk*kkkkkkkkk使用简单*kkk*适应性*kkk低成本*kkk*kkkkkk*应用受限*适于部分检测*效果显著适于大部分检测

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