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1、本资料为共享资料 来自网络 如有相似概不负责【创新方案】高中生物 专题5 课题3 血红蛋白的提取和分离创新演练大冲关每课一练 新人教版选修1(时间：20分钟；满分50分)一、选择题(每小题4分，共32分)1用凝胶色谱法分离蛋白质时，相对分子质量大的蛋白质()A路程较长，移动速度较慢B路程较长，移动速度较快C路程较短，移动速度较慢D路程较短，移动速度较快解析：凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法，当相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程较长，移动速度较慢；而相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程
2、较短，移动速度较快。答案：D2凝胶色谱分离法分离蛋白质时，凝胶的种类较多，但其作用的共同点是()A改变蛋白质分子通过凝胶时的路径B吸附一部分蛋白质，从而影响蛋白质分子的移动速度C将酶或细胞固定在凝胶中D与蛋白质分子进行化学反应，从而影响其移动速度解析：凝胶的种类很多，但所有凝胶均是一些微小的多孔球体，小球内部有许多贯穿的通道，由于不同蛋白质相对分子质量不同，在凝胶中走过的路径不同，因而得以分离。答案：A3相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中的分离过程可表示为下图中哪一个()解析：根据分子筛效应可知，相对分子质量较大的蛋白质分子通过的路程较短，移动速度较快；相对分子质量较小的蛋白质分子通过的路程较长
3、，移动速度较慢。因此，样品中相对分子质量较大的蛋白质先流出，相对分子质量小的分子后流出。答案：B4血红蛋白的提取和分离一般分为四步，符合要求的是()A粗分离样品处理纯化纯度鉴定B粗分离纯化样品处理纯度鉴定C样品处理粗分离纯化纯度鉴定D纯化纯度鉴定粗分离样品处理解析：血红蛋白的提取和分离一般可分为四大步，包括样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。答案：C5样品的加入和洗脱的操作不正确的是()A加样前，打开色谱柱下端的流出口，使柱内凝胶面上的缓冲液缓慢下降到凝胶面的下面B加样后，打开下端出口，使样品渗入凝胶柱内C等样品完全进入凝胶层后，关闭下端出口D用吸管小心地将1 mL透析后的样品加到色谱柱的顶端，
4、不要破坏凝胶面解析：加样前，打开色谱柱下端的流出口，使柱内凝胶面上的缓冲液缓慢下降到与凝胶面平齐。答案：A6使用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳过程中，不同蛋白质的电泳迁移率完全取决于()A电荷的多少B分子的大小C肽链的多少 D分子形状的差异解析：由于SDS能与各种蛋白质形成蛋白质SDS复合物，SDS所带负电荷的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量，因而掩盖了不同蛋白质间的电荷差异，使电泳迁移率完全取决于分子的大小。答案：B7(2020广东高考)以下关于猪血红蛋白提纯的描述，不正确的是()A洗涤红细胞时，使用生理盐水可防止红细胞破裂B猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核，提纯时杂蛋白较少C血红蛋白的颜色可用
5、于凝胶色谱法分离过程的监测D在凝胶色谱法分离过程中，血红蛋白比分子量较小的杂蛋白移动慢解析：猪的成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核，提纯时杂蛋白较少，是提纯血红蛋白的理想材料。提纯血红蛋白分四步：红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液、透析，其中洗涤红细胞时，要用生理盐水反复洗涤，既要将红细胞洗涤干净，又要不破坏红细胞，然后再用蒸馏水和甲苯使红细胞破裂，血红蛋白是根据相对分子质量的大小来分离的，相对分子质量大的蛋白质移动速度较快。血红蛋白的颜色可用于观察红色区带的移动情况，据此判断分离效果答案：D8已知某样品中存在甲、乙、丙、丁、戊五种蛋白质分子，其分子大小、电荷的性质和数量情况如图所示，
6、下列有关蛋白质分离的叙述正确的是()A将样品装入透析袋中透析12 h，若分子乙保留在袋内， 则分子丙也保留在袋内B若用凝胶色谱柱分离样品中的蛋白质，则分子甲移动速度最快C若将样品以2 000 r/min的速度离心10 min，分子戊存在于沉淀中，则分子甲也存在于沉淀中D若用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离样品中的蛋白质分子，则分子甲和分子戊形成的电泳带相距最远解析：分子丙的相对分子质量大于分子乙，所以若分子乙保留在袋内，则丙也保留在袋内；甲相对分子质量最小，容易进入凝胶内部，则移动速度最慢；分子戊的相对分子质量大于甲，所以若分子戊存在于沉淀中，分子甲不一定存在于沉淀中；SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳过程
7、中，蛋白质的迁移速度完全取决于分子的大小，因此，分子甲与丙形成的电泳带相距最远。答案：A二、非选择题(共18分)9(18分)蛋白质分子中，氨基酸的氨基和羧基虽然大部分都能结合形成肽键，但是蛋白质分子内仍含有各种酸性基团和碱性基团，如肽链末端的氨基和羧基、天冬氨酸和谷氨酸残基中的羧基、赖氨酸和组氨酸残基中的各种碱性基团，所以蛋白质是两性电解质。在酸性溶液中，碱性基团的解离程度增大，使蛋白质带正电荷；在碱性溶液中，酸性基团的解离程度加强，使蛋白质带负电荷。当溶液到达某一pH时，蛋白质可因内部酸性或碱性基团的解离程度相等而呈等电状态，这时溶液的pH叫做蛋白质的等电点。不处于等电点状态的蛋白质分子的正
8、、负电荷量是不相同的。试回答下列问题。 (1)多数蛋白质的等电点近于5，一般含碱性基团较多的蛋白质的等电点_(“偏高”还是“偏低”)(2)根据等电点的不同，可用_方法将不同种类的蛋白质分子分开。(3)简述根据等电点分离不同种类的蛋白质分子的原理。_。(4)在血红蛋白提取和分离实验中，对分离得到的血红蛋白溶液要进行透析，除去相对分子质量较小的杂质蛋白质。请利用所给的实验材料对该透析实验进行验证。实验目的：验证透析的基本原理和操作。实验原理：_；_。实验材料：透析管或透析袋烧杯玻璃棒电磁搅拌器试管及试管架实验试剂：1 mL血红蛋白溶液300 mL的物质的量浓度为20 mmol/L的磷酸缓冲液(pH
9、为7.0)实验步骤：_；_。解析：含碱性基团较多的蛋白质溶液，在pH近于5时解离程度较大，蛋白质带正电荷。要使蛋白质内部酸性和碱性基团解离程度相等，呈等电状态，必须提高溶液的pH，使酸性基团解离程度增大，故蛋白质的等电点提高。根据等电点不同，可以利用电泳法将特定的蛋白质分离出来。 透析是应用半透膜的选择性，去除分子质量相对较小的杂质，从而达到对血红蛋白的粗分离。答案：(1)偏高(2)电泳(3)调节电泳槽中缓冲液的pH，使某种蛋白质处于等电点状态，而其他蛋白质带有电荷，在电场作用下，带有正、负电荷的蛋白质分别移向两极，而不带电荷的蛋白质留在原处。(4)实验原理：蛋白质是大分子物质，不能透过透析袋，而小分子物质可以自由透过在分离提纯蛋白质的过程中，常利用透析的方法使蛋白质与其中夹杂的小分子物质分开实验步骤：取1 mL的血红蛋白溶液装入透析袋中，将透析袋放入盛有300 mL的物质的量浓度为20 mmol/L的磷酸缓冲液的烧杯中不断更换烧杯中的缓冲液，并用电磁搅拌器不断搅动缓冲液，以加速透析过程，透析12 h
