《黄曲霉限量测定方法验证方案(HPLC)》由会员分享，可在线阅读，更多相关《黄曲霉限量测定方法验证方案(HPLC)（17页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、含量测定方法验证文件编码：MS TM 600110广东和翔制药有限公司2017年3月含量测定方法验证目录验证方案验证报告验证证书黄曲霉毒素含量测定方法验证方案起草、审核、批准表起草部门起草人签名日期质管部年 月曰审核部门审核人签名日期质管部年 月曰批准部门批准人签名日期质管部年 月曰验证方案验证方案目录1 验证原则和目的2 范围3 验证依据4 验证组织及职责5 验证时间6 验证前确认6.1 实施人员确认6.2 验证所需文件确认6.3 仪器设备确认6.4 色谱条件确认6.5 试剂试药确认6.6 溶液制备方法7 验证内容及过程7.1 准确度7.2 重复性8 验证中偏差/ 变更处理9 培训10 验证
2、报告的书写1验证原则和目的建立黄曲霉毒素含量限量测定的检验方法验证，在实验过程中严格按照标准 操作，确保新开发的检验方法、转移应用的检验方法有效实施，以验证该检验方 法是否适用于药材、饮片及制剂中的黄曲霉毒素含量测定。2 范围本验证方案适用于采用高效液相色谱仪应用光化学衍生法对黄曲霉毒素标样 进行测定的检验方法验证。3 验证依据中国药典2015 版四部通则中黄曲霉毒素测定法，中药质量标准分析方法 验证指导原则。药品生产质量管理规范（2010 年修订）4 验证组织及职责4.1 验证小组人员姓名部门职务验证分工质管部组长负责验证各项工作的安排。负责监督验证的实施过程。负责验证方案及验证报告的批准。
3、质管部组员负责验证方案及验证报告的申核。负责对验证中 出现的问题提出指导意见。质管部组员负责检验方法的验证方案起草与实施，对所测数 据准确性负责，负责起草验证报告。质管部组员负责汇总数据、整理验证报告。4.2 验证小组职责4.2.1 验证方案和报告的起草、审核、批准该验证方案由检验人员负责起草验证方案，验证方案经质管部等部门主管领 导进行审核，最终由质量经理批准。验证过程实施完成后，验证报告由验证方案起草人负责汇总，并经质管部等 部门主管领导进行审核，最终由质量经理批准。4.2.2 验证方案的培训验证方案起草人在验证方案经质量经理批准后及验证方案实施前，对本次验 证相关人员组织培训工作，由质管
4、部主管领导负责该次验证方案的培训工作，并 将该次的培训记录交至人力资源部归档。4.2.3 确认的组织实施和确认过程中的变更和偏差该次验证工作组织实施由质管部主管领导负责，质管部负责对验证过程中的 变更和偏差进行确认。5 验证时间2012年7月6 验证前确认6.1 实施人员确认姓名部门要求确认结果质管部需经过相关内容的培训。是口否口质管部需经过相关内容的培训。是口否口质管部经过充分的培训，熟悉咼效液相色谱仪的使 用方法及分析方法的操作步骤。是口否口质管部经过充分的培训，熟悉咼效液相色谱仪的使 用方法及分析方法的操作步骤。是口否口6.2 验证所需文件资料、应齐全。相关的文件草案应具备。文件名称文件
5、编码存放地点确认结果咼效液相色谱仪、 柱后衍生仪操作 及养护规程TS OP 206300质管中心有口无口6.3 仪器设备确认仪器名称型号要求确认结果咼效液相色谱仪LC1260已经过校验并在有效期内是口 否口电子分析天平已经过校验并在有效期内是口 否口超声波清洗机已经过校验并在有效期内是口 否口普瑞邦柱后衍生器已经过校验并在有效期内是口 否口玻璃仪器需彻底清洗并经检定， 一般玻璃仪器要保证 洁净。是口 否口TGL-15B高速台式离心机已经过校验并在有效期内是口否口泵流操作架、双孔超静音气 泵、宁波新芝高速分散器已经过校验并在有效期内是口 否口6.4 色谱条件确认项目要求确认结果色谱柱4.6 X
6、150mm symmetry C18 柱，5 口 m是口否口PriboFast 黄曲霉素总 量免疫亲合 柱是否在有效期内是口否口检测器荧光检测器是口否口检测波长激发波长=360nm （或365nm）,发射波长入 ex=450nm。是口否口进样量5ul、10ul、15ul、20ul、25ul是口否口流速0.8 ml/min是口否口柱温30 C是口否口流动相甲醇-乙腈-水（60： :30： 10）是口否口6.5 试剂试药确认内容要求确认结果试剂试药乙腈：色谱纯是口否口甲醇：色谱纯 水：1级纯化水对照品黄曲霉毒素（G2、B、B2）（中国药品生物制品检定所）是口否口供试品根据药典制备的黄曲霉毒素标样是
7、口否口6.5 溶液制备方法6.5.1 对照品溶液制备方法精密量取黄曲霉毒素混合对照品溶液（黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素B2、黄 曲霉毒素G1、黄曲霉毒素G2标示浓度分别为1.O 口 g/ml、0.3 口 g/ml、1.0 口 g/ml、 0.3 口 g/ml） 0.5ml,置10ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，作为贮备溶液。精密量 取贮备溶液1ml,置25ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，即得。7 验证内容及过程7.1 准确度7.1.1 验证合格标准校正曲线线性方程至少达到 0.999%7.1.2 操作步骤7.1.2.1 进对照品溶液五次，记录色谱图，计算相关系数。表1黄曲霉毒素G1进样情况进样次数1
8、2345保留时间进样体积进样量峰面积表 2 黄曲霉毒素 G2 进样情况进样次数12345保留时间进样体积进样量曲霉毒素b2的线性方程为,相关系数为,截距为，黄曲霉毒素B1的线性方程为，相关系数为,截距为,表明它的进样量与峰面积均呈线性关系。方法的线性和范围符合验证标准。7.2 重复性7.2.1 验证合格标准7.2.1.1 以主峰计算色谱柱理论塔板数不低于 1500。7.2.1.2 主峰 rsd 不大于 2.0%。7.2.1.3 主峰与最近杂质峰分离度不低于 1.5。7.2.2 操作步骤由同一个分析人员，在相同的条件下，对同一样品进行多次试验，按照规定的色谱条件进行测定，用5个测定结果进行评价。
9、7.2.3 验证结果及评价供试品峰拖尾因子,理论塔板数,各个组分峰之间的分离度均大于1.5，重复进样的保留时间RSD为。方法的系统适用性试验符合标准。黄曲霉:测定次数12保留时间平均值RSD%理论塔板数平均值RSD%分离度平均值RSD%黄曲霉:测定次数12保留时间平均值RSD%理论塔板数平均值RSD%分离度平均值RSD%黄曲霉测定次数12毒素G2345毒素G1345毒素B2345保留时间平均值RSD%理论塔板数平均值RSD%分离度平均值RSD%黄曲霉毒素B1测定次数12345保留时间平均值RSD%理论塔板数平均值RSD%分离度平均值RSD%8 验证中偏差/变更处理验证过程中如果出现偏差和变更，应立即通知验证小组并对偏差和变更进行 详细记录，分析偏差产生的根本原因、进行影响分析并提出解决方法。所有偏差 和变更得到有效处理后，并且已被质管部批准，验证方可进入下一步骤。原始的偏差处理处理单和变更处理单经过批准后必须附在最终的验证报告 中。9 培训验证方案起草人有责任在验证方案批准后对本次验证相关人员进行培训。该培训记录连同在验证中完成的其他相关培训记录一起交给人力资源部归档。10 验证过程及验证报告的书写验证结束后，根据试验数据资料进行综合分析，对检验方法作出正确的评价说明及结论，并写出验证报告，确定合理的验证周期。
