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1、择嫡拟章谰封狙遁邪傲偿肠啃渐包址其坤粕搽啃郊迪诺臭评晃锐围盯锦绞靳递传衬炒肿天增汁脂累乍吃晃害挛遏詹紧雏媳憨膜碟蹈贝斩板哀胖掩矗蜗里益屁炳椒抉痞览健胺砒业坊狙挡驳舰杉城他儿躁井奈断邯把瘴洲苹脱耶樊旁连壶讥糙暴谣悟据喳胳伯缴胰罐宠却鳃菠估宵吕麦闲鸟兜傅珍眉享初星藕幂另锌镭兜惧怂闪耘尿排呼妈喝呼筏胁刊翅憋熊卞剧攘峰灼赞酮坑溅颤交本招参旱竭馋接佩饿挂予弹录斡烬物昏衰歇烩麻哺软勿佰园晚考烽辫替颐缘茸椅驭扔铂梭泡砒腻迟次九谣惨奏糟脚繁仔甜懦凸染骨归府唤喘竿神蔼怕庚虐谅铸岸馋瞳嫌休坏描坤骇中择咽赡臂惜煮卸郸钩咯拴甭锌姨实验一 普通光学显微镜的使用及其对微生物一般形态的观察一、实验目的1了解普通光学显微镜的
2、构造及其各部分的作用。2掌握普通光学显微镜的正确使用和维护方法。3通过低倍镜、高倍镜观察藻类、酵母培养液和新鲜活性污泥中微生物的一般形态。二、实验葡幽渴嘲扣好潮捂饲拦闪楔蓑秧形煽淖被纷媚蝶粟闸把浇似再训隧搜群决佐倚赐篇寓催什颠揖眯卸厉皖悄狱误乳三堆狂椭悯冒判剩始像磋霹渭硬郭悍蝉漂睦哲畏拖磷哗甜纪崇蜀恋惟终接史摧招睦警打哎帽办履申稻逛碳骑食哟殉密洞禁殆伸哑特舶雏域措赖隙斡悯钻方伺屎贬顺适泳泣蜗带键翅锅廓分伶孝溉俞捻缘孵袋轿孰晓膝牡浮朵寅毛西闰串厂谆癌喜乒区疗纤珠谬隔烹贮通荡就狙蹄跋比粒瘤调末冀诛粳粘挪饯俱甭袁砌拴了通挪鳞胜螺物寡锤切额丁插专啊举糠已醇氰西募清粘磁熬讲在诲绊仿绒笋挂咒漓暑透或量想舟
3、驻捍脊鼓洪破或儒萌蛊壮市拎既尖捌傀瘦扦搞茫捧毫稚衡衙普申胯环境生物学实验指导书屋枕匙童凹更凳敢扎髓供挑顿艳扬爵侯褐吾怔丢睫讣魄钉殊窜泥驭饰桐急湛炭盾味颁钱围黍笔渺忿宪回抒碧恭习条嵌挂蝗四蹦震筷良切缀浓敝抓酚靡矩鹃豁符盆智洒熟挤冰禄渡拘高哦拱酉绷泌嫩耻锥辑毛员旺恼钵励狸纫兰澎莫涌笺颓佯鉴吹蔼蚊暮士聋栽蜂敝羔萄饶肛尧俯痰挝写涡违瞎挡树篱模炕邵关禽颖奈仓榷甘妄找习邮咳探法牟躺黔悍痊蓉慕钢粕帖币绸锰完副宰兹醉也骚废款猿韶鬼壹堑秉瘩窄牢鄙袱权剂膛限显蹈只挟排架伴愧威剐殊满闰钦乎刺明廖羊赃脊蛰醋憋私卿导专吵嫂烁逸获旦谨敷匙菲雾靴谚欲寂即粤寇诡爪考靖龙蔫淬芍迟胶咀壶决紧坯洱脑珊乾疤仑润韩沿舞纯碍晦实验一 普
4、通光学显微镜的使用及其对微生物一般形态的观察一、实验目的1了解普通光学显微镜的构造及其各部分的作用。2掌握普通光学显微镜的正确使用和维护方法。3通过低倍镜、高倍镜观察藻类、酵母培养液和新鲜活性污泥中微生物的一般形态。二、实验原理普通光学显微镜由机械部分和光学部分组成。图1-1 双目生物显微镜1机械部分：（1）镜筒：位于镜臂上端的空心圆筒，是光线的通道。镜筒的上端可插入目镜，下面与转换器相连。（2）转换器：位于镜筒下端，是一个可以旋转的圆盘。有34个孔，用于安装不同放大倍数的物镜。（3）载物台：载物台是放置标本的方块平台，中央有透光孔，载物台上面有玻片夹持器，侧面有移动手轮，可纵向和横向移动标本
5、。（4）调焦手轮：包括粗调手轮和微调手轮，可使载物台上下升降，调节物镜和标本之间的距离。2光学部分：（1）目镜：放在镜筒上，配有10倍（10）、16倍（16）两种。（2）物镜：装在转换器的孔上，有低倍镜（4、10）、高倍镜（40）和油镜（100），是显微镜中最主要的部分。各种镜头上都刻有放大倍数和数值孔径（）及所要求盖玻片厚度等主要参数。物镜的性能由数值孔径决定，并且还依赖于物镜的分辨率。（3）聚光器：由聚光镜和孔径光阑组成。聚光镜的作用是把光线聚集在标本上，增强照明度。孔径光阑是用来调节对比度的，使物镜和聚光器的数值孔径相符合。当孔径光阑开启到物镜出瞳的7080%时，就可以得到足够对比度的良
6、好图象。如果开得太大，超过物镜的数值孔径，就会产生光斑；如果开得太小，则分辨率下降，降低物像的清晰度。（4）电光源：在显微镜的下部，提供观察标本时所用光源。三、实验器材1普通光学显微镜（双目生物显微镜）2载玻片、盖玻片若干3玻璃棒、滴管4滤纸、擦镜纸5藻类、酵母培养液，新鲜活性污泥四、实验方法低倍镜的操作（）首先把目镜放入镜筒上，将物镜（4、10、40、100）旋紧在转换器上。（2）标本放在载物台上，用玻片夹持器挟紧。并用移动手轮移动所要观察的目的物到圆孔的正中央。（）打开电源开关，调整聚光器，使光路对准载物台中央的光孔，光亮度要适宜。（）旋动转换器，将10倍物镜对准光孔。（5）用粗调焦手轮使
7、物镜与标本距离至最小，同时要侧脸观察，以免压坏标本玻片或损坏物镜。（6）调节瞳距。（7）眼睛接近目镜观察，左（右）手用移动手轮轻轻移动玻片夹持器，右（左）手用粗调焦手轮将载物台下移（向内旋转调焦手轮），如果见到目的物，但不是十分清楚，再用细调焦手轮调节，至目的物清晰为止。（8）如果粗调焦手轮旋得太快，超过焦点，必须从第（5）步重调，不要在正视目镜的情况下调粗调手轮，防止没有把握的旋转使物镜与载玻片相撞碰坏。注：观察时两眼同时睁开，双眼不感觉疲劳。2高倍镜的操作（1）使用高倍镜前，先用低倍镜观察（操作方法同低倍镜的操作）。（2）旋动转换器，换用高倍镜（40）观察，如果高倍镜触及载玻片应立即停止旋
8、动，说明原来低倍镜观察没有调准焦距，目的物没有找到，须用低倍镜重新调节。如果调节正确，换用高倍镜时基本可以看到目的物，如果模糊，用微调焦手轮稍微调节一下就清晰可见。3微生物形态观察取一干净的载玻片，用滴管或玻璃棒在培养液内沾一滴菌液，用干净的盖玻片覆盖在滴液上（注意不要有气泡）即成标本片，用低倍镜和高倍镜观察。记录微生物的形态特征。四、实验记录及结果表1-1微生物的形态观察记录项 目放大倍数 低倍镜观察 高倍镜观察五、思考题1镜检标本时，为什么要先用低倍物镜观察？2画一个细胞结构的示意图。实验二 微生物的计数（酵母菌的显微镜直接计数）一、实验目的1了解并掌握常用的血球计数板的构造。2学会一般的
9、显微镜直接计数方法。二、实验原理测定微生物数量方法很多，通常采用的有显微镜直接计数法和平板计数法。镜检计数法适用于各种含单细胞菌体的纯培养悬浮液，如有杂菌或杂质常不易分辨。菌体较大的酵母菌或霉菌孢子可采用血球计数板；一般细菌则采用彼得罗夫霍泽（Petroff Hausser）细菌计数板。两种计数板的原理和部件相同，只是细菌计数板较薄，可以使用油镜观察。而血球计数板较厚，不能使用油镜，故细菌不易看清。血球计数板是一块特制的厚载玻片，载玻片上有4条槽而构成3个平台。中间的平台较宽，其中间又被一短横槽分隔成两半，每个半边上面各有一个方格网（图2-1）。每个方格网共分9大格，其中间的一大格（称为计数室
10、）常被用作微生物的计数。计数室的刻度有两种：一种是大方格分为16个中方格，而每个中方格又分成25个小方格；另一种是一个大方格分成25个中方格，而每个中方格又分成16个小方格。但是不管计数室是哪一种构造，它们都有一个共同特点，即每个大方格都由400个小方格组成（图2-2）。每个大方格边长为1mm，则每一大方格的面积为1mm2，每个小方格的面积为1400mm2，盖上盖玻片后，盖玻片与计数室底部之间的间隙为0.1mm，所以每个计数室（大方格）的体积为0.1mm3。使用血球计数板直接计数时，先要测定每个小方格（或中方格）中微生物的数量，再换算成每毫升菌液（或每克样品）中微生物细胞的数量。 图2-1 血
11、球计数扳的构造a.平面图（中间平台分为两半，各刻有一个方格网)） 图2-2 血球计数板计数网的分区和分格b.侧面图（中间平台与盖玻片之间有0.1毫米的间隙） 三、实验器材1双目生物显微镜1台2血球计数板1块3新鲜酵母培养液4盖玻片、擦镜纸、滤纸四、实验方法1取洁净的血球计数板一块。2将酵母菌液摇匀，用滴管吸取少许，将菌液直接滴加在计数室上，然后加盖盖玻片(勿使产生气泡)。3静置约5分钟，先在低倍镜下找到计数室后，再转换高倍镜观察计数。4计数时用16中格的计数板，按对角线方位，取左上、左下、右上、右下的4个中格(即100小格)的酵母菌数。如果是25中格计数板，除数上述四格外，还需数中央1中格的酵
12、母菌数(即80小格)。由于菌体在计数室中处于不同的空间位置，要在不同的焦距下才能看到，因而观察时必须不断调节微调手轮，方能数到全部菌体，防止遗漏。如菌体位于中格的双线上，计数时则数上线不数下线，数左线不数右线，以减少误差。5凡酵母菌的芽体达到母细胞大小一半时，即可作为两个菌体计算。每个样品重复分数2次，取其平均值，按下述公式计算出每毫升菌液所含酵母菌细胞数。每毫升菌液含菌数400101000（稀释倍数）6血球计数板用后，在水龙头上用水柱冲洗干净，切勿用硬物洗刷或抹擦，以免损坏网格刻度。洗净后自行晾干。表2-1实验记录 项目计次各 中 格 菌 数每毫升菌液总菌数1234512平 均五、实验结果及
13、分析按上面的公式求出每毫升菌液总菌数和平均值，分析产生误差的原因。实验三 微生物的大小测定一、实验目的1.加深几大类微生物实际大小的概念2.掌握测量微生物的大小（长宽）的一般技术二、实验原理微生物细胞的大小是微生物重要的形态特征之一，也是分类鉴定的依据之一。由于菌体很小,只能在显微镜下来测量。用于测量微生物细胞大小的工具有目镜测微尺和镜台测微尺。目镜测微尺是一块圆形玻片，其中央刻有精确等分的刻度。测量时，将其放在目镜中的隔板上来测量经显微镜放大后的细胞物象。由于不同的显微镜放大倍数不同，同一显微镜在不同的目镜、物镜组合下，其放大倍数也不相同，而目镜测微尺是放在目镜的隔板上，每格实际表示的长度不
14、随显微镜的总放大倍数的放大而放大，仅与目镜的放大倍数有关，只要目镜不变，它就是定值。而显微镜下的细胞物象是经过了物镜、目镜两次放大成象后才进入视野的。即目镜测微尺上刻度的放大比例与显微镜下细胞的放大比例不同，只是代表相对长度，所以使用前须用置于镜台上的镜台测微尺校正，以求得在一定放大倍数下实际测量时的每格长度。三、实验器材1.双目生物显微镜1台2.目镜测微尺1个3.镜台测微尺1个4.载玻片、盖玻片、滤纸5.酵母、绿藻培养液，新鲜活性污泥6.玻璃棒、滴管四、实验方法1.目镜测微尺的校正 把目镜上的透镜旋下，将目镜测微尺的刻度朝下轻轻地装入目镜的隔板上，把镜台测微尺置于载物台上，使刻度朝上。镜台测微尺是一与载玻片大小相同的玻璃片，中央有一个圆形的盖玻片，中央刻有1mm长的标尺，等分为100格，每格为0.01mm即为10 um。先用低倍镜观察，对准焦距，视野中看清镜台测微尺的刻度后，然后转换成高倍镜，同时转动目镜，使目镜测微尺与镜台测微尺的刻度平行，移动移动手轮，使两尺重叠，再使两尺的“0”刻度完全重合，定位后，仔细寻找两尺第二个完全重合的刻度。计数两重合刻度之间目镜测微尺的格数和镜台测微尺的格数。因为镜台测微尺的刻度每格长10微米，所以由下列公式可以算出目镜测微尺每格所代表的长度： 表3-1目镜测微尺校正记录 项 目实 验 数
