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1、临床标本细菌培养鉴定常见的个疑问作者:日期:问题1:如何正确应用药物敏感结果？正确运用药敏试验结果应考虑以下3个方面：首先要确定病原菌，如未找到真正的致病菌，药敏实验不但不能指导用药甚至可能误导临床；重视耐药监测,这是经验用药的一个重要的参考；考虑到药敏试验的局限性：体外报告敏感的药物体内治疗不一定有效，而体外报告耐药的药物体内治疗不一定无效。问题2:是否MIC越低的药物越好？不一定。因为不同药物对同种细菌，同一药物对不同细菌的折点均可不同，并且若细菌产生某些特殊耐药机制时，即使体外敏感也应报耐药，另外尚需考虑药动学和耐受性。因此，不能单纯比较MIC值而认为MIC越低的药物就一定越好。MIC只
2、表示一种药物对某一株细菌抗菌作用的强弱,MIC越低（离中介值越远）说明该药物对相应的病原菌的作用越强。只能比较同一种药对同一株菌、若MIC值升高，可认为其耐药性提高。问题3:是否所有报告的细菌均为病原菌？不一定。原因如下：所报告细菌为污染菌或定植菌，细菌培养结果的临床意义大小与所取标本有关。如为血液等无菌标本则临床意义较大，但即使血培养阳性也可能为污染菌。某些标本易受污染如痰标本易于受咽喉部携带菌的污染，尿培养易受下尿道、尿道口寄居菌污染。可能为应用抗菌药后的菌群交替或菌群失调。特别是原为复数菌感染时，针对优势菌治疗一段时间后可能非优势上升为优势菌，或广谱抗菌药治疗后可能出现真菌感染。有2种以
3、上病原菌时因生长速度不同、营养要求不同，培养结果不能真实反映病原菌的种类、数量。问题4:为什么有时痰涂片结果与痰培养结果不一致？由于痰标本进行培养和涂片时选取的部位不一致；某些快生长菌所占比例并不多，但由于生长速度快、营养要求低，能在培养过程中迅速变为优势菌而掩盖其他菌的生长；标本从采集到接种的时间过长，造成部分苛养菌死亡，在涂片中看到的只是菌的残骸而非活菌。问题5:我们想用的药物在药敏试验中没有做？1 .天然耐药2 .可能是药物的敏感性被其他药物所预报问题6:为什么有的菌报告很多种药物，有的仅报告几种药物？报告的药物种类根据细菌种类的不同而有所不同、如铜绿假单胞菌报告的药物较多，而嗜麦芽窄食
4、单胞菌报告的药敏较少。问题7:是否能将所用的药都做药敏试验？1 .没有必要:通过耐药机制和标志性药物可以预测其他抗菌药物的敏感性2 .没有可能：不是所用药物都可以做药敏试验（需要药物在体外稳定，需要有操作标准和解释标准）问题8:选择药敏报告敏感的药物，为什么临床治疗无效？体外药敏试验只能预测体内治疗效果，并不等同；一般来说，耐药=治疗无效；敏感丰治疗有效；可能不是真正的致病菌（污染或定植菌）；细菌本身因素（如诱导耐药，生物被膜）;感染部位与药代动力学因素；细菌的MIC,给药剂量和用药方式；敏试验药物中有些药物单独使用无效，但可以与其他药物联合用药；药物剂型及生物利用度（纯品、商品）。问题9:涂
5、片镜检结果与培养结果不吻合？涂片镜检是报告所有检见的细菌，而培养的目的是检出致病菌，因此会产生涂片和培养结果不一致的情况；一些苛氧菌需在特殊的环境或培养基上才能生长，因此可能在培养后才能得到。问题10:取的明显就是脓液标本，为何鉴定报告为无菌生长？我们做的是有氧培养，脓液可能为厌氧菌感染。可能细菌被大量的中性粒细胞吞噬。问题11:鉴定结果明明写着四联球菌、革兰氏阳性杆菌，为何没有药敏结果？四联球菌为微球菌，一般不引起人体致病，为非致病菌，故考虑污染可能；药敏结果参照CLSI标准，目前革兰氏阳性杆菌没有参照标准，故暂不能做药敏试验，若需治疗可参照阳性球菌用药。问题12:一般培养不是三天出结果吗，
6、今天第四天了怎么还没出来？一般培养经48小时后，即第三天出报告，若需分离致病菌的则第四天出报细菌生长慢，生长需要适宜的条件。细菌一般以二分裂法进行无性繁殖，在适宜条件下，多数细菌分裂一次需要2030分钟，结核分枝杆菌需18-20小时才分裂一次。对数期（鉴定、药敏常用该期的培养物）一般在培养后8-18小时。普通细菌培养一般需48小时（培养需12-24小时，鉴定药敏需要12-24小时）；酵母样真菌阳性报告需要2-3天，阴性报告需5天；丝状真菌（霉菌）阴性报告需2-4周；血培养阳性报告需3天以上，阴性报告需5-7天。问题13:今天的培养结果怎么与前天的不一样？取材是否规范。痰标本，有时选优势菌做，就可能导致两次不一样。抗生素的使用问题14:明显稀便，培养结果为何正常？大便普通培养，通常只能鉴定志贺菌、沙门菌感染，致病性大肠杆菌怀疑霍乱时，需开霍乱弧菌培养；可能病毒感染（轮状病毒）。问题15:为什么阳性率太低，临床符合率差？不合格的标本直接导致病原菌分离率降低。操作程序不规范，未进行直接涂片，未严格执行拒收制度等也是重要原因。微生物和人体关系复杂。致病和条件致病，定植和感染等，导致细菌室判断病原菌困难，要证明培养结果与感染相关性是临床微生物检验所面临的难题。已使用抗菌药，病原菌受到伤害，不能正常生长。实验室条件有限，苛养菌漏检，常规培养不能检测厌氧菌、结核杆菌、衣原体、支原体、病毒等.
