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1、精品资料，欢迎大家下载！Forpersonaluseonlyinstudyandresearch;notforcommercialuseForpersonaluseonlyinstudyandresearch;notforcommercialuse一、主题内容与适用范围本标准适用于所有de动植物油脂和脂肪酸.二、目de油脂及脂肪酸(特别是12碳以上de长碳链脂肪酸)一般不直接进行气相色谱分析,其原因是脂肪酸脂肪酸及油脂de沸点高,高温下不稳定,易裂解,分析中易造成损失.因此,对脂肪酸及油脂de脂肪酸组分分析时,先将脂肪酸或油脂与甲醇反映,制备脂肪酸甲酯,降低沸点,提升稳定性,然后进行气相色谱分
2、析.三、BF3甲酯化法1、仪器(1) 50ml及100ml磨口圆底烧瓶(2) 回流冷凝器(长度2030cm,有磨口连接,与烧瓶配套)(3) 250ml分液漏斗(4) 滴管(5) 带磨口玻璃塞de试管(6) 10ml移液管沸石2、试剂(1) 正庚烷,色谱纯(2) 轻汽油(沸程4060C)(3) 无水硫酸钠,分析纯(4) 0.5Mde氢氧化钠甲醇溶液(不用标定),配制如下：称取2gNaOH溶丁100ml甲醇中(甲醇de含水量不得超过0.5%),该溶液放置一段时间后会出现白色沉淀,这不影响脂肪酸甲酯化制备.(5) 1225%(m/m)BF3de甲酯溶液；(6) 饱和deNaCl水溶液(7) 甲基红指
3、示剂：用60%de乙醇配置0.1%de甲基红溶液氮气：含氧量低丁5mg/kg3、操作方法,(1) 取大约350mg油样参加50ml烧杯中,移取6ml0.5MdeNaOH丁油样中,并参加几粒沸石,连接回流装置,开始加热回流,回流过程中要不断摇动烧瓶.(2) 当烧瓶内de油珠消失,溶液变得透明时(大约需要510分钟),从冷凝器上端加7mlBF3甲醇溶液丁烧杯内(用移液管移取),然后继续回流1分钟.(3) 然后从冷凝管上端参加25ml正庚烷后,再回流1分钟.(4) 撤离火源,取出烧瓶,向烧瓶中参加一定量de饱和NaCl溶液,轻轻上下颠倒数次后,静置分层.(5) 从烧杯内de上层溶液中取出约1ml转移
4、到磨口试管中,并参加适量de无水硫酸钠,以去除痕量de水分,得到de此甲酯化样品以备气相色谱分析用.4、注解;BF3有蠹,因此该试验应在通风厨中进行,同时,用后de所有玻璃仪器应立即活洗；(1) 如果待测脂肪酸或构成油脂de脂肪酸含有2个以上de双键,建议反响de烧杯中先充氮处理；(2) 假设样品为纯脂肪酸,那么试验可省去皂化,直接取一定量de脂肪酸,参加适量deBF3甲醇溶液,煮沸2分钟,然后同上方法de3、4、5、6步骤操作；(3) BF3甲醇溶液货架期短,一般现配现用,或者置于冰箱中储藏,否那么会使GLC中分析中出现怪峰,甚至造成多不饱和酸de损失；(4) BF3甲酯化法适用于AV2de
5、油脂或脂肪酸；(5) 假设待测脂肪酸中不含有二十碳及二十碳以上de成分,那么可用正己烷代替正庚烷；(6) 应尽可能快de分析这些已甲酯化de样品,否那么应将他们保存在充氮气带磨塞de瓶内,可在2C下存放24小时.四、碱式甲酯化一一适用于AV2de油脂1、仪器(1) 100ml磨口锥形或圆底烧瓶(2) 与烧瓶配套de回流冷凝器(3) 50ml锥形瓶(4) 150ml或250mlde分液漏斗(5) 电热磁力搅拌器沸石2、试剂；(1) 正庚烷,色谱纯(2) 甲醇(含水量不得超过0.5%)(3) 无水硫酸钠,分析纯)(4) 1MdeKOH甲醇溶液(不用标定),配制如下：称取5.6gKOH容于100ml
6、甲醇中.氮气：含氧量低于5mg/kg3、操作方法：(1) 取约4g油样于圆底或锥形烧瓶中；(2) 称取40ml甲醇及0.5ml1MKOH甲醇溶液于油样中,并参加几粒沸石,连接回流装置,开始加热回流,回流过程中要不断摇动烧杯,直至溶液澄活透明为止(大约需510分钟);(3) 撤离热源,取出烧瓶,并在冷水中冷却；(4) 将烧瓶de内容物转移到分液漏斗中,并用20ml正庚烷洗涤烧瓶,将此洗涤液一并转移到分液漏斗中,并向分液漏斗中参加40ml蒸僻水,摇动,静置分层,上层为酯层,下层为水层,下层溶液用20ml正庚烷萃取,萃取de上层溶液与酯层合并,得到de脂肪酸酯de正庚烷溶液再用蒸僻水进行屡次洗涤直至
7、废水呈中性为止,别离出酯层；得到de酯层溶液用无水硫酸钠十燥后,过滤蒸发,得到约20mlde脂肪酸甲酯de正庚烷溶液,以备分析用4、注解(1) 所取油样不必局限为10mg,液可以取样量少一点；(2) 所制备出来de脂肪酸甲酯液,假设不马上进行GLC分析,可充N2放入冰箱保存,也可参加一定量de抗氧化剂低温保存；(3) 假设进行红外色谱分析时,必须将溶液完全去除；但是在去除溶剂时不能将操作步骤拖de太长,也不能将氮气吹de太猛,否那么会造成某些易挥发酯类de损失.五、酸催化甲酯化一一适用于AV2de油脂或脂肪酸1、仪器(1) 250ml磨口锥形或圆底烧瓶(2) 与烧瓶配套de回流冷凝器(3) 5
8、0ml锥形瓶(4) 150ml或250mlde分液漏斗！(5) 电热磁力搅拌器沸石72、试剂(1) 正庚烷,色谱纯(2) 无水硫酸钠,分析纯(3) 甲醇钠溶液(不用标定),配制如下：称取1gNaOH溶于100ml甲醇中(甲醇de含水量不得超过0.5%)(4) 甲基红指示剂：用60%de乙醇配置0.1%de甲基红溶液(5) 氮气：含氧量低于5mg/kg1MHCl甲醇溶液(无水,不需标定)3、操作方法(1) 取约4g油样于烧杯中；移取40ml甲醇钠溶液于烧瓶中,并参加几粒沸石,连接回流装置,开始加热回流,回流过程中要不断摇动烧瓶,直至溶液澄活透明为止(大约需要1015分钟),在参加50ml1M得H
9、Cl甲醇溶液于烧瓶中,再煮沸10分钟；(2) 撤离热源,取出烧瓶,并在冷水中冷却烧瓶；(3) 于烧瓶中参加100ml蒸僻水,然后将烧瓶内de内容物转移到分液漏斗中,并参加30ml正庚烷后,剧烈摇动分液漏斗,静置分层,将放出de下层溶液用30ml正庚烷萃取,萃取de上层溶液倒回分液漏斗中,用蒸僻水对分液漏斗内de脂肪酸酯de正庚烷溶液进行屡次洗涤,直至废水层呈中性为止；(4) 得到de酯层溶液用无水硫酸钠十燥后,过滤,蒸发得到约20mlde脂肪酸甲酯de正庚烷溶液,以备分析用.4、注解(1) 假设待分析样为脂肪酸时,那么可直接取约4g脂肪酸,参加50mlHCl甲醇溶液及沸石,加热回流10分钟,其
10、余同3、4、5.(2) 假设脂肪酸含有2个以上de双键,那么可通氮气处理；(3) 也可用0.5MdeH2SO4甲醇溶液做催化剂.六、简易碱法甲酯化(一)1、仪器(1) 10ml带塞磨口试管；(2) 5ml移液管(最小刻度0.1ml);(3) 0.2ml移液管；小型离心机2、试剂(1) 正己烷,色谱纯；0.5Mde甲醇钠(不需标定)：1.15g钠溶于100ml甲醇中(甲醇de含水量不得超过0.5%)；无水硫酸钠3、操作方法20mg左右得油样溶于2.5ml得正己烷中(试管中),参加0.1ml得0.5M甲醇钠溶液,室温下轻摇5分钟,然后参加少量无水硫酸钠,静置1小时后于20003000rpm下离心2
11、3分钟,上层活液可用于GLC分析.4、注解(1) 油样量不必准确称取；(2) 本试验也可省略离心别离一步,放置1小时后,直接取上层活液,进行GLC分析即可；(3) 本方法不适用于含特殊脂肪酸de油脂,同时不适用于脂肪酸de甲酯化,适用于含杂少,酸价低de油脂.七、简易甲酯化法(二)1、BF3叩醇快速甲酯化法：称取150mg油样移入50ml容量瓶中,参加0.5mol/Lde氢氧化钠甲醇溶液4ml使之溶解,待溶液呈透明状后,置水浴上沸腾5min,油脂根本上溶化,冷却后,参加5mlBFA甲醇溶液,再置于水浴上沸腾2min,参加足量饱和氯化钠溶液,上层有黄色液体,加1ml石油酰,振荡,静置,取上层溶液
12、进行色谱分析.2、室温下脂肪酸快速甲酯化法：称取100mg油样,置于具塞试管中,参加12ml石油酰(3060C)与苯(1+1)混合液,振摇使油脂溶解后,参加12ml0.4MdeKOH甲醇溶液,混匀后在室温下静置510分钟,参加12ml水,振摇,静置,取上层活液,即可进行色谱分析.油料样品同样液可以用此法直接进行甲酯化,但是样品量要多些,250500mg,将样品用乳钵粉碎后,即可按上述步骤操作.【备注】BF3溶液de制备：40g市售三氟化硼乙酰复合物BF3-O(C2H5)刎100g无水甲醇混合而成.以上资料仅供参考，如有侵权，留言第一时间删除！仅供个人用于学习、研究；不得用于商业用途Forper
13、sonaluseonlyinstudyandresearch;notforcommercialuse.Nurfurdenpers?nlichenfurStudien,Forschung,zukommerziellenZweckenverwendetwerden.Pourletudeetlarechercheuniquementddesfinspersonnelles;pasddesfinscommerciales.toJieko只de只ekqTop岛i金noE3双kjith&yheji,eaowahh页ojijkhbiHCnOJIb3OBaTECflBKOMMepHeCKHX以下无正文仅供个人
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