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1、高三生物一轮复习导学提纲（34）选修三：基因工程班级 学号 姓名学习目标:1.简述基因工程的原理。（A）2.说出基因工程的基本工具及其作用、特点。（A）知识结构：I顷!限制性内切酶 DNA连接酶载体 自主预习：1. 基因工程的设计施工是在什么水平上进行的A.细胞B.细胞器2. 以下有关基因工程的叙述，正确的是A.基因工程是细胞水平上的生物工程C.基因工程产生的变异属于人工诱变3. 在基因工程中用来修饰改造基因的工具是A.限制酶和连接酶 B.限制酶和水解酶C.原子D.分子B.基因工程的产物对人类都是有益的D.基因工程育种的优点之一是目的性强C.限制酶和运载酶D.连接酶和运载酶4. 下列四条DNA
2、片段，可以是由同一种限制性核酸内切酶切割而成的是A.B.C.D.5. 两个核酸片段在适宜条件下A. DNA连接酶B. EcoRI酶C. DNA聚合酶D. 限制酶TAGGGGTACCTATACC 经X酶的作用，发生了如下变化，则X酶是b,6. 依右图有关工具酶功能的叙述，不正确的是A.切断a处的酶为限制性内切酶C.切断b处的酶为解旋酶7. DNA连接酶的主要功能是:B.连接a处的酶为DNA连接酶D.连接b处的酶为RNA聚合酶A. DNA复制时母链与子链之间形成的氢键B.粘性末端碱基之间形成氢键C.将两条DNA末端之间的缝隙连接起来 D.将碱基、脱氧核糖、磷酸之间的键连接起来8. 基因工程技术也称
3、DNA重组技术，其实施必需具备四个必要的条件是A. 工具酶、目的基因、运载体、受体细胞B. 重组DNA、RNA聚合酶、内切酶、连接酶C. 模板DNA、信使RNA、质粒、受体细胞。.目的基因、限制性内切酶、运载体、体细胞9. 下图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化，图中依次表示限制性内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是- .A. B. C. D. 10. 下列各项中，a、b、c、d代表的结构正确的是A. a质粒 RNAB. bDNA连接酶C. c限制性内切酶D. d外源基因11. 下列关于质粒的叙述，正确的是A. 质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器B. 质粒
4、是细菌细胞质中能自主复制的小型环状双链DNA分子C. 质粒只有在侵入宿主细胞后在宿主细胞内复制D. 细菌质粒的复制过程一定是在宿主细胞外独立进行12. 下列哪项叙述不是运载体必须具备的条件A.具有某些标记基因B.决定宿主细胞的生存C.能够在宿主细胞中复制D.有多个限制酶切点13. 作为基因的运输工运载体，必须具备的条件之一及理由是A.能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量复制，以便提供大量的目的基因B. 具有多个限制酶切点，以便于目的基因的表达C. 具有某些标记基因，以使目的基因能够与其结合D. 它的参与才能够使目的基因在宿主细胞中复制并稳定保存14. 下列哪项不是基因工程中经常使用的用来运载目
5、的基因的载体A.细菌质粒B.噬菌体C.动植物病毒D.细菌核区的DNA15. 将ada（腺苷酸脱氨酶基因）通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。下列叙述错误的是（11浙江）:A. 每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒B. 每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点C. 每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个adaD. 每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子16, 水母发光蛋白由236个氨基酸构成，其中有三种氨基酸构成发光环，现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记。在转基因技术中，这种蛋白质的作用A.促使目的基因导入宿主细胞中B.促使目的基因在宿主细胞中复制仁使目的
6、基因容易被检测出来D/吏目的基因容易成功表达17. 在基因工程的操作过程中，获得重组质粒不需要DNA连接酶限制性内切酶RNA聚合酶 具有标记基因的质粒 目的基因 四种脱氧核苷酸A.B.C.D.18. 下列属于PCR技术的条件的是单链的脱氧核苷酸序列引物目的基因所在的DNA片段 脱氧核苷酸核糖核苷酸DNA连接酶DNA聚合酶DNA限制性内切酶A.B.C.D.19. 引物的作用是A.打开DNA双链B.催化合成DNA子链C.提供模板D.使DNA聚合酶能够从引物的3端开始复制20. 基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶的识别序列和切点是一GJGATCC,限制酶II
7、的识别序列和切点是一JGATC一。根据图示,A.质粒用限制酶I切割，目的基因用限制酶II切割：8.目的基因和质粒均用限制酶I切割C.质粒用限制酶II切割，目的基因用限制酶I切割。.目的基因和质粒均用限制酶II切割21. 下列有关PCR技术的叙述正确的是A.作为模板的DNA序列必须不断的加进每一次的扩增当中B.作为引物的脱氧核苷酸序列必须不断的加进每一次的扩增当中C.反应需要的DNA聚合酶必须不断的加进反应当中D.反应需要的DNA连接酶必须不断的加进反应当中典型例题：22.根据下表，试写出下图中M、N、X、Y 端的碱基序列。抗原基，因D,NAN几种 限 制酶识 别 序列及切割位点表X限制酶Alu
8、 IEcoR IPst ISm a I切割位点AGJC TTCfG AGJA ATTC CTTA A fGCTGCAJGGfA CGTCCCCJGGGGGGfC CCEcoR IAlu I对符合设计要求的重组质粒T进行酶切。假设所用的酶 均可将识别位点完全切开，请根据图中标示的酶切位点 和表中所列的识别序列，对以下酶切结果作出判断。采用EcoR I和PstI酶切，得到 种DNA片断。采用EcoR I和Sma I酶切，得到 种DNA片断。23. 苏云金杆菌(Bt)能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。下图是转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程 示意图(ampr为抗氨苄青霉素基因)，据图回答下列问题。3种限制
9、性核酸内切酶识别序列与酶切位点 * *Hind III： AAGCTT Bam H I： GGATCC Bst H I： GGATCC TTC GAACCTAGjGCCTAGG将图中的DNA用Hind III、BamH I完全酶切后，反应管中有 种DNA片段。图中表示Hind III与BamH I酶切、DNA 连接酶连接的过程，此过程可获得种重 组质粒；如果换用Bst l与BamH I酶切，目 的基因与质粒连接后可获得_重组质粒。目的基因插入质粒后，不能影响质粒的。24. （10江苏）（8分）下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限限制酶BamH IHind IH
10、EcoR ISma I识别序列及 切割位点GGATCCCCTAGHGAAGCTTTTCGApGATTCCTTAAGCCctiGGGGGfCCBamH I制酶的酶切位点。请回答下列问题:一个图1所示的质粒分子经Sma I切割前后，分别含有若对图中质粒进行改造，插入 的Sma I酶切位点越多，质粒 的热稳定性。用图中的质粒和外源DNA构个游离的磷酸基团。建重组质粒，不能使用Sma I切割，原因是.与只使用EcoR I相比较，使用BamH I和Hind III两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防。为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加 酶。重组质粒中抗生素抗性基因的作
11、用是为了。为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。25.（12江苏）图1表示含有目的基因D的DNA片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序列，图2表 示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有Msp I、BamH I、Mbo I、Sma I 4种限制性 核酸内切酶，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C1CGG、G1GATCC、1GATC、CCC1GGG。请回答下列问题:图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由连接。若用限制酶Sma I完全切割图1中DNA片段，产生的末端是 末端，其产物长度为。
12、若图1中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换，那么基因D就突变为基因d。从杂合子 中分离出图1及其对应的DNA片段，用限制酶Sma I完全切割，产物中共有 种不同长度的DNA片段。若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是。在导入重组质粒后，为了筛选出含重组质粒的大肠杆 菌，一般需要用添加 的培养基进行培养。经检测，部分含有重组质粒的 大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达，其最可能的原因是高三生物一轮复习导学提纲(34)参考答案15 DDADA 610 DCACD 1115 BBADC 1621 CABDAB22. 2(2)123. 42 1复制24. 0、2 高 (3)Sma I会破坏质粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化(5)DNA连接鉴别和筛选含有目的基因的细胞蔗糖为唯一含碳营养物质25. 脱氧核糖、磷酸、脱氧核糖平537bp、790bp、661bp4Bam H I抗生素B同种限制酶切割形成的末端相同，部分目的基因D与质粒反向连接
