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1、文档供参考，可复制、编制，期待您的好评与关注！ 芳酸类药物的质量控制第一节 典型药物与结构特点非甾体抗炎药(Nonsteroidal Antiinflammatory Drugs，NSAIDs)是一类不含有甾体骨架的抗炎药，是目前临床使用最多的药物种类之一。本类药物具有抑制前列腺素的合成，进而发挥抗炎、抗风湿、止痛、退热和抗凝血等作用，在临床上广泛用于风湿性关节炎和类风湿关节炎、多种发热和各种慢性疼痛，如头痛、关节肌肉疼痛、牙痛等症状的缓解。本类药物具有不同的化学结构，但多数具有芳酸基本结构，即芳基取代羧酸结构。本类药物的结构特点为同时具有游离羧基和苯环，其酸性特征可作为原料药的含量测定基础，
2、即在中性乙醇或其他水溶性有机溶剂中，用氢氧化钠滴定液直接滴定；苯环的紫外光吸收特性常被用于本类药物的鉴别、定量检查及部分制剂的含量测定。本类药物的酯类易于水解的特性决定了其特殊杂质检查的项目与方法；如阿司匹林中游离水杨酸的检查，ChP曾采用三价铁比色法检查；但由于在供试品溶液制备过程中阿司匹林的继续水解使检查结果不稳定；所以ChP2010采用1%冰醋酸甲醇溶液制备供试品溶液，以防阿司匹林的水解，增加稳定性，同时采用高效液相色谱法(HPLC)检查，以提高检查结果的可靠性。芳酸类非甾体抗炎药物在结构上具有苯环和羧基。羧基可呈游离态，如水杨酸、阿司匹林、双水杨酯、二氟尼柳、甲芬那酸、布洛芬、酮洛芬、
3、萘普生、吲哚美辛等；羧基也可成盐或成酯，如双氯芬酸钠、双水杨酯等；也可呈酰胺结构，如吡罗昔康、美洛昔康等。本类药物在苯环上亦存在不同的结构特征，如水杨酸、阿司匹林、双水杨酯、二氟尼柳等具有邻羟基(游离或酯化)苯甲酸结构；甲芬那酸具有邻胺基苯甲酸结构；酮洛芬具有二苯甲酮结构；吡罗昔康和美洛昔康具有-羟基-不饱和酮结构；吲哚美辛、吡罗昔康和美洛昔康具有杂环结构；二氟尼柳含有氟元素，双氯芬酸钠和吲哚美辛含有氯元素，吡罗昔康和美洛昔康含有硫元素。上述结构特征或杂原子的存在也决定了各药物的化学特性。作为其他非甾体抗炎药，对乙酰氨基酚和尼美舒利的结构分别为取代乙酰苯胺和甲磺酰苯胺，具有苯胺和甲磺酰基结构。
4、主要理化性包括（一） 酸性本类药物因分子结构中具有游离羧基而显酸性，但其酸性强度受苯环的取代位置及苯环上其他取代基的影响。具有邻位取代苯甲酸结构的药物，如水杨酸、阿司匹林、双水杨酯、二氟尼柳、甲芬那酸等，由于邻位效应使得酸性增强，如阿司匹林的酸性(pKa3.49)比苯甲酸的酸性(pKa=4.26)强；其中，水杨酸还由于邻位游离羟基的氢能与羧基形成分子内氢键，更增强了羧基中氧氢键的极性，使其酸性进一步增强(pKa=2.95)。双氯芬酸、布洛芬、酮洛芬、萘普生、吲哚美辛等，由于羧基并非直接与苯环相连，在结构上属于芳环取代的脂肪酸类，其酸性较弱。而吡罗昔康、美洛昔康、尼美舒利、对乙酰氨基酚则为酰胺结
5、构，无明显酸性。基于本类药物具有较强酸性的特性，大多数药物的原料药均可在中性乙醇或甲醇、丙酮等水溶性有机溶剂中，用氢氧化钠直接滴定法测定含量。（二） 水解性本类药物中，阿司匹林和双水杨酯具有酯键，吲哚美辛、吡罗昔康、美洛昔康、尼美舒利、对乙酰氨基酚等则具有酰胺键，均可发生水解反应。水解反应及其产物的理化特性反应可用于鉴别；若水解反应可快速、定量进行，亦可用剩余碱量法测定含量，如美洛昔康可加定量过量的氢氧化钠水解后，剩余的氢氧化钠用盐酸回滴定法测定含量。（三） 吸收光谱特性本类药物分子结构中具有苯环和特征取代基，均具有紫外和红外特征光谱，紫外-可见分光光度法和红外分光光度法已被广泛应用于本类药物
6、及其制剂的鉴别；同时，紫外-可见分光光度法亦被广泛用于本类药物制剂的含量均匀度、溶出度或释放度的检查，甚至部分药物制剂的含量测定。（四） 基团或元素特性本类药物分子结构中的特征基团或元素具有特征的理化特性，如对乙酰氨基酚的酚羟基、水杨酸的邻羟苯甲酸结构与三价铁可生成有色配位化合物；酮洛芬的二苯甲酮可与苯肼缩合显色；美洛昔康结构中的硫元素热分解后产生的硫化氢可与醋酸铅生成黑色硫化铅等均可用于本类药物的鉴别。第二节 鉴别试验依据上述理化性质，芳酸类非甾体抗炎药物可采用显色反应、沉淀反应，以及红外、紫外-可见分光光度法和高效液相色谱法或薄层色谱法鉴别。一、与三氯化铁反应1水杨酸反应 水杨酸的水溶液加
7、三氯化铁试液，即生成紫堇色配位化合物。反应宜在中性或弱酸性(pH 46)条件下进行，在强酸性溶液中配位化合物可分解；本反应极为灵敏，试验宜在稀溶液中进行。如取样量大，产生颜色过深时，可加水稀释后观察。阿司匹林加水煮沸使水解生成水杨酸后，可与三氯化铁试液反应显紫堇色；双水杨酯在氢氧化钠试液中煮沸后与三氯化铁试液反应呈紫色；二氟尼柳溶于乙醇后与三氯化铁试液反应呈深紫色。2酚羟基反应 对乙酰氨基酚的水溶液加三氯化铁试液即显蓝紫色。吡罗昔康与美洛昔康噻嗪环上的烯醇式羟基具有酚羟基的性质，亦可在三氯甲烷溶液中与三氯化铁生成红色配位化合物，分别显玫瑰红色和淡紫红色。二、缩合反应酮洛芬具有二苯甲酮结构，在酸
8、性条件下可与二硝基苯肼缩合生成橙色偶氮化合物。取本品，加乙醇溶解后，加二硝基苯肼试液，加热至沸，放冷即产生橙色沉淀。三、重氮化-偶合反应对乙酰氨基酚具潜在的芳伯氨基，在稀盐酸中加热水解生成对氨基酚，具有游离芳伯氨基结构，在酸性溶液中与亚硝酸钠试液进行重氮化反应，生成的重氮盐再与碱性-萘酚偶合生成红色偶氮化合物。分子结构中具有芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物，均可发生重氮化反应，生成的重氮盐可与碱性-萘酚偶合生成有色的偶氮染料。四、氧化反应甲芬那酸溶于硫酸后，与重铬酸钾反应显深蓝色，随即变为棕绿色。吲哚美辛溶液在硫酸存在下，与重铬酸钾溶液共热，应显紫色；在盐酸溶液中与亚硝酸钠溶液反应显绿色，放置后渐
9、变黄色。五、水解反应阿司匹林与碳酸钠试液加热水解，得水杨酸钠及醋酸钠，加过量稀硫酸酸化后，则生成白色水杨酸沉淀，并发生醋酸的臭气。2 CH3COONa + H2SO4 2 CH3COOH +Na2SO4双水杨酯与氢氧化钠试液煮沸后，加稀盐酸，即生成白色水杨酸沉淀；沉淀在醋酸铵试液中可溶解。六、特征元素的反应1氯元素的鉴别 含氯药物与碱共热分解产生氯化物，显氯化物的鉴别反应。如双氯芬酸钠，与碳酸钠炽灼灰化，加水煮沸、滤过后，滤液显氯化物鉴别反应(详见本书第二章药物的鉴别)。2硫元素的鉴别 美洛昔康中含二价硫高温分解产生硫化氢气体，遇醋酸铅生成硫化铅黑色沉淀。如美洛昔康于试管中炽灼，产生的气体能使
10、湿润的醋酸铅试纸显黑色。七、光谱法(一) 紫外-可见分光光度法紫外吸收光谱为电子光谱，一般只有23个较宽的吸收带，药物分子结构中的共轭体系决定光谱的形态，如最大吸收波长与最小吸收波长及在各波长处的吸收系数均取决于分子结构中的共轭体系。紫外吸收光谱法被广泛应用于本类药物的鉴别，各药物的紫外吸收光谱特征参数见表6-1。常用的紫外鉴别方法如下：1最大吸收波长法 双氯芬酸钠、萘普生、吡罗昔康、美洛昔康等均规定其最大吸收波长，如双氯芬酸钠的水溶液(20g/ml)在276nm的波长处有最大吸收。本类药物的多种制剂亦采用本法鉴别，如吡罗昔康片的鉴别：取含量测定项下的溶液，照紫外-可见分光光度法测定，在243
11、nm与334nm的波长处有最大吸收。2最大与最小吸收波长法 布洛芬用0.4%氢氧化钠溶液制成0.25mg/ml的溶液，在265nm与273nm的波长处有最大吸收，在245nm与271nm的波长处有最小吸收，在259nm的波长处有一肩峰。布洛芬及美洛昔康制剂亦用同法鉴别。3吸光度法 甲芬那酸用1mol/L盐酸溶液-甲醇(199)混合液制成20g/ml的溶液，在279nm与350nm的波长处有最大吸收，其吸光度分别为0.690.74与0.560.60。4吸光度比值法 二氟尼柳用0.1mol/L盐酸乙醇溶液制成20g/ml的溶液，在251nm与315nm的波长处有最大吸收，吸光度比值应为4.24.6
12、。(二) 红外分光光度法红外吸收光谱是由分子振动、转动能级跃迁所产生的分子光谱，与紫外吸收光谱(电子光谱)比较，红外吸收光谱更具指纹特征性。本类药物的原料药均采用红外分光光度法鉴别；亦有少数制剂采用溶剂提取法去除辅料后测定，如布洛芬和对乙酰氨基酚、萘普生、尼美舒利片剂分别用丙酮、甲醇和无水乙醇溶解、滤过、干燥后，采用红外分光光度法鉴别。八、色谱法(一) 薄层色谱法药物制剂中存在大量的辅料，常对原料药所使用的某些鉴别方法，如红外光谱法构成一定的干扰。虽部分药物可用溶剂提取法去除辅料的干扰，但多数药物制剂中辅料的干扰难以有效去除，此时，可采用薄层色谱法(TLC)进行分离与鉴别。如二氟尼柳、美洛昔康
13、等制剂均采用TLC法鉴别。二氟尼柳胶囊的鉴别：以硅胶GF254为固定相，正己烷-二氧六环-冰醋酸(85105)为展开剂，展开后在紫外光(254nm)灯下检视，供试品溶液所显主斑点的位置和颜色应与对照品溶液的主斑点相同。美洛昔康制剂则以三氯甲烷-甲醇-二乙胺(6057.5)为展开剂，同法鉴别。(二) 高效液相色谱法虽然TLC设备简单、操作方便，但随着高效液相色谱法(HPLC)在药物制剂分析，尤其是在含量测定中的大量应用，近年来更多应用HPLC进行制剂的鉴别。如美洛昔康制剂采用有关物质检查的HPLC色谱条件进行鉴别，而阿司匹林、甲芬那酸、双氯芬酸钠、布洛芬、萘普生、吲哚美辛、对乙酰氨基酚等的多种制
14、剂则均直接取含量测定项下记录的HPLC色谱图进行鉴别。如阿司匹林片、泡腾片、肠溶片、肠溶胶囊等制剂均采用本法鉴别，方法如下：在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。当TLC和HPLC均有收载时，二者可任选其一，如美洛昔康片的鉴别。第三节 特殊杂质及其检查法典型芳酸类非甾体抗炎药物的有关物质信息见表6-3。典型非甾体抗炎药物的主要有关物质药物名称有关物质结构式代码/名称药物名称有关物质结构式代码/名称阿司匹林双水杨酯游离水杨酸萘普生I 6-甲氧基-2-萘乙酮甲芬那酸2,3-二甲基苯胺对乙酰氨基酚氨基酚对氯苯乙酰胺一、阿司匹林及双水杨酯中游离水杨酸与
15、有关物质的检查(一) 阿司匹林及双水杨酯的合成阿司匹林及双水杨酯的合成路线如下：(二) 阿司匹林中游离水杨酸与有关物质的检查1游离水杨酸 阿司匹林为乙酰水杨酸，在生产过程中因乙酰化反应不完全，或在精制过程及贮藏期间的水解而产生水杨酸。游离水杨酸对人体有毒性，且其分子中所含的酚羟基在空气中易被逐渐氧化生成一系列有色醌型化合物，如淡黄、红棕甚至深棕色而使阿司匹林成品变色，因而需加以控制。ChP曾基于水杨酸可在弱酸性溶液中与高价铁盐生成紫堇色配位化合物，而阿司匹林结构中无游离酚羟基，不发生该反应的原理，用稀硫酸铁铵溶液显色反应检查游离水杨酸。但由于在供试品溶液制备过程中阿司匹林可发生水解产生新的游离水杨酸，所以ChP2010采用1%冰醋酸甲醇溶液制备供试品溶液 (10mg/ml)，以防阿司匹林水解，同时采用高效液相色谱法(HPLC)检查，用十八烷基硅烷键合硅胶(ODS)为填充剂，以乙腈-四氢呋喃-冰醋酸-水(205 5 70)为流动相，检测波长为303nm。按外标法以峰面积计算，游离水杨酸不得过0.1%。通常，制剂不再检查原料药物检查项下的相关杂质，但阿司匹林在制剂过程中易水解生成水杨酸，因此药典规定阿司匹林片、肠溶片、肠溶胶囊、泡腾片及栓剂均照原料药方法与色谱条件检查水杨酸，限量分别为0.3%、1.5%、1
