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1、哈尔滨学院本科毕业论文(设计)哈尔滨学院本科毕业论文(设计)题目:蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测院(系)理学院专 业化学年 级2007级姓 名XXX学 号07052108指导教师XXX职 称副教授2011年 6月 13 日目 录摘 要1Abstract2前 言4第一章实验部分61.1 仪器与试剂61.1.1仪器61.1.2试剂6 1.2 实验原理61.3 实验过程71.3.1溶液的配置71.3.2两点法残留农药速测71.3.3数据处理和计算公式8第二章 结果与讨论102.1 实验影响因素102.2 实验结果讨论102.2.1酶抑制剂法的优缺点102.2.2酶抑制剂法使用过程中应
2、注意的几个问题102.3 分光光度法112.3.1实验步骤112.3.2结果计算112.3.3实验结果分析122.3.4检测注意事项122.3.5分光光度法存在的问题探讨122.4 两种方法的讨论13第三章 结论14参考文献15致 谢16I摘 要随着环保意识和健康意识的加强,农药残留危害性越来越受到重视。许多国家制订了食品中农药残留限量,加强了关键检测技术的研究和应用。传统的检测技术如气相色谱技术由于检测成本高、检测时间长、不能对蔬菜进行有效的产前、产中、产后监督管理。为了有效地快速监督管理农药残留的直接危害,农药残留快速检测技术非常重要1。近几年,在各个领域展开了农药残留快速检测技术研究,快
3、速检测技术突飞猛进。目前研究和应用较多的快速检测技术主要有活体检测法、化学检测法、酶抑制法、免疫分析法、仪器分析法等2。中国的农产品农药残留检测尚处于起步阶段,检测方法标准的制定工作还滞后于农产品市场发展的需要。今后应加快检测标准的制定,尽快研究出适合中国国情的多残留检测方法,加强技术培训,并以较低的成本普及到生产和销售领域中去,为提高农产品质量做出应有的贡献。本文研究的是根据有机磷和氨基甲酸酯类农药能抑制乙酰胆碱酯酶的活性原理,向蔬菜的提取液中加入生化反应底物碘化乙酰硫代胆碱和乙酰胆碱酯酶,如果蔬菜不含有机磷或氨基甲酸酯类农药残留或残留量低,酶的活性就不被抑制,实验中加入的底物就能被酶水解,
4、水解产物与加入的显色剂反应产生黄色物质。如果蔬菜的提取液含有农药并残留量较高时,酶的活性被抑制,底物就不被水解,当加入显色剂时就不显色或颜色变化很小3。用分光光度计在412nm处或农药残毒快速检测仪测定吸光值,根据计算出的抑制率,就可以判断蔬菜中含有机磷或氨基甲酸酯类农药残留量的情况。关键词:有机磷;氨基甲酸酯;分光光度法;酶抑制剂AbstractWith the enhancement of environmental protection consciousness and health consciousness, pesticide residue harmfulness has at
5、tracted the attention of people . Many countries have drawn up the pesticide residue limit in food and have strengthened the research and application of key measurement technique. Traditional measurement technique such as gas chromatography technology cant give supervision and management to vegetabl
6、e effectively before, during or after production because of high cost and long test time. In order to supervise and manage the immediate harm of pesticide residues effectively, rapid measurement technique of pesticide residue is very important 1. In recent years, the research of rapid measurement te
7、chnique of pesticide residue was developed in all areas ,and rapid measurement technique was improved by leaps and bounds. At present ,main rapid measurement techniques include in vivo detection method, chemical detection method, enzyme inhibition method, immune analysis method and instrument analys
8、is 2. The detection of Chinas agricultural products pesticide residue is in initial stage and the establishiment of detection method standard still lags behind the needs of the development of the agricultural product market. We should speed up the establishiment of detection standard , and excogitat
9、e detection method suitable for Chinas national conditions, strengthening residue and popularize detection method to areas of production and sales at lower cost ,in order to improve the quality of agricultural products to make due contributions. In this paper, according to the principle that organop
10、hosphor and carbamate pesticide can restrain the activity of acetylcholine esterase, such biochemical reactions substrates as iodinated acetyl sulfur choline and acetylcholine esterase were added to abstraction solution of vegetables, if vegetables didnt contain organophosphor and carbamate pesticid
11、e residues or low residual, the enzyme activity would not be restrained, the substrate in experiment could be hydrolyzed by the enzyme, hydrolysate and chromogenic agent produced yellow substance.If the abstraction solution of vegetables contained high pesticide residues, the activity of enzymes was
12、 restrained, substrate would not be hydrolyzed, The solution didnt show color or color change was very little, when chromogenic agent was added 3. Using spectrophotometer in 412 nm place or rapid detecting instrument of pesticides, absorption values were measured.According to the calculated inhibiti
13、on rate, we could judge the residual amount of organophosphor and carbamate pesticide in vegetables .Keywords: organophosphor;carbamic acid ester; spectrophotometric method; enzyme inhibito前 言目前农药残留的化学快速检测技术研究主要是根据有机磷农药的氧化还原特性。 有机磷农药磷酸酯、二硫代酸酯、磷酰胺在金属催化剂作用下水解为磷酸与醇,水解产物与检测液反应使检测液的紫红色褪去变成无色。本方法的特点是避免了使用
14、酶的不稳定、不易保存,但该方法局限于有机磷灵敏度不高、易受一些还原性物质干扰3。酶抑制技术在农药残留检测技术方面的研究进展中。酶抑制技术是研究比较成熟、应用最广泛快速的农药残留检测技术;是根据有机磷和氨基甲酸酯类农药对乙酰胆碱酯酶的特异性生化反应建立起来的农药残留的微量和痕量快速检测技术2。国内外近几年对选用酶的种类、底物和检测方法做了大量的研究。碘代硫化乙酰胆碱为底物,二硫代二硝基苯甲酸和碳酸氢钠为显色剂,根据颜色的变化测定酶的活性。有机磷农药和氨基甲酸酯类农药抑制了的活性, 引起碘代硫化乙酰胆碱不能水解,造成积累,利用碘代硫化乙酰胆碱与二硫代二硝基苯甲酸反应生成黄色的巯基硝基苯甲酸。从而测
15、定其吸光度即抑制率确定酶的活性根据酶的活性估算农药残留量4。目前国内大多农药速测仪都是利用颜色的变化“吸光度原理研究设计”的。如福建省测试技术研究所研制出便携式农药残留速测仪用于农药残留的检测;农业部农药检定所设计的农药速测仪;厦门欧达科仪公司生产的速测仪;上海光电技术研究所设计的农药残留仪等1。不同公司研制的仪器大同小异,只是在酶和底物应用方面存在细微的区别,从而判定的抑制率也存在差异5。农业部农药检定所选用的是丁酰胆碱酯酶;上海光电技术研究所和厦门欧达科仪公司等选用乙酰胆碱酯酶。氯化乙酰胆碱在胆碱酯酶作用下产生酸根据颜色的变化测定酶的活性6。当有机磷农药和氨基甲酸酯类农药存在时酶的活性受到抑制,氯化乙酰胆碱在胆碱酯酶作用下产生的乙酸量也相应减少,影响吸光度值,通过测定吸光度的变化测定乙酰胆碱酯酶受抑制的程度,从而检测出蔬菜中农药残留量3。植物酯酶水解二氯乙酰锭酚,根据反应溶液反应前后颜色的变化测定酶的活性,酶可以催化二氯乙酰锭酚分解产生兰色靛酚。当有机磷农药存在时,抑制了酶的活性导致样品溶液呈浅兰色或橙色不变7。根据与对照溶液比较确定样品中是否含有有机磷农药。浙江、广州、深圳等地研制出乙酰胆碱酯酶速测卡、速测箱用于定性检测大多是根据酶