饮用水大肠杆菌

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1、饮用水生活饮用水标准GB生活饮用水卫生标准一、大肠菌群与埃氏菌属二、埃希氏菌属中文学名拉丁学名大肠菌群:包括肠杆菌科的埃氏菌属、柠檬酸杆菌属、肠杆菌属和克雷伯菌属,这些细菌均来自人和温血动物的肠道,需氧与兼性厌氧,在37C能分解乳糖产酸产气,以革兰氏阴性杆菌为多。目前该项指标已被广泛应用于食品生产中卫生质量方面的指标菌,其数量是采用相当于100g或100ml食品中的可能数来表示,或称大肠菌群最近似数(MaximunProbableNumber,MPN)。大肠菌数的高低,表明粪便污染的程度,也反映了对人体健康危害性的大小。埃希氏菌属形态描述(EscherichiaCastellaniandCha

2、lmers,1919)直杆状,1.11.5gmx2.06.0卩m,单个或成对。许多菌株有荚膜和微荚膜。革兰氏阴性。以周生鞭毛运动或不运动。兼性厌氧,具有呼吸和发酵两种代谢类型。此描述仍局限于大肠埃希氏菌(E.coli),因为蟑螂埃希氏菌(E.blattae)没有很好的研究,并仅有少数菌株。最适温度37C。在营养琼脂上的菌落可能是光滑(S)、低凸、湿润、灰色、表面有光泽、全缘,在生理盐水中容易分散;菌落也可能是粗糙(R)、干燥、在生理盐水中难于分散。在这两种极端类型之间有中间型。也出现不粘和产粘液类型。化能有机营养。氧化酶阴性,乙酸盐可作为惟一碳源利用,但不能利用柠檬酸盐。发酵葡萄糖和其他糖类产

3、生丙酮酸,再进一步转化为乳酸、乙酸和甲酸,甲酸部分可被甲酸脱氢酶分解为等量的CO2和H2。有的菌株是厌氧的,绝大多数菌株发酵乳糖,但也可以延迟或不发酵。出现在温血动物肠的下部,蟑螂肠道的下部。DNA的G+Cmol%是4852(Tm)。种间鉴别见表3-5。模式种:大肠埃希氏菌(Escherichiacoli)。三、致病性大肠埃希氏菌大肠埃希氏菌在人和动物的粪便中大量存在,其中有少数几种能引起人类食物中毒。根据致病性的不同,致泻性大肠埃希氏菌被分为产肠毒素性、侵袭性、致病性、黏附性和出血性5种。部分埃希氏菌株与婴儿腹泻有关,并可引起成人腹泻或食物中毒的暴发。大肠埃希氏菌O157:H7是导致1996

4、年日本食物中毒的暴发的罪魁祸首,它是出血性大肠埃希氏菌中的致病性血清型,主要侵犯小肠远端和结肠。常见中毒食品为各类熟肉制品、冷荤、牛肉、生牛奶,其次为蛋及蛋制品、乳酪及蔬菜、水果、饮料等食品。中毒原因主要是受污染的食品食用前未经彻底加热。四、详解五、埃希氏大肠菌及检验a定义:大肠埃希氏菌更习惯称为大肠杆菌,分类于肠杆菌科,归属于埃希氏菌属,并且大肠杆菌株是该属的模式菌种。大肠杆菌的不同菌株间相关性为,而与同科的志贺氏菌属(除鲍氏志贺氏菌外)的相关性可达8与人类疾病有关的大肠杆菌,统称为致泻性大肠杆菌(此名称不易与致病性大肠杆菌相混淆),一般包括五种:即肠毒素性大肠杆菌()、致病性大肠杆菌()、

5、出血性大肠杆菌()、侵袭性大肠杆菌()和粘附性大肠杆菌()、文献报道还有几种,象:凝集性大肠杆菌、即产毒素又具有侵袭性的大肠杆菌等,但目前尚未达成统一共识。b生物学特性:基本形态特征:此菌为两端钝圆的短小杆菌,一般大小约MMMM因生长条件不同,个别菌体可呈近似球状或长丝状。此菌多单独存在或成双,但不呈长链状排列。约有5,左%右的菌株具有周生鞭毛而能运动,但多数菌体只有1-根4,一般不超过1,根,故菌体动力弱;多数菌株生长有比鞭毛细、短、直且数量多的菌毛,有的菌株具有荚膜或微荚膜;不形成芽胞,对普通碱性染料着色良好,革兰氏染色阴性。培养特征:由于此菌合成代谢能力强,在含无机盐、胺盐、葡萄糖的普通

6、培养基上生长良好。最适生长温度为7,在C条件下仍能生长,生长温度范围为C。在普通营养琼脂上生长表现种菌落形态:()光滑型:菌落边缘整齐,表面有光泽、湿润、光滑、呈灰色,在生理盐水中容易分散。()粗糙型:菌落扁平、干涩、边缘不整齐,易在生理盐水中自凝。(3)粘液型:常为含有荚膜的菌株。此菌兼性厌氧,在有氧条件下生长良好,最适生长为-所用培养基为若值低于或高于则生长缓慢。生化反应与血清学反应大肠杆菌属于卫生学意义的大肠菌群和粪大肠菌群的范畴,因此,必须符合大肠菌群和粪大肠菌群的有关定义,在检测大肠菌群、粪大肠菌群的基础上,可以应用(吲哚)、(甲基红)、(羟基丁酮)、(柠檬酸)即生化试验对大肠杆菌作

7、进一步鉴定,其结果为或。生化反应是鉴定大肠杆菌的主要方法之一,然而,大肠杆菌之间生化反应的差异非常常见,象:许多菌种非/迟发酵乳糖,但并不说明它们遗传上有明显不同,生化反应非典型的大肠杆菌菌株与典型菌株的相关性在1附表为大肠杆菌生化反应特性表。其中、脲酶、阿糖酸、吲哚、试验常为首选生化反应,其余为进一步的生化试验。大肠杆菌在赖氨酸脱羧酶、粘质酸盐、醋酸盐生化试验中,有一项或多项试验阳性,且厌氧性生长弱,有动力和吲哚试验阳性可与志贺氏菌相鉴别。大肠杆菌的血清学反应,往往是对经分离、鉴定、确证为大肠杆菌的进一步分型,常不作为常规方法使用。附表、所列主要致泻性大肠杆菌的血清型。对大肠杆菌的分型鉴定工

8、作,基层检验单位若有要求时,可与各地所属出入境检验检疫局实验室联系,委托进行血清学鉴定工作。c大肠杆菌的抵抗力:此菌对理化因素的抵抗力,在无芽胞菌中是最强的一种,在室温可存活数周,在土壤、水中存活数月,耐寒力强,但是在分钟内快速冷冻,将7降至C的过程,可杀死此菌。加热0,分钟,此菌可灭活。对漂白粉,酚、甲醛等较敏感,水中氯可杀死此菌。此菌耐胆盐,在一定程度上能抵抗煌绿等染料的抑菌作用,在选择性培养基配制上,常利用此菌这一性质。d卫生学意义与流行学由于大肠杆菌是人及各种动物肠道中的正常寄居菌,常随粪便从人及动物体排出,广泛散播于自然界,所以一旦检出大肠杆菌,即意味着直接或间接地被粪便污染,而在卫

9、生学上被用于饮水,牛奶或食品等的粪源性污染卫生细菌学指标;并且由于大肠杆菌在外界存活时间与一些主要肠道病原菌相近,它的出现也可能预示着某些肠道病原菌(例:沙门氏菌、志贺氏菌)的存在,因此该细菌是国际上公认的卫生监测指示菌。近来,有些国家在执行管理中,将大肠杆菌检测作为微生物污染状况的监测指标和实施效果的评估指标。致泻性大肠杆菌是引起人体以腹泻症状为主的全球性疾病,其中尤以、所占比例为大。附表3是我国部分省市主要腹泻病原体检出率情况,尽管目前报道各地主要腹泻病是由志贺氏菌或轮状病毒引起的,但是,多年来,致泻性大肠杆菌引起的腹泻病例始终位于第二位,可见大肠杆菌肠道传染的广泛性。还有,致泻性大肠杆菌

10、亦可常年引发人体腹泻,以夏秋季为高峰,在患者感染住院率中,婴幼儿占60以%上。近来,:为世界卫生组织()定为新的食源性致病菌,其引发的出血性肠炎的暴发或散发病例,自198年3以来在北美州(美国、加拿大)地区逐年增多,英国、日本亦有爆发和散发病例报道,我国也发现散发病例,尚未有爆发的报道。附表为近几年的污染状况。e大肠杆菌检验程序图解:检样I肉汤I7,肉汤管阳性(疑似大肠菌群)IC,肉汤肉汤管阳性(证实大肠菌群)IC,肉汤产气管数,查表,报告大肠菌群肉汤产气管为阳性(粪大肠菌群)查表,报告粪大肠菌群阳性管再培养平板分离IC,黑色菌落移种营养琼脂斜面肉汤生化试验革兰氏染色产酸产气无芽胞杆菌大肠杆菌按肉汤产气管数,查表,报告大肠杆菌说明:1由于大部分致泻性大肠杆菌在C条件中可失去活力,故大肠杆菌的定性检测比定量检测更适宜。如果确有大肠杆菌定量检测要求的话,可用法或终点稀释法进行。2、基层单位如有大肠杆菌生化鉴定要求或大肠杆菌血清学分型要求,可委托属地出入境检验检疫局进行检验。3检测大肠杆菌的法和膜过滤法,可参阅有关标准说明进行。4国标法与方法,在所用培养基、检验程序上略有差异,但不影响大肠杆菌检验结果的准确性。本章介绍的方法,可详见标准。

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