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1、植物根系活力检测液(甲烯蓝比色法)简介:植物根系是活跃的吸收器官和合成器官,根的生长情况和代谢水平即根系活力直接影 响植物地上部的生长和营养状况以及最终产量,是植物生长的重要生理指标之一。根据沙 比宁等的理论,植物对溶质的吸收具有表面吸附的特性,并假定被吸附物质在根系表面形 成一层均匀的单分子层,当根系对溶质的吸附达到饱和后,根系的活跃部分能够将附着的 物质进一步转移到细胞中去,并继续产生吸附作用。Leagene植物根系活力检测液(甲烯蓝比色法)检测原理以甲烯蓝作为吸附物质,其被 吸附量可以根据吸附前后甲烯蓝浓度的改变算出,甲烯蓝浓度可用比色法测定,于分光光 度计或酶标仪检测吸光度。已知甲烯蓝
2、形成单分子层时覆盖的面积为2据此可算出根系的 总吸收面积,从吸附饱和后再吸附的甲烯蓝的量,可算出根系的活跃吸收表面积,作为根 系吸收活力的指标。该试剂主要用于定量测定植物根系中根系活力。该试剂仅用于科研领 域,不宜用于临床诊断或其他用途。组成:编号名称TP1033Storage甲烯蓝显色液(0.1mg/ml)500mlRT避光使用说明书1份自备料:1、去离子水2、烧杯或离心管3、吸水纸4、比色杯、96孔板5、分光光度计、酶标仪操作步骤(仅供参考):1、稀释甲烯蓝显色液:取适量的甲烯蓝显色液,按甲烯蓝显色液去离子水一定比例准确 混合,即获得甲烯蓝显色液;按甲烯蓝显色液:去离子水一定比例准确混合,
3、即获得甲 烯蓝显色液。2、制作甲烯蓝标准曲线:按下表用甲烯蓝显色液配制系列标准溶液,以0号管调零,以分 光光度计或酶标仪于处测定吸光度,以甲烯蓝浓度为横坐标,以吸光度为纵坐标,绘制 标准曲线。加入物(ml)0123456甲烯蓝显色液(0.01mg/ml)00.20.40.60.811.2去离子水21.81.61.41.210.8甲烯蓝(pg/ml)01234563、将待测的植物根系洗净沥干,浸在装有一定量水的量筒中,用排水法测定根系的体积(或 用体积计测定)。4将甲烯蓝显色液分别倒入三个小烧杯,编号为1,2,3,每个烧杯中溶液体积约为上述 测定根系体积的,准确记下每个烧杯中的溶液量(ml),记
4、为V,V2, V3。5、将洗净的待测根系,先用吸水纸小心吸干,然后依次浸入装有甲烯蓝显色液的烧杯中, 每杯中浸泡。注意:每次取出时,要使根系上的甲烯蓝显色液流回到原来的烧杯中。6、从1、2、3号烧杯中各吸取甲烯蓝显色液,分别加入去离子水后,以分光光度计或酶 标仪于处测定吸光度,根据标准曲线,查得各烧杯浸入根系后甲烯蓝的浓度。计算:总吸收面积(m2)= (0.075-C1)xV1+(0.075-C2) xV2 x 1.1活跃吸收面积(m2) = (0.075-C3)xV3x1.1活跃吸收面积百分比二总吸收面积(m2)/活跃吸收面积(m2)根系活力或比表面积(Cm2 Cm3)=总吸收面积(cm2)/根体积(cm3)式中:0.075=烧杯未浸泡根系前的甲烯蓝浓度(mg/ml)C1=1号烧杯浸泡根系后的甲烯蓝浓度(mg/ml)C2=2号烧杯浸泡根系后的甲烯蓝浓度(mg/ml)C3=3号烧杯浸泡根系后的甲烯蓝浓度(mg/ml) V1,V2, V3=初始1、2、3号烧杯的甲烯蓝溶液的体积。对于单一根系,v1=v2=v3O注意事项:1、甲烯蓝显色液(0.1mg/ml)及其稀释液应避光保存,否则会影响实验结果。2、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。有效期:12个月有效。