生化分离重点技术实例训练任务单汇编

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1、生化分离技术实例训练任务单目 录实训1 利用机械和非机械细胞破碎法提取多酚氧化酶实例训练任务单1实训2 维生素C发酵液的预处理实例训练任务单3实训3 蔗糖密度梯度离心法提取叶绿体实例训练任务单5实训4 有机溶剂萃取红霉素实例训练任务单7实训5 双水相萃取细胞色素C实例训练任务单9实训6 盐硫酸铵盐析法分级分离血浆中的IGG实例训练任务单11实训7 等电点沉淀法分离牛乳中的酪蛋白实例训练任务单13实训8 结晶法提纯胃蛋白酶实例训练任务单15实训9 超滤法浓缩明胶蛋白水溶液实例训练任务单17实训10 透析法去除蛋白质溶液中的无机盐实例训练任务单19实训11 离子交换色谱分离混合氨基酸实例训练任务单

2、21实训12 凝胶柱色谱分离蛋白质实例训练任务单23实训13 亲和色谱纯化胰蛋白酶实例训练任务单25实训14 蛋白质的醋酸纤维薄膜电泳实例训练任务单27实训15 人工牛黄的真空干燥实例训练任务单29实训16 L-胱氨酸的提取分离实例训练任务单31实训17 L-亮氨酸的提取分离实例训练任务单33实训18 胰岛素的提取分离实例训练任务单35实训19 谷胱甘肽的提取分离实例训练任务单37实训20 胸腺肽的提取分离实例训练任务单39实训21 DNA的提取分离实例训练任务单41实训21 ATP的提取分离实例训练任务单43实训23 溶菌酶的提取分离实例训练任务单45实训24 凝血酶的提取分离实例训练任务单

3、47实训25 银耳多糖制备及鉴定实例训练任务单49实训26 硫酸软骨素的提取分离实例训练任务单51实训27 卵磷脂的提取分离实例训练任务单53实训28 猪去氧胆酸的提取分离实例训练任务单55实训29 青霉素的提取分离实例训练任务单57实训30 维生素B2的提取分离实例训练任务单59实训1 利用机械和非机械细胞破碎法提取多酚氧化酶实例训练任务单项目一 发酵液的预处理 任务一微生物细胞破碎实训1 利用机械和非机械细胞破碎法提取多酚氧化酶姓名 班级 日期 共 页第 页一、任务描述香蕉果皮中含有一种多酚氧化酶(PPO),PPO是一种含铜酶,它能够催化酚类物质转变成醌,使植物组织褐变,请根据PPO的特点

4、,设计选择机械和非机械相结合的细胞破碎方法,将香蕉果皮中多酚氧化酶提取出来,并设计一种试验方法来验证所提取的样品是具有活性的PPO。二、资讯(学生查阅资料、听教师讲解)1.多酚氧化酶的理化性质。2.微生物细胞破碎的具体方法,每种方法适用的材料,具体操作时的注意事项。3. 微生物细胞破碎所用设备的种类及操作规程。三、实作参考(提供1至2种的方法,仅供学生参考)实训1 利用机械和非机械细胞破碎法提取多酚氧化酶四、讨论设计(在教师指导下,学生查阅资料,根据实际条件,设计出具体操作方法或改进的工艺流程以及实际操作中所需材料、试剂、设备)五、实作(分组分工,在教师指导下,在实训中心完成实际操作,并记录现

5、象及结论)六、思考1.在提取香蕉果皮多酚氧化酶时,加入不溶性聚乙烯吡咯烷酮(PVP)和Tween-80各有何作用?2.验证香蕉多酚氧化酶时,除使用邻苯二酚外,可否用其他物质作底物?3.如何解决多酚氧化酶容易失活的问题?4.选择破碎方法的依据有哪些?说明你所选择方法的理由。七、教师对操作的考核1.实作材料准备是否充足;2.是否按设计过程及步骤操作;3.团队合作及分工是否合理;4.操作结果及现象记录是否规范;5.操作结束现场清理是否整洁。任务准备考核成绩任务操作考核成绩教师签名合计实训2 维生素C发酵液的预处理实例训练任务单项目一 发酵液的预处理 任务二发酵液的预处理实训2 维生素C发酵液的预处理

6、姓名 班级 日期 共 页第 页一、任务描述目前维生素C的生产主要采用“二步发酵法”, 在发酵终点时,发酵液中除了含有一定量的2-酮基L古龙酸钠(VC前体钠盐)及2-酮基L古龙酸(VC前体,含8左右)外,还含有大量的菌丝体、菌体蛋白和大量的培养基成分等,使VC前体及其钠盐分离提纯较为困难,因此,必须先进行预处理,主要是除去菌体蛋白。请根据维生素C的性质及发酵液的特点,设计选择合适的方法进行预处理。二、资讯(学生查阅资料、听教师讲解)1. 维生素C的理化性质。2. 发酵液的预处理方法。3. 凝聚与絮凝的区别,常用凝聚剂及絮凝剂的种类。三、实作参考(提供1至2种的方法,仅供学生参考)实训2 维生素C

7、发酵液的预处理四、讨论设计(在教师指导下,学生查阅资料,根据实际条件,设计出具体操作方法或改进的工艺流程以及实际操作中所需材料、试剂、设备)五、实作(分组分工,在教师指导下,在实训中心完成实际操作,并记录现象及结论)六、思考1.加热沉淀除蛋白与絮凝除蛋白各有何优缺点?2.如何检验维生素C发酵液预处理的效果? 3.适合维生素C发酵液预处理的方法有哪些?4.维生素C发酵液预处理时应考滤哪些因素?七、教师对操作的考核1.实作材料准备是否充足;2.是否按设计过程及步骤操作;3.团队合作及分工是否合理;4.操作结果及现象记录是否规范;5.操作结束现场清理是否整洁。任务准备考核成绩任务操作考核成绩教师签名

8、合计实训3 蔗糖密度梯度离心法提取叶绿体实例训练任务单项目一 发酵液的预处理 任务三发酵液的液固分离实训3 蔗糖密度梯度离心法提取叶绿体姓名 班级 日期 共 页第 页一、任务描述密度梯度离心法的优点是分离效果好,可一次获得较纯颗粒;颗粒不会挤压变形,能保持颗粒活性。请选择合适的分离方法从绿色植物的叶子中提取叶绿体的粗提物,然后再利用蔗糖密度梯度离心的方法分离出完整的叶绿体。二、资讯(学生查阅资料、听教师讲解)1. 植物叶子组成及叶绿体的性质。2. 粗滤的介质有哪些?3. 常用粗滤设备的种类及应用范围。4. 超速离心的方法有哪些?各方法的适用对象。5. 常用离心机的类型及及应用范围。三、实作参考

9、(提供1至2种的方法,仅供学生参考)实训3 蔗糖密度梯度离心法提取叶绿体四、讨论设计(在教师指导下,学生查阅资料,根据实际条件,设计出具体操作方法或改进的工艺流程以及实际操作中所需材料、试剂、设备)五、实作(分组分工,在教师指导下,在实训中心完成实际操作,并记录现象及结论)六、思考1. 蔗糖密度梯度在离心中起什么作用?2. 为何选择蔗糖密度梯度离心的方法提纯叶绿体? 3.如何制作连续的密度梯度液?4.在进行细胞破碎时加入匀浆介质的作用?七、教师对操作的考核1.实作材料准备是否充足;2.是否按设计过程及步骤操作;3.团队合作及分工是否合理;4.操作结果及现象记录是否规范;5.操作结束现场清理是否

10、整洁。任务准备考核成绩任务操作考核成绩教师签名合计实训4 有机溶剂萃取红霉素实例训练任务单项目二 有机物质的萃取 任务四有机溶剂萃取有机小分子物质 实训4 有机溶剂萃取红霉素姓名 班级 日期 共 页第 页一、任务描述红霉素为大环内酯类抗生素,白色晶体,呈微弱的碱性,难溶于水。本次实训任务以乙酸丁醋为萃取剂从红霉素软膏中提取红霉素,用饱和食盐水纯化,经结晶、干燥而得红霉素纯品。二、资讯(学生查阅资料、听教师讲解)1.红霉素的理化性质。2.有机溶剂萃取的具体方法,萃取剂应满足的条件,具体操作时的注意事项。3.有机溶剂萃取所使用的仪器的使用方法及注意事项。三、实作参考(提供1至2种的方法,仅供学生参

11、考)实训4 有机溶剂萃取红霉素四、讨论设计(在教师指导下,学生查阅资料,根据实际条件,设计出具体操作方法或改进的工艺流程以及实际操作中所需材料、试剂、设备)五、实作(分组分工,在教师指导下,在实训中心完成实际操作,并记录现象及结论)六、思考1.哪些生化物质可利用溶剂萃取技术进行提取纯化?2. 为何要选用饱和食盐水纯化萃取液? 3. 用乙酸丁酯萃取前为何将滤液酸化? 七、教师对操作的考核1.实作材料准备是否充足;2.是否按设计过程及步骤操作;3.团队合作及分工是否合理;4.操作结果及现象记录是否规范;5.操作结束现场清理是否整洁。任务准备考核成绩任务操作考核成绩教师签名合计实训5 双水相萃取细胞

12、色素C实例训练任务单项目二 有机物质的萃取 任务五双水相萃取生物大分子物质 实训5 双水相萃取细胞色素C姓名 班级 日期 共 页第 页一、任务描述细胞色素C是一种细胞呼吸激活剂。在临床上可以纠正由于细胞呼吸障碍引起的一系列缺氧症状,使其物质代谢、细胞呼吸恢复正常,病情得到缓解或痊愈。在自然界中,细胞色素C存在于一切生物细胞里,其含量与组织的活动强度成正比。本次实训任务以新鲜动物心脏为材料利用双水相萃取操作纯化细胞色素C。二、资讯(学生查阅资料、听教师讲解)1.细胞色素C的理化性质。2.双水相萃取的具体方法,萃取剂应满足的条件,具体操作时的注意事项。3.双水相萃取所仪器的使用方法及注意事项。三、实作参考(提供1至2种的方法,仅供学生参考)实训5 双水相萃取细胞色素C四、讨论设计(在教师指导下,学生查阅资料,根据实际条件,设计出具体操作方法或改进的工艺流程以及实际操作中所需材料、试剂、设备)五、实作(分组分工,在教师指导下,在实训中心完成实际操作,并记录现象及结论)

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