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1、SDS-PAGE的配胶及银染方法溶液分离胶(B)浓缩胶(C)浓度15%12%10%9%4.5%A5 mL4 mL3.3 mL3 mL0.75 mLB/C2.5 mL2.5 mL2.5 mL2.5 mL1.25 mLHO22.5 mL3.4 mL4.2 mL4.4 mL2.9 mLTEMED40 yL40 yL40 yL40 yL20 yLAPS80 yL80 yL80 yL80 yL40 yL电泳工作液:1、A液:丙烯酰胺储液 100 mL30% (W/V)丙烯酰胺(Acr, 30 g) + 0.8% (W/V)甲叉丙烯酰胺(Bis, 0.8 g)2、B液:4x分离胶缓冲液100 mL75 m
2、L 2M Tris-HCl(pH8.8)4 mL 10% SDS21 mL H O23、C 液: 4x浓缩胶缓冲液50 mL25 mL 1 M Tris-HCl(pH6.8)2 mL 10% SDS23 mL H O24、10% APS银染染色试剂及步骤步骤试剂时间备注固定液50% 乙醇+12% 醋酸+0.1% 甲醛+38%H2O20 min漂洗液50%乙醇3 min引发液0.02%Na2S2O31 min清洗H2O3 次/min染色0.5%AgN03+0.075% 甲醛25 min清洗H2O3 次/min显色2.5%Na2C03+0.05% 甲醛至显色终止1%乙酸注:染色液的配制方法,40 mL ddH2O中加1 mL20%的AgNO3,再加75此30%40% 的甲醛。