大肠杆菌与沙门氏菌鉴定

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1、精选优质文档-倾情为你奉上大肠杆菌与沙门氏菌的鉴定08动检1班:魏 静 翟阿官 李盼盼尚延丽 田方方 崔亚婷一、 实验目的与要求1、 通过本实验了解大肠杆菌及沙门氏菌的主要生化特性与培养特性2、 掌握大肠杆菌与沙门氏菌的鉴别方法二、 实验器材及试剂温箱、显微镜、载玻片、营养琼脂、接种环、灭菌平皿、麦康凯培养基、无菌试管、伊红美兰培养基、三糖铁培养基、革兰氏染色剂、棉签、火柴等三、 实验内容1、 直接镜检法:1) 操作步骤:a)用棉签沾取适量样液直接涂在载玻片上 b)用革兰氏染色剂染色 c)显微镜下观察2)预期实验结果: a)大肠杆菌:大肠杆菌为革兰氏阴性菌,中等大小,两端略圆的短粗杆菌,成单个

2、存在,也有成双排列;周身鞭毛,能运动,有时两端着色较浓,要注意与巴氏杆菌区分开来。 b)沙门氏菌:沙门氏菌也为革兰氏阴性菌,无芽孢,大小通常为0.71.5um*2.05.0um,菌端钝圆,散在,偶有短丝状,无荚膜,除鸡白痢沙门氏菌和鸡伤寒沙门氏菌外均有周身鞭毛,能运动,绝大多数菌株有菌毛。2、 分离培养法: 将样液分别划线接种在麦康凯培养基、伊红美兰培养基上,温箱培养24h后观察生长情况,根据菌落的形态、颜色、大小等方面的差异来鉴别大肠杆菌和沙门氏菌。1) 麦康凯培养基(预期实验结果):a) 大肠杆菌:鲜桃红色或微红色,菌落中心呈深桃红色,圆形,扁平,边缘整齐,表面光滑,湿润;b) 沙门氏菌:无色至浅橙色,透明或半透明,菌落中心有时为暗色。2) 伊红美兰培养基(预期实验结果):a) 大肠杆菌:紫黑色菌落,有的有金属光泽b) 沙门氏菌:形态特征与在麦康凯培养基上的相似2、 三糖铁培养基穿刺试验1) 操作方法:将待检样液穿刺接种于三糖铁培养基中,培养1824h后,取出观察2)预期实验结果: a)大肠杆菌:穿刺后不变黑,表面呈黄色 b)沙门氏菌:穿刺底部有气体,穿刺后变黑,中间为黄色表面为红色3、乳糖发酵试验1)操作方法:将待检样液接种于乳糖发酵管内放于温箱内培养18h后,观察结果2) 预期实验结果: a)大肠杆菌:产酸产气b)沙门氏菌:不产酸产气专心-专注-专业

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