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1、 disinfection and sterilization 内内 容容基本概念基本概念物理消毒灭菌法物理消毒灭菌法化学消毒灭菌法化学消毒灭菌法影响消毒灭菌效果的因素影响消毒灭菌效果的因素 自学自学灭菌灭菌(sterilization)(sterilization)：杀灭物体上杀灭物体上所有微生物所有微生物的方法。包括杀灭细菌的方法。包括杀灭细菌芽胞在内芽胞在内的全部病原或非的全部病原或非病原微生物。病原微生物。消毒消毒(disinfection)(disinfection)：杀死杀死物体上或环境中的物体上或环境中的病病原微生物原微生物的方法，但的方法，但不一定不一定能杀死芽胞。用于消能杀死
2、芽胞。用于消毒的化学药品称为毒的化学药品称为消毒剂消毒剂(disinfectant)(disinfectant)。 灭菌比消毒要求高灭菌比消毒要求高 一、基本概念一、基本概念 无菌无菌(asepsis)(asepsis)：指物体上或局部环境指物体上或局部环境中中不存在活的微生物不存在活的微生物。是灭菌的结果。是灭菌的结果。无菌操作无菌操作：防止细菌进入人体或其他：防止细菌进入人体或其他物品的操作技术。物品的操作技术。 防腐防腐(antisepsis)(antisepsis)：抑制：抑制体外体外微生物微生物增殖的方法增殖的方法, ,以防止物品的腐败和变质。以防止物品的腐败和变质。所用的制剂称为所
3、用的制剂称为防腐剂防腐剂。细菌一般不细菌一般不死亡。死亡。清洁清洁(cleaning)(cleaning)：指除去尘埃和一切指除去尘埃和一切污垢以减少物体上微生物数量的过程。污垢以减少物体上微生物数量的过程。是灭菌的前处理。是灭菌的前处理。热力灭菌法热力灭菌法辐射杀菌法辐射杀菌法滤过除菌法滤过除菌法干燥与低温抑菌法干燥与低温抑菌法二、物理消毒灭菌法二、物理消毒灭菌法1 1、干热灭菌法、干热灭菌法 焚烧焚烧 灼烧灼烧 干烤干烤 2 2、湿热灭菌法、湿热灭菌法 巴氏消毒法巴氏消毒法煮沸法煮沸法流通蒸汽消毒法流通蒸汽消毒法间歇蒸汽灭菌法间歇蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌法 （一）热力（一）热力
4、焚烧：焚烧：直接点燃焚烧或在焚化炉内焚烧。适用于直接点燃焚烧或在焚化炉内焚烧。适用于具有传染性的废弃物或尸体具有传染性的废弃物或尸体等灭菌。等灭菌。烧灼：烧灼：直接用火焰加热灭菌，适用于直接用火焰加热灭菌，适用于接种环（针）接种环（针）和试管口部的灭菌（细菌学实验）和试管口部的灭菌（细菌学实验）。干烤：应用干烤：应用烤箱烤箱高温灭菌，可高温灭菌，可杀死一切微生物。杀死一切微生物。16021602小时小时。适用于适用于玻璃或陶瓷器皿玻璃或陶瓷器皿等的灭菌，等的灭菌，并可并可破坏内毒素（热原质）破坏内毒素（热原质）。巴氏消毒法巴氏消毒法Louis Pasteur 18221895法国微生物学家法国
5、微生物学家路易路易巴斯德创立。巴斯德创立。源于巴斯德解决源于巴斯德解决葡萄酒变酸问题的葡萄酒变酸问题的努力。努力。 巴氏灭菌法通常有两种做法：巴氏灭菌法通常有两种做法： 一是在一是在61.062.861.062.8下加热下加热3030分钟；分钟； 二是在二是在71.771.7下加热下加热15153030秒。秒。 用于酒类和牛奶等消毒用于酒类和牛奶等消毒煮沸法：煮沸法：饮水，食具饮水，食具流通蒸汽消毒法：常压蒸汽灭菌法流通蒸汽消毒法：常压蒸汽灭菌法间歇蒸汽灭菌法：间歇蒸汽灭菌法：不耐高热的含糖不耐高热的含糖或牛奶的培养基或牛奶的培养基高压蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌法是一种是一种最有效、最有效、最常用
6、最常用的灭菌方的灭菌方法法。能杀灭芽胞能杀灭芽胞在内的所有微生在内的所有微生物。物。1213（103.4Kpa），），1520分分钟。钟。常用于常用于细菌培养细菌培养基、手术敷料、基、手术敷料、生理盐水生理盐水等制品等制品的灭菌。的灭菌。湿热灭菌与干热灭菌的比较？湿热灭菌与干热灭菌的比较？（二）辐射杀菌法（二）辐射杀菌法紫外线：紫外线：日光有杀菌作用，起杀菌作用的是紫外线。日光有杀菌作用，起杀菌作用的是紫外线。紫外线紫外线杀菌最适的波长为杀菌最适的波长为265-266nm265-266nm，这与这与DNADNA吸吸收光谱范围相一致。收光谱范围相一致。杀菌原理杀菌原理: :紫外线使紫外线使DNA
7、DNA的同一条核苷酸链上相邻的同一条核苷酸链上相邻的碱基形成胸腺嘧啶二聚体，从而干拢的碱基形成胸腺嘧啶二聚体，从而干拢DNADNA的复制的复制和转录，导致细菌死亡或变异。和转录，导致细菌死亡或变异。 紫外线的紫外线的穿透能力弱穿透能力弱，不能通过普通玻，不能通过普通玻璃、尘埃、纸张等璃、尘埃、纸张等用于消毒用于消毒物体表面及空气物体表面及空气：手术室、传手术室、传染病房、无菌室、细胞培养间及烧伤病染病房、无菌室、细胞培养间及烧伤病房等，亦可用于不耐热物品表面消毒。房等，亦可用于不耐热物品表面消毒。促进维生素促进维生素D D的活化的活化杀菌波长的紫外线对人体皮肤、眼睛均杀菌波长的紫外线对人体皮肤
8、、眼睛均有损伤作用，使用时有损伤作用，使用时应注意防护应注意防护。2 2 电离辐射电离辐射包括包括和和射射线等。具有较高的能量与穿线等。具有较高的能量与穿透力，可在常温下对不耐热的物品灭菌，故透力，可在常温下对不耐热的物品灭菌，故又称又称“冷灭菌冷灭菌”。其机理在于产生游离基，破坏其机理在于产生游离基，破坏DNADNA。可用于可用于消毒不耐热的塑料注射器和导管等消毒不耐热的塑料注射器和导管等；亦能用于亦能用于食品消毒食品消毒而不破坏其营养成份。而不破坏其营养成份。（三）滤过除菌（三）滤过除菌将将液体或空气液体或空气通过含有微细小孔的滤器，通过含有微细小孔的滤器，只允许小于孔径的物体通过，大于孔
9、径的只允许小于孔径的物体通过，大于孔径的的物体不能通过。的物体不能通过。主要用于一些主要用于一些不耐热的血清、毒素、抗生不耐热的血清、毒素、抗生素、药液和细胞培养液素、药液和细胞培养液等除菌。等除菌。滤器的种类很多常用的有：玻璃滤器和薄滤器的种类很多常用的有：玻璃滤器和薄膜滤器。膜滤器。薄膜滤器由硝基纤维素制成薄膜，薄膜滤器由硝基纤维素制成薄膜，装于滤器上，其孔径大小不一，装于滤器上，其孔径大小不一，常用常用于除菌的为于除菌的为0.22um0.22um。低温抑菌法低温抑菌法干燥（高渗）干燥（高渗） 低温干燥可使细菌的新陈代谢减慢，低温干燥可使细菌的新陈代谢减慢，常用作保存细菌菌种。常用作保存细
10、菌菌种。 冷冻真空干燥法冷冻真空干燥法( (lyophilizationlyophilization) )是是目前保存菌种的最好方法。目前保存菌种的最好方法。（四）干燥与低温抑菌法（四）干燥与低温抑菌法消毒剂的种类：酚类、醇类、重金消毒剂的种类：酚类、醇类、重金属盐类、氧化剂、表面活性剂、烷属盐类、氧化剂、表面活性剂、烷化剂。化剂。消毒剂的应用：病人排泄物与分泌消毒剂的应用：病人排泄物与分泌物、皮肤、粘膜、饮水、厕所、空物、皮肤、粘膜、饮水、厕所、空气、手等。气、手等。二、化学消毒灭菌法二、化学消毒灭菌法 作用机制作用机制不同的化学消毒剂其作用原理不完全相同，大不同的化学消毒剂其作用原理不完全
11、相同，大致归纳为三个方面：致归纳为三个方面： （1）改变细胞膜通透性改变细胞膜通透性 表面活性剂表面活性剂、酚类及醇酚类及醇类可导致胞浆膜结构紊乱并干扰其正常功能。使小类可导致胞浆膜结构紊乱并干扰其正常功能。使小分子代谢物质溢出胞外，影响细胞传递活性和能量分子代谢物质溢出胞外，影响细胞传递活性和能量代谢。甚至引起细胞破裂。代谢。甚至引起细胞破裂。 （2）蛋白变性或凝固蛋白变性或凝固 如酸、碱、醇、重金如酸、碱、醇、重金属盐、氧化剂、醛类、染料等可改变蛋白属盐、氧化剂、醛类、染料等可改变蛋白构型而拢乱多肽链的折叠方式，造成蛋白构型而拢乱多肽链的折叠方式，造成蛋白变性。变性。（3）改变蛋白的功能基团改变蛋白的功能基团 如某些氧化剂和如某些氧化剂和重金属盐类能与细菌的重金属盐类能与细菌的-SH基结合并使之失基结合并使之失去活性。去活性。细菌的种类与数量细菌的种类与数量消毒剂的性质、浓度与作用时间消毒剂的性质、浓度与作用时间温度温度酸碱度酸碱度有机物有机物四、影响消毒灭菌效果的因素四、影响消毒灭菌效果的因素
