《虹吸法和离心法制备冷沉淀效果比较》由会员分享，可在线阅读，更多相关《虹吸法和离心法制备冷沉淀效果比较（4页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、 虹吸法和离心法制备冷沉淀效果比较 （河南省三门峡市中心血站472000）R457A2095-1752（2014）30-0384-02冷沉淀含有丰富的因子、纤维蛋白原、及多种凝血因子，因此主要用于儿童血友病甲、血管性血友病患者及手术后出血、严重外伤及DIC等患者的治疗。而冷沉淀制品中因子和纤维蛋白原的含量是直接影响治疗效果的重要因素，并且与分离制备过程密切相关。目前，国内制备冷沉淀的常规方法有融化虹吸法和冻融离心法我站自2001年5月开始用虹吸法制备冷沉淀，2010年改用离心法制备，经过检测结果对比发现离心法制备的冷沉淀因子和纤维蛋白原的含量要优于虹吸法，现报告如下：1.材料与方法1.1仪器与
2、试剂MDF-460U型-50低温速冻冰箱（日本三洋）；贮血冰箱（日本三洋）；J6-MI离心机（美国贝克曼）；JY1001电子天平（上海民桥精密科学仪器有限公司）；ZBK-G低温工作台（淄博中保康医疗器具有限公司）；三洋冷冻库；SysmexCA-500血凝仪（Sysmex公司）；因子、纤维蛋白原定量检测试剂盒（德国DadeBehringMarburg公司）1.2方法1.2.1严格按照冷沉淀原料浆制品要求于采血后6小时内分离出血浆，称重算出容量后，把同一人份血浆平均分为2份，每份100ml。共留取50份原料血浆(全部为400ml全血制备)，放入-50低温速冻冰箱速冻后，置-30冷冻库保存备用。组2
3、5袋用虹吸法，组25袋用离心法。1.2.2虹吸法：将符合制备冷沉淀要求的原料血浆从-30冷冻库中取出，放入恒温水槽中，水温保持在（42），软化后，手工挤压使之与所连接的空袋形成虹吸，融化的血浆虹吸至空袋内，当原料浆袋内含有白色结晶颗粒的血浆约（255）ml时用止血钳钳住，热合完毕称重后，立即放入-50低温速冻冰箱内使其快速冻结。1.2.3离心法：贮血冰箱调节到（42），把符合制备冷沉淀要求的原料血浆从-30冰箱取出，置于4贮血冰箱内缓慢融化12小时左右，待血浆融化成只剩下少量不融化的白色结晶状沉淀物时，取出原料血浆袋放进预冷后的离心机中以离心力3800g离心15分钟，使冷沉淀下沉于塑料袋底部。
4、把离心后的血浆挂在低温操作台的挂钩上，让血浆虹吸至空袋内，当原料浆袋内容物约（255）ml时用止血钳钳住，热合完毕沉重后，立即放入-50低温速冻冰箱内使其快速冻结。1.2.4因子、纤维蛋白原含量测定严格按照Sysmex-CA500仪器使用说明书操作，分别测定因子、纤维蛋白原含量，测定结果乘以冷沉淀制品的容量，即为每袋冷沉淀制品中的因子、纤维蛋白原的含量，测定因子时冷沉淀10倍稀释、测定纤维蛋白原时冷沉淀20倍稀释。2.结果统计学采用t检验，结果如下：两种方法制备产品检测结果比较（n=25）我站在2001-2009用虹吸法制备的冷沉淀从每月抽检结果统计合格率为80%，改为离心法后提高到96%。3
5、.讨论从上表可看出，两种方法制备的冷沉淀F因子（P0.05）差异有显著性，而Fbg含量（P0.05）差异无显著性。这是因为F因子是一种不稳定因子，受到制备程序的影响很容易降低或失去活性，虹吸法制备时，新鲜冰冻血浆在溶解过程中，冷沉淀有时不能形成大的凝聚团块或絮状，不能聚集吸附在中央未融化的冰块上或袋壁上，部分由于虹吸作用而流到另一空袋内，因此降低了F因子的含量1。而离心法制备时新鲜冰冻血浆在冷藏箱内经过12小时左右的融化，F因子充分析出并聚集成大块团状或絮状，在重离心作用下全部沉降于血袋底部，相对虹吸法损耗较少。而Fbg为较稳定的凝血因子，受制备时间和其它因素影响较小，所以Fbg含量无显著性差
6、异。总之，虽然两种方法都能制备出符合血液质量标准的冷沉淀，但离心法制备的冷沉淀F因子的含量要优于虹吸法，从两种方法的操作步骤也可看出离心法整个制备过程条件容易控制，影响因素少。但与黄虹、陆典瑞2等报道这两种制备方法F因子和Fbg含量差异无显著性（离心法制备操作稍有不同），孙启俊、徐树良等3报道是离心法制备的成品F因子得率低有所不同。另外，冷沉淀的质量还受采集、分离、制备、保存等多方面因素的影响，因此，为了保证冷沉淀能够获得较高活性的第F因子，提高临床治疗效果，在制备过程中需注意以下几点：1、采血要求顺利，一针见血，采血过程中全血充分与抗凝剂混匀，无任何凝血迹象；2、原料血浆制备时提倡二次离心，以尽量去除袋内残留的血细胞，防止血浆在冰冻时细胞破裂释放促凝血活性物质，激活凝血系统，影响F因子稳定性；3、原料血浆冰冻时使用速冻冰箱或酒精干冰浴快速冰冻，以减少F因子活性的损失4。参考文献1杨玉峰，黄春萍，赵云等.两种制备冷沉淀方法的比较J.实用医技杂志，2007，6(8):32-33.2黄虹，陆典瑞，胡继征等.冷沉淀制备工艺改良J.临床输血与检验，2007，9(2):144-145.3孙启俊，徐树良，杜义真等.恒温水循环式冷沉淀制备装置的研究与应用J，2007，9(1):46-47.4王培华，主编，输血技术学M.北京:人民卫生出版社，1998.32. -全文完-
