发酵生产染菌及其防治2讲课文档

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1、发酵生产染菌及其防治第一页,共五十六页。优选发酵生产染菌及其防治第二页,共五十六页。 染染菌菌对对工工业业发发酵酵的的危危害害,轻轻则则影影响响产产品品的的质质和和量量,重重则则倒倒罐罐,颗颗粒粒无无收收,严严重重影影响响工工厂厂的的效效益益。染染菌菌的的发发生生不不仅仅有有技技术术问问题题,也也有有生生产管理方面的问题。产管理方面的问题。 在在克克服服染染菌菌问问题题时时必必须须先先树树立立起起这这样样的的信信念念,染染菌菌不不会会无无缘缘无无故故,是是人人无无意意识识所所为为,如如果果防防范范得得当当是是可可以以把把杂杂菌菌拒拒之之门门外的。外的。第三页,共五十六页。 一、污染原因一、污染

2、原因从技术上分析,染菌的途径不外有以下几方面:从技术上分析,染菌的途径不外有以下几方面:种子出问题;种子出问题;培养基的配制和灭菌不彻底;培养基的配制和灭菌不彻底;设备问题;设备问题;空气除菌不彻底;空气除菌不彻底;过程控制操作疏漏。过程控制操作疏漏。第四页,共五十六页。日本抗菌素生产中统计的染菌原因:日本抗菌素生产中统计的染菌原因: 从发酵工厂的生从发酵工厂的生产经验来看,染菌原产经验来看,染菌原因是以因是以设备渗漏设备渗漏和和空空气系统的染菌气系统的染菌为主,为主,其他则次之。其他则次之。第五页,共五十六页。 遇到染菌首先要监测杂菌的来源。遇到染菌首先要监测杂菌的来源。 对对顽顽固固的的染

3、染菌菌,应应对对种种子子、消消后后培培养养基基和和补补料料液液、发发酵酵液液及及无无菌菌空空气气取取样样作作无无菌菌试试验验以以及及设设备备试试压压检检漏漏,只只有有系系统统、严严格格监监测和分析才能判断其染菌原因,做到有的放矢。测和分析才能判断其染菌原因,做到有的放矢。第六页,共五十六页。(一)、染菌原因分析的思路(一)、染菌原因分析的思路1、从染菌的规模来分析、从染菌的规模来分析 (1)、大批发酵罐染菌)、大批发酵罐染菌 发酵罐都出现染菌而且染的是同一种菌,一般是由空气过滤器发酵罐都出现染菌而且染的是同一种菌,一般是由空气过滤器失效造成的,大批发酵罐染菌的现象较少但危害极大。失效造成的,大

4、批发酵罐染菌的现象较少但危害极大。 所以对于空气系统必须定期经常检查。所以对于空气系统必须定期经常检查。第七页,共五十六页。(2)、部分发酵罐)、部分发酵罐(或罐组或罐组)染菌染菌 如果出现在发酵前期可能是种子带菌,如果发生在中后期则如果出现在发酵前期可能是种子带菌,如果发生在中后期则可能是中间补料系统或油管路系统发生问题所造成的。可能是中间补料系统或油管路系统发生问题所造成的。 通常同一产品的几个发酵罐其补料系统往往是共用的,通常同一产品的几个发酵罐其补料系统往往是共用的,倘若补料灭菌不彻底或管路渗漏,就有可能造成这些罐同倘若补料灭菌不彻底或管路渗漏,就有可能造成这些罐同时发生染菌现象。时发

5、生染菌现象。 另外,采用培养基连续灭菌系统时,那些用连续灭菌另外,采用培养基连续灭菌系统时,那些用连续灭菌进料的发酵罐都出现染菌,可能是连消系统灭菌不彻底所进料的发酵罐都出现染菌,可能是连消系统灭菌不彻底所造成的。造成的。第八页,共五十六页。(3)、个别发酵罐连续染菌和偶然染菌)、个别发酵罐连续染菌和偶然染菌 个别发酵罐连续染菌大多是由设备问题造成的,如阀个别发酵罐连续染菌大多是由设备问题造成的,如阀门的渗漏或罐体腐蚀磨损,门的渗漏或罐体腐蚀磨损,特别是冷却管的不易觉察的穿孔特别是冷却管的不易觉察的穿孔等等。设备的腐蚀磨损所引起的染菌会出现每批发酵的染菌时。设备的腐蚀磨损所引起的染菌会出现每批

6、发酵的染菌时间向前推移的现象,即第二批的染菌时间比第一批提早,第间向前推移的现象,即第二批的染菌时间比第一批提早,第三批又比第二批提早。三批又比第二批提早。 至于个别发酵罐的偶然染菌其原因比较复杂,因为各至于个别发酵罐的偶然染菌其原因比较复杂,因为各种染菌途径都可能引起。种染菌途径都可能引起。第九页,共五十六页。2、从染菌的时间来分析、从染菌的时间来分析 发酵早期染菌一般认为除了种子带菌外,还有培养液灭发酵早期染菌一般认为除了种子带菌外,还有培养液灭菌或设备灭菌不彻底,而中、后期染菌则与这些原因的关系菌或设备灭菌不彻底,而中、后期染菌则与这些原因的关系较少,而与中间补料、设备渗漏以及操作不合理

7、等有关。较少,而与中间补料、设备渗漏以及操作不合理等有关。第十页,共五十六页。 3、从染菌的类型来分析、从染菌的类型来分析 一般染耐热性芽孢杆菌多数是由于设备存在死角或培养基灭菌一般染耐热性芽孢杆菌多数是由于设备存在死角或培养基灭菌不彻底。不彻底。 污染球菌、酵母等可能是从蒸汽的冷凝水或空气中带来的。污染球菌、酵母等可能是从蒸汽的冷凝水或空气中带来的。 在检查时如平板上出现的是浅绿色菌落在检查时如平板上出现的是浅绿色菌落(革兰氏阴性杆菌革兰氏阴性杆菌),由,由于这种菌主要生存在水中,所以发酵罐的冷却管或夹套渗漏所引起于这种菌主要生存在水中,所以发酵罐的冷却管或夹套渗漏所引起的可能能性较大。的可

8、能能性较大。 污染霉菌大多是灭菌不彻底或无菌操作不严格所致。污染霉菌大多是灭菌不彻底或无菌操作不严格所致。第十一页,共五十六页。 种种子子带带菌菌的的检检查查可可从从菌菌种种室室保保藏藏的的菌菌种种、斜斜面面、摇摇瓶瓶直直到到种种子子罐罐。保保藏藏菌菌种种定定期期作作复复壮壮、单单孢孢子子分分离离和和纯纯种种培培养养;斜斜面面、摇摇瓶瓶和和种种子子罐罐种种子子作作无无菌菌试试验验,可可以以用用肉肉汤汤和和斜斜面面或或平平板板培培养养基基检检查查有有无无杂杂菌菌。显显微微镜镜检检观观察察菌菌形形是是否否正正常常,应应注注意意在在显显微微镜镜检检不不出杂菌时不等于真的无杂菌,需作无菌试验才能最后肯

9、定。出杂菌时不等于真的无杂菌,需作无菌试验才能最后肯定。(二)、种子带菌(二)、种子带菌第十二页,共五十六页。 培培养养基基和和设设备备没没消消透透的的原原因因有有多多方方面面,如如蒸蒸汽汽压压力力或或灭灭菌菌时时间间不不够够,培培养养基基配配料料未未混混合合均均匀匀,存存在在结结块块现现象象,设设备备未未清清洗洗干干净净,特特别别是是罐罐冲冲洗洗不不到到的的犄犄角角处处,有有结痂而未铲除干净。结痂而未铲除干净。(三)、(三)、 培养基和设备没消透培养基和设备没消透第十三页,共五十六页。 设设备备方方面面特特别别是是老老设设备备也也常常会会遇遇到到各各种种问问题题,如如夹夹层层或或盘盘管管、轴

10、轴封封和和管管道道的的渗渗漏漏,空空气气除除菌菌效效果果差差,管管道道安安装装不不合合理,存在死角等是造成染菌的重要原因。理,存在死角等是造成染菌的重要原因。(四)、设备原因第十四页,共五十六页。 设备和管件的渗漏一般是指设备和管件由于腐蚀、内应力设备和管件的渗漏一般是指设备和管件由于腐蚀、内应力或其他原因形成微小漏孔所发生的渗漏现象。或其他原因形成微小漏孔所发生的渗漏现象。 这些漏孔很小,特别是不锈钢材料形成的漏孔更小,有这些漏孔很小,特别是不锈钢材料形成的漏孔更小,有时肉眼不能直接觉察,需要通过一定的试漏方法才能发现。时肉眼不能直接觉察,需要通过一定的试漏方法才能发现。第十五页,共五十六页

11、。1、发酵罐的渗漏、发酵罐的渗漏(1)冷却管的渗漏)冷却管的渗漏 由于发酵液腐蚀、固体物料摩擦引起管外壁磨损。管内冷却由于发酵液腐蚀、固体物料摩擦引起管外壁磨损。管内冷却水的浸泡、冲击、蒸汽冲击导致管内壁磨损。所以冷却管是发水的浸泡、冲击、蒸汽冲击导致管内壁磨损。所以冷却管是发酵罐中最容易渗漏的部件之一。酵罐中最容易渗漏的部件之一。 最易穿孔的是冷却列管的弯曲处,原因是弯曲处外壁减薄和加最易穿孔的是冷却列管的弯曲处,原因是弯曲处外壁减薄和加热致弯时使材料的性质有所改变所致。热致弯时使材料的性质有所改变所致。 冷却水的压力通常大于罐压,如果有微孔,冷却水就会冷却水的压力通常大于罐压,如果有微孔,

12、冷却水就会进入发酵液而引起染菌。进入发酵液而引起染菌。第十六页,共五十六页。 列管渗漏在漏孔极小时不易发现的。需将管外壁污垢铲除,列管渗漏在漏孔极小时不易发现的。需将管外壁污垢铲除,烘干,管内加水压试漏。烘干,管内加水压试漏。 管子与罐体的连接方式有两种:法兰联接和焊接。管子与罐体的连接方式有两种:法兰联接和焊接。 法兰法兰易拆卸更换,但联接处有垫片易渗,而焊接无此现象。易拆卸更换,但联接处有垫片易渗,而焊接无此现象。 为及早发现漏孔,冷却管要定期检查作渗漏试验。为及早发现漏孔,冷却管要定期检查作渗漏试验。第十七页,共五十六页。 试漏方法有两种:试漏方法有两种:气压试验气压试验和和水压试验水压

13、试验。 水压法:是用泵将水逐渐压入冷却管,一定压力下观察水压法:是用泵将水逐渐压入冷却管,一定压力下观察管子有否渗漏。管子有否渗漏。 气压法:是先在罐内放满水,用压缩空气通入管子,观察气压法:是先在罐内放满水,用压缩空气通入管子,观察水面有无气泡产生。气压法快速方便,但管子下部弯曲处积水水面有无气泡产生。气压法快速方便,但管子下部弯曲处积水不易排尽,有漏孔时不产生气泡就难以发现。不易排尽,有漏孔时不产生气泡就难以发现。 第十八页,共五十六页。 (2)、罐体的穿孔)、罐体的穿孔 浸在液体中的罐体都有可能发生腐蚀穿孔,特别是罐底,由于浸在液体中的罐体都有可能发生腐蚀穿孔,特别是罐底,由于空气管喷出

14、的压缩空气的冲击力及发酵液中的固体物料的摩擦,空气管喷出的压缩空气的冲击力及发酵液中的固体物料的摩擦,罐底钢板产生麻点般的斑痕,称为麻蚀。每年大修时需检查钢板罐底钢板产生麻点般的斑痕,称为麻蚀。每年大修时需检查钢板减薄的程度。有夹套的发酵罐可在夹套内用水压或气压的试验方减薄的程度。有夹套的发酵罐可在夹套内用水压或气压的试验方法检查罐壁有无渗漏。法检查罐壁有无渗漏。 有保温层的发酵罐,如果水经常渗入保温层并积聚在里面,有保温层的发酵罐,如果水经常渗入保温层并积聚在里面,罐外壁就产生不均匀的腐蚀现象,所以当保温层有裂缝和损坏罐外壁就产生不均匀的腐蚀现象,所以当保温层有裂缝和损坏时,应及时修补。时,

15、应及时修补。第十九页,共五十六页。2、管件的渗漏、管件的渗漏 与发酵罐相连接的管路很多,有空气、蒸汽、水、物与发酵罐相连接的管路很多,有空气、蒸汽、水、物料、排气、排污等管,管路多,相应的管件和阀门也多。料、排气、排污等管,管路多,相应的管件和阀门也多。 管道的连接方式、按装方法以及选用的阀门形式对防止污染有管道的连接方式、按装方法以及选用的阀门形式对防止污染有很大的关系。很大的关系。 所以,与发酵有关的管路不能同一般化工厂的化工管路完全一所以,与发酵有关的管路不能同一般化工厂的化工管路完全一样,而有其特殊的要求。样,而有其特殊的要求。第二十页,共五十六页。 因阀渗漏引起的染菌比例很大,值得引

16、起重视。与发酵罐直因阀渗漏引起的染菌比例很大,值得引起重视。与发酵罐直接连通的管道应选用密封性较高的阀门。接连通的管道应选用密封性较高的阀门。 目前使用的阀门大多采用目前使用的阀门大多采用截止阀截止阀和和橡胶隔膜阀橡胶隔膜阀。 (1) 阀阀第二十一页,共五十六页。 A截止阀截止阀 阀体为横放阀体为横放S形,阀座与阀心接触形,阀座与阀心接触面小。污物不易附在上面,但构造复面小。污物不易附在上面,但构造复杂,流体阻力大。杂,流体阻力大。 能很方便地调节流量,小型发酵罐多能很方便地调节流量,小型发酵罐多采用。采用。 平面形紧密面的垫料采用橡胶或平面形紧密面的垫料采用橡胶或聚四氟乙烯,关闭后垫料与阂座紧紧聚四氟乙烯,关闭后垫料与阂座紧紧地吻合,达到不漏的目的。地吻合,达到不漏的目的。 阀心垫料需定期检查,损坏后立即调换。阀心垫料需定期检查,损坏后立即调换。第二十二页,共五十六页。 截止阀在使用中经常发生以下两个问题:截止阀在使用中经常发生以下两个问题: a 阀心轧坏阀心轧坏。物料中的硬质物或焊接施工后的焊渣以及螺钉零。物料中的硬质物或焊接施工后的焊渣以及螺钉零件等被带到阀内,当关闭的,阀心与阀

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