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1、实验三实验三微生物形态观察微生物形态观察主讲：郑海涛主讲：郑海涛主讲：郑海涛主讲：郑海涛.一、目的要求一、目的要求1 1、细菌、细菌斜面培养的菌落特征及斜面培养的菌落特征及平板平板培养时的培养时的 生长特征生长特征2 2、观察并掌握根霉、曲霉和青霉的具体形态观察并掌握根霉、曲霉和青霉的具体形态 3 3、学会制备霉菌标本片的方法、学会制备霉菌标本片的方法4 4、放线菌的形态结构观察放线菌的形态结构观察5 5、酵母菌的培养特征及形态观察、酵母菌的培养特征及形态观察.二、实验原理二、实验原理1、培养特征培养特征：是指微生物在培养基上所表现的群体形态和 生长情况。 培养特征包括菌落特征、斜面培养的菌落
2、特征及液体培养时的生长特征,是认识微生物和微生物分类的重要依据2、菌菌 落落：是指个体微生物在固体培养基上繁殖成的肉眼可见的群体。3、霉霉 菌菌: : 霉菌是由交织在一起的菌丝体构成。菌丝呈管状,有的有横隔将菌丝分割为多细胞（如青霉、曲霉）,有的菌丝没有横隔（如毛霉、根霉）。菌丝直径比一般细菌和放线菌菌丝大几倍到几十倍。菌落形态较大,质地疏松,颜色各异,有丝状、绒毛状或蜘蛛网状的菌丝体。将菌丝体放在水中易变形,将其置于乳酸石炭酸溶液中,可保持菌丝体原形。.二、实验原理4、放线菌 观察放线菌菌落表面形状、大小、颜色、边缘以及有无色素分泌；注意在培养基上的着生的紧密情况。区别基内菌丝、气生菌丝及孢
3、子丝的着生部位。5、酵母菌 有些酵母菌进行一连串的出芽繁殖后，子细胞与母细胞并不立即分离，其间仅以极狭小的面积相连，形成似藕节状排列的细胞串，且有分枝，这种细胞串就称为假菌丝。 是否能生成假菌丝，是酵母菌属或种的特征，同时也与培养基的种类；培养条件等因素有关。一般于缺氧条件下在玉米粉琼脂或马铃薯浸汁琼脂培养基上较容易形成。.三三、实验材科及仪器、实验材科及仪器(一)菌种 黑根霉、黑曲霉、青霉 、细菌、酵母菌 和放线菌 (二)染液 乳酸石炭酸棉蓝染色液。 (三)其它 显微镜、盖玻片、载玻片、接种针、滤纸、 涂布棒、镊子等。 .四、方法与步骤四、方法与步骤1、每组一套常见的几种细菌的培养皿。2、观
4、察几种放线菌的斜面培养特征及标本片。3、观察酵母菌平板培养特征及标本片。4、霉菌的观察 直接取片观察法 (1)取洁净的载玻片，于中央滴一滴乳酸石炭酸棉蓝染液。(2)用镊子从培养皿中轻轻取一带菌盖玻片，从一侧盖在载玻片上的乳酸石炭酸棉蓝染液上，不要产生气泡。 (3)将制好的载片标本置于低倍镜下观察，必要时换用高倍镜。.五、观察与作业五、观察与作业1 1、观察几种细菌菌落的形态、大小、观察几种细菌菌落的形态、大小、颜色、边缘、光泽、隆起等特征颜色、边缘、光泽、隆起等特征并记录比较。并记录比较。 李斯特菌培养特征枯草芽孢菌菌落特征金葡菌溶血大肠在EMB.细菌在平板上的菌落特征大肠在（VRBA）上副溶
5、血型弧菌在TCBS上大肠在麦康凯上蜡样芽孢杆菌在葡萄糖琼脂上鼠伤寒沙门在SS上沙门在（DHL）上.大肠杆菌图片大肠杆菌图片电镜鞭毛大肠电镜.霉菌形态观察2 2、几种霉菌的观察、几种霉菌的观察 观察根霉和毛霉时，应注意观察：观察根霉和毛霉时，应注意观察： (1) (1)有无假根，及假根的形状、发达程度；有无假根，及假根的形状、发达程度； (2) (2)孢囊梗的形状、大小、颜色、排列、着生位置和分枝情况；孢囊梗的形状、大小、颜色、排列、着生位置和分枝情况； (3) (3)孢子囊的形状、大小、囊轴、囊托及孢囊孢子的性状、大小、孢子囊的形状、大小、囊轴、囊托及孢囊孢子的性状、大小、颜色；菌丝有无横隔等
6、。颜色；菌丝有无横隔等。 观察青霉时，应注意观察：观察青霉时，应注意观察： (1)(1)分生孢子梗的来源、分枝情况、直径等；分生孢子梗的来源、分枝情况、直径等； (2)(2)帚状枝的轮数及对称性；帚状枝的轮数及对称性； (3)(3)分生孢子的形成方式。分生孢子的形成方式。 观察曲霉时应注意观察：观察曲霉时应注意观察： (1)(1)菌丝的宽度、色泽、有无足细胞；菌丝的宽度、色泽、有无足细胞； (2)(2)分生孢子梗的宽度、颜色和表面特征；分生孢子梗的宽度、颜色和表面特征； (3)(3)分生孢子头和顶囊的形状、大小和可育面积；分生孢子头和顶囊的形状、大小和可育面积； (4)(4)小梗的形状、层数及
7、在顶囊上的着生情况；小梗的形状、层数及在顶囊上的着生情况； (5)(5)孢子链的排列情况。孢子链的排列情况。 .根霉和曲霉根霉曲霉假根匍匐丝孢囊梗孢子囊孢子囊轴足细胞顶囊小梗分生孢子孢子梗. 曲霉菌和青霉菌电镜图片曲霉菌和青霉菌电镜图片黑曲霉电镜青霉电镜分生孢子梗帚状枝分生孢子孢子梗分生孢子.霉菌观察霉菌观察.霉菌菌落特征霉菌菌落特征.酵母菌培养特征观察酵母菌培养特征观察酵母菌电镜片.酵母菌培养特征观察酵母菌培养特征观察.放线菌观察放线菌观察.六、思考题1、培养特征的重要意义何在？2、细菌菌落有那些重要的特征3、绘图说明你所观察到的各种霉菌的形态特征。.七、接种1、每四人一组，接种葡萄糖蛋白胨水培养基。2、接三支大肠杆菌、三支沙门氏菌或志贺菌。3、接两支西蒙枸橼酸盐培养基斜面。4、放置37温箱培养4-7天，做（ IMVIC ） 试验。.谢谢 谢谢2010年年03月月.
