菌种保藏原理

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1、Word文档菌种保藏原理菌种保藏的基本原理是使微生物的代谢作用降至极低限度，使其处于不活泼的休眠状态。从微生物本身来讲，就是要选择典型菌种的优良纯种，最好采纳它们的休眠体（如分生孢子、芽孢等），如有孢子或芽孢的微生物，要在它们生出孢子或芽孢后再进行保藏；从环境条件来讲，则是制造一个适合其长期休眠的环境条件，诸如低温、干燥、缺氧、避光、缺乏养分以及添加爱护剂或酸度中和剂等。大多数菌种保藏的方法都是依据这些因素或其中部分因素而设计的。微生物具有简单变异的特性，因此，在保藏过程中，必需使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态，但又不至于死亡，才能在肯定的时间内使其不发生变异而又保持生活力量，从而达

2、到保藏的目的。 水分对生化反应和一切生命活动至关重要，因此，干燥尤其是深度干燥，在保藏中占有首要地位就不言而喻了。五氧化二磷、无水氯化钙和硅胶是良好的干燥剂，当然，高度真空还可同时达到驱氧和深度干燥的双重目的。 除水格外，低温乃是保藏中的另一重要条件。微生物生长的温度低限约在 30，可是，在水溶液中能进行酶促反应的温度低限则在-140左右。这或许就是为什么在有水分的条件下，即使把微生物保藏在较低的温度下，还是难以较长期地保藏它们的一个主要缘由。在低温保藏中，细胞体积较大者一般要比较小者对低温更为敏感，而无细胞壁者则比有细胞壁者敏感。其缘由同低温会使细胞内的水分形成冰晶，从而引起细胞结构尤其是细

3、胞膜的损伤有关。假如放到低温（不是一般冰箱）下进行冷冻时，适当采纳速冻的方法，可因产生的冰晶小而可削减对细胞的损伤。当从低温下移出并开头升温时，冰晶又会长大，故快速升温也可削减对细胞的损伤。 当然，不同微生物的最适冷冻速度和升温速度也是不同的。冷冻时的介质对细胞损伤与否也有显著的影响。例如，0.5mol/L左右的甘油或二甲亚砜可透入细胞，并通过降低剧烈的脱水作用而爱护细胞；大分子物质如糊精、血清白蛋白、脱脂牛奶或聚乙烯吡咯烷酮(PVP)虽不能透入细胞，但可能是通过与细胞表面结合的方式而防止细胞膜受冻伤。在实践中，发觉用较低的温度进行保藏时效果更为抱负，如液氮温度（-195）比干冰温度(-70)好，-70又比-20好，而-20则比4好。2