铁染色测验

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1、本文格式为Word版,下载可任意编辑铁染色测验 铁染色 测验 1. 测验原理 骨髓细胞外铁和有核红细胞中的铁粒,在酸性环境下与亚铁氰化钾作用,呈阳性普鲁士蓝回响。 2. 标本采集 2.1 病人打定:了解病人是否对局麻药有过敏史。凝血因子严重缺陷引起的出血性疾病,穿刺部位有炎症或有畸形,晚期妊娠妇女作骨髓穿刺时要慎重。 2.2 标本种类:崭新抽取的骨髓穿刺液 2.3 标本采集要求 2.3.1 高压消毒的穿刺针,一次性无菌手套和抽取骨髓液的无菌注射器。 2.3.2 临床上首选穿刺部位为髂后上棘;翻身困难,需多部位穿刺患者可选择髂前上棘为穿刺片面。小于 3 岁的小儿还可选择胫骨头内侧为穿刺部位。 3

2、. 标本储存:室温避光处保存,若不能实时测定,可采用95乙醇固定 2 分钟,可保存数天。 4. 标本运输:室温运输 5. 标本拒收的标准:溶血、稀释标本不能作测定。 6. 试剂 6.1 200g/L 亚铁氰化钾溶液,溶液可保存数周,明显发绿和 较多沉渣时应重配。 6.2 浓盐酸,可取少量贮存于瓶内备用。放置时间太长或用时未见冒烟现象,应即更换。 6.3 铁染色应用液,即加浓盐酸约 20 滴于明净的 10mL 离心管(或小量杯)中,再加 200g/L 亚铁氰化钾溶液少量,混合液变混浊,然后缓慢再滴加亚铁氰化钾溶液,使混浊消散即可。此液不必过滤,也不用离心,但应现配现用,不能保存. 7. 操作 7

3、.1 取骨髓小粒较多的涂片 1 张,用铅笔写上姓名、时间。最好用蜡笔在涂片体、尾部划两条线,以防做细胞内铁染料复染时液体渗出。 7.2 使应用液盖满涂片,于室温作用 30 分钟,冬天可适当延长,后以自来水轻轻冲洗,以免髓膜脱落。 7.3 待干后,在蜡笔线中间区加 05伊红乙醇溶液复染 2分钟。水洗,待干。 7.4 在骨髓小粒内查看细跑外铁,在伊红复染区镜检红细胞内铁。 8. 结果查看 8.1 细胞外铁:常用低倍镜查看 (-):骨髓小粒呈黄色,无蓝色成分。 (+):小粒网架中分布较淡的蓝色成分。 (+):有较多蓝色铁粒和深蓝色的圆形小珠。 (+):肉眼可查看到小粒变为蓝色;镜下有大量铁粒、小珠和

4、少数蓝色小块。 (+):肉眼可查看到小粒明显变蓝色。有大量的铁粒、小珠和大量蓝色小块。 8.2 细胞内铁: 计数 100 个有核红细胞,记录阳性细胞(胞浆中有蓝色颗粒)的百分率。同时留神细胞内铁颗粒数目、大小、染色深浅,更加应留神有无环状铁粒幼红细胞。 9. 参考值 细胞内铁:各人变化较大,一般在 2080。 细胞外铁:(+)一(+) 10. 临床意义 10.1 缺铁性贫血的外铁阴性:内铁平均 6,其铁粒细小,数目 12 个。此类贫血约占总贫血病人的 80以上。 10.2 铁粒幼细胞性贫血,环形铁粒(环核排列的粗大铁粒 6个以上或铁粒排列在核周 13 以上)的幼红细胞占总有核红细胞的 15以上。 10.3 其他贫血的铁染色处境不一,如巨幼细胞性贫血可伴有缺铁。也可以展现正常或增多。 11. 留神事项 11.1 染色用的玻片、杯子、试剂等应制止受铁剂污染。 11.2 亚铁氰化钾消释混浊时,因回响较慢,后期滴加速度不 宜太快。 11.3 回响时间不宜太长,否那么析出的结晶会沉积在涂片上,较难冲洗之。 11.4 伊红易结晶析出,故复染时间太长或浓度太高,均会影响细胞内铁的查看。 11.5 铁染色作为一种最简便的常规组化,有助于各种贫血的诊断和鉴别诊断,当涂片无骨髓小粒,虽无法查看外铁,但内铁的查看对贫血的诊断也可起抉择性的作用。 4

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