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激光共聚焦扫描显微镜操作规程

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激光共聚焦扫描显微镜操作规程_第1页
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激光共聚焦扫描显微镜操作规程 激光共聚焦扫描显微镜操作规程 一. 开机程序1.开启总电源,确认全部仪器电源状态正常工作2.开启电脑,双击桌面上的LSM510图标,开启显微镜 3.在初始平面上点击Start Expert Mode 键开启专家拍摄模式 4.在主菜单中点击File New键,建立新的数据库 二.软件拍摄1.在主菜单上点击Acquire Laser键,开启须要运用的激光 2.在主菜单上点击VIS键,开启显微镜视察模式 3.把须要视察的玻片放到载物台上选择须要视察的平面 4.在主菜单上点击LSM键,开启进入显微镜激光扫描模式 5.在主菜单上点击Config键,选择所须要扫描的模式及参数 6.在主菜单上点击Scan Find键,进展图像参数自动校正 7.在Scan子菜单下点击Fast X键,进展层面选择8.在连续扫描中调整放大器增益、补偿;激光强度等图像参数来优化图像 9.点击图像子菜单上的Save键存储优化好的图像 三.关机程序1.完成全部操作后,关掉激光开关,冷却5分钟后,点击主菜单上Exit键,退出全部程序 2.关闭电脑 3.关闭电源ZEISS 510 META二维扫描程序 1. 在Acquire → config → 确定扫描所需的波长,〔假如已作过一样方法的扫描,可干脆调出一张一样条件的图像,用图像窗中的Reuse确定有关的扫描条件〕2. 在Acquire → micro → 在低倍镜(透射光或荧光)下找到要视察的图像3. 在Scan control → mode → find →在显示器上找到图像,选定扫描需用的辨别率 4. 调整物镜到适当的放大倍数5. Scan control → mode →New,翻开一新图像窗 6. 在Scan control → mode → cont →用zoom将图像大小调至最正确,用Pinhole〔一般选1〕、Detector Gain〔650左右,不宜时间超过800,也不宜低于500〕、Amplifier offset〔不宜过低〕,以及选择作算术平均值次数、调整激光强度〔488nm不超过25%〕等调整图像质量至最正确。

7. 按Single扫描图像 8. 画标尺9. save as:图像存至目标文件夹〔数据库〕ZEISS 510 META三维扫描程序10. 在Acquire → config → 确定扫描所需的波长,〔假如已作过一样方法的扫描,可干脆调出一张一样条件的图像,用图像窗中的Reuse确定有关的扫描条件〕11. 在Acquire → micro → 在低倍镜(透射光或荧光)下找到要视察的图像 12. 在Scan control → mode → find →在显示器上找到图像,选定扫描需用的辨别率13. 调整物镜到适当的放大倍数14. 在Scan control → mode → cont →用zoom将图像大小调至最正确 15. Z settings → Z Slice → optimal interval自动确定三维重组时相邻两张片的重合厚度16. Scan control → Z settings → XY cont (keep inteval), 用调焦旋钮找到三维扫描的第一张图像,按mark first;再找到最终一张图像,按mark last;用Pinhole〔一般选1〕、Detector Gain〔650左右,不宜时间超过800,也不宜低于500〕、Amplifier offset〔不宜过低〕,以及选择作算术平均值次数、调整激光强度〔488nm不超过25%〕等调整图像图像质量至最正确。

17. 按start起先进展三维扫描,〔用图像窗中的gallery可看到扫描的过程〕 18. 画标尺19. save as:图像存至目标文件夹ZEISS 510 META图像输出操作 输出图像:File→Export 目的:使图像在其它软件内可翻开 1. 翻开一个原始文件File → open 2. 选择图像类型:Image type1) :Raw data → Sangle plane原始数据,一般不用2) Contents of image window → singe plane实时显示窗口内容〔单一图像〕3) Contents of image window → series实时显示窗口内容〔三维扫描或重组后的图像〕4) Full resolution image windows → single plane显示全辨别率图像窗口〔单一图像〕5) Full resolution image windows → series显示全辨别率图像窗口〔三维重组后的图像的图像〕 3. 选择图像格式1〕一般单桢的图像选 *.tif 格式2〕 3D重组后的图像选 Viedeo fo windows(*.avi ) 格式 4. 假设是三维重组图像,还要选择翻开后的放映速度:Frames/sec 5. 确定存储文件路径及文件名 6. Save 本文来源:网络收集与整理,如有侵权,请联系作者删除,谢谢!第4页 共4页第 4 页 共 4 页第 4 页 共 4 页第 4 页 共 4 页第 4 页 共 4 页第 4 页 共 4 页第 4 页 共 4 页第 4 页 共 4 页第 4 页 共 4 页第 4 页 共 4 页第 4 页 共 4 页。

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