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1、武汉轻工大学本科毕业设计（论文）白杨无性系茎尖培养及体细胞胚胎发生技术研究论文作者：XXX指导教师：XXX学科专业：所在院系：2013年6月怵论文采用茎尖培养三步法，首次对引入我国表现优良的8个白杨无性系, 进行了微体快繁，为今后系统的苗期测定及田间试验提供了材料。同时，选用 了 5个无性系，以水培苗或组培无菌苗为材料，进行愈伤组织诱导或对其发育 状态调控及体细胞胚胎发生研究，为建立稳定的杨树体细胞胚胎发生体系奠定 了基础。试验结果表明，以水培苗带芽茎段为茎尖培养材料，银白杨与大齿杨杂种 AG和美洲山杨与欧洲山杨杂种3#芽分化率显著低于其余6个无性系；垂直接批注ZMY1: “摘要”字样用 三号
2、黑体，1.25倍行距，居中； 下空一行（摘要”二字之间用 二个字符空格分开）种可显著提高水培苗腋芽分化率；玉米素浓度对芽分化率影响不明显，但影响 材料的离体器官发生表现；8个无性系皆易诱导生根，其中银白杨与大齿杨杂 种AG和灰杨Ca较其它无性系更易，选用根数作为评定生根效果指标更合适。4-D高浓度悬浮培养下，成功的将美洲山杨与欧洲山杨杂种3#叶柄愈伤组 织调节为胚性状态，通过细胞悬浮培养，获得了大量的球形胚，并首次观察到 灰杨Ca茎尖白色愈伤组织内起源的子叶胚形成，得到了完整植株。基因型和 4-D浓度对愈伤组织状态调节，至为关键。温度变化可影响茎尖形态发生。愈 伤组织达到胚性状态时，表面特征不
3、一致，但有产生胚性细胞能力强弱之分。L批注ZMY2:正文用小四号 宋体，1.25倍行距，两端对齐， 每段首行缩进四个字符空格， 标点符号用全角批注ZMY3: “关键词”字样用小四号宋体、加粗，关键词 用小四号宋体，每一关键词之 间用逗号（全角）分开，最后 一个关键词后不打标点符号； 均为1.5倍行距，左对齐【关键词：白杨，茎尖培养，体细胞胚胎发生，悬浮培养，微体繁殖Abstract批注ZMY4: “ABSTRACT”字样用 limes New Roman 三号，1.25倍行距，居中；下空New Roman小 四号，1.25倍行四个字符空格，标点符号用全in this paper, a thre
4、e-step micropropagation was successfully employed for 8 selected genotypes of aspen. At the same time, through the induction of embryogenic callus, Somatic embryogenesis was studied. It would be beneficial to establish a stable system of embryogenesis in poplar.The results of study on aspen shoot cu
5、lture using node as explant show that percent bud regeneration of AG and 3# was lower than that of the other clones. Percentage of bud regeneration could be improved at vertical cutting. With the increasing of zeatin concentration, in vitro organogenesis was different. All clones were easy to induce
6、 rooting, especially AG and Ca, and number of roots was fit to estimate the effect on rooting of plantlet.Supplemented with lOmg/L 4-D, suspension cultures initiated from callus derived from petiole of aspen hybrid 3# produced embryogenic callus and a highest number of globular-shaped embryos, and c
7、otyledonary-stage embryos originated from white callus of grey aspen Ca shoot were first observed and embling were obtained. Genotypes and concentration of 4-D was critical to induce embryogenic and somatic embryogenesis. Morphogenesis of shoot was affected by culture temperature. Characteristic of
8、callus produced embryogenic cell was heterogeneous, but potential ability to produce embryogenic cell was different.!Key words: aspen clones, shoot culture, somatic embryogenesis, callus, cell culture|批注ZMY6: “Keywords字样用Times New Roman小四号、加粗，关键词用Times NewRoman小四号，每一关键词之间用逗号（全角）分开，最后一个关键词后不打标点符号;均为1
9、.25倍行距，左对齐第1章绪论1. 1杨树茎尖培养研究进展1. 1. 1杨树茎尖培养概述I目录批注ZMY7: “目录”字样用三号黑体、1.25倍行距，居中；下空两行（“目录”二字之间用二个字符空格分开）批注ZMY8:-级（章）标题1用四号黑体，1.25倍行距，分3散对齐（序号与标题内容之间1. 1.2杨树茎尖技术研究5用一个字符空格分开）1.2杨树体细胞胚胎发生研究进展7批注ZMY9:二级（节）标题7用小四号宋体，1.25倍行距,9分散对齐，左边留二个字符空第2章XXXXX18格（序号与标题内容之间用一个字符空格分开）1.2. 1杨树体细胞胚胎发生技术概述 |1.2.2杨树体细胞胚胎发生技术研
10、究批注ZMY10:三级（小节）:参考文献61标题用小四号末体，1.25倍行致谢66距，分散对齐，左边留四个字符空格（序号与小标题内容之间用一个字符空格分开）攻读学位期间的研究成果6创 批注ZMY11:格式同一级（章）标题”页眉：从第一章开始，每一章开始页的页眉书写章的名称，其它 页的页眉书写“武汉工业学院硕士学位论文”字样；采用小五号 宋体，单倍行距，居中排列（在页眉之下可划1条或2条横线）第3章 白杨无性系体细胞胚胎发生技术研究第3章 白杨无性系体细胞胚胎发生技术研究,3. 1材料与方法体细胞胚胎发生，在植物生长发育学理论研究和实际应用中，是合子胚和 器官发生无法比拟的，是人们梦寐以求的离体
11、形态发生方式。杨树作为林木生 物学研究的模式树种之一，体细胞胚胎发生技术相对要落后的多。在离体培养 形态发生中，杨树体细胞胚胎发生成功率和重复率比较低，有必要进一步研究。|3. 1. 1愈伤组织诱导（1）基因型与激素对愈伤组织诱导的影响怯取灰杨Ca、银白杨与大齿杨杂种AG、欧洲山杨Ta、美洲山杨与欧洲山 杨杂种3#及欧洲山杨与美洲山杨杂种TaT, 5个无性系水培苗叶柄，用0.1%氯 化汞浸约3min,无菌水冲洗3次，接种于含有ZT （0, 0.05, 0.5 mg/L）三个 浓度水平和4-D （0.5, 5mg/L）二个浓度水平的MS30培养基中，进行愈伤组 织诱导。30d统计接种外植体数、死
12、亡数及产生愈伤组织数，并计算愈伤组织 诱导率（产生愈伤组织数/外植体数）和死亡率（死亡数/外植体数）。培养条件同 2.1.1,下同。|（以下略）批注ZMY12: 一级（章）标题用三号黑体，1.25倍行距，居中（序号与标题内容之间用 二个字符空格分开），段前0.5 行，段后0.5行批注ZMY13:二级（节）标题用小三号黑体,1.25倍行距，左对齐（序号与标题内容之间用二个字符空格分开），段前x. 0.5行，段后0.5行批注ZMY14:三级（小节）标题用四号黑体,1.25倍行距,左对齐（序号与标题内容之间 用二个字符空格分开），段前 0.5行，段后0.5行批注ZMY15:正文中标题层次一律不宜超过
13、三级，三级不够时，可在三级调（1）、批注ZMY16:正文文字段落中：中文用小四号宋体，英文用 Times New Roman 小四号，1.25倍行距，左对齐，每段首 行缩进四个字符空格，标点符 号用全角页脚：自正文开始，到学位论文的最后一页，采用阿拉伯数字 编排页码；页码一律采用小五号宋体，单倍行距，底端居中。页眉：其它页的页眉书写“武汉工业学院硕士学位论文” 字样；采用小五号宋体，单倍行距，居中排列(在页眉 之下可划1条或2条横线)(2)材料类型对愈伤组织诱导的影响取欧洲山杨Ta、欧洲山杨与美洲山杨杂种TaT、美洲山杨与欧洲山杨杂种 3#及灰杨Ca, 4个无性系水培苗叶柄、茎段、叶片，三种材
14、料接种于 MS30+ZT0.05mg/L+4-D (0.5, 5mg/L)培养基中，进行愈伤组织诱导。同时取 银白杨与大齿杨杂种AG考虑四种材料，接种于相同培养基中，见表3.1,调查方法同2.1.2。表3.1愈伤组织诱导试验接种水培苗材料类型批注ZMY20:图、表中的标注写在图或表的下方(采用英文小写字母顺序编号)，中文用 五号宋体，英文用Times NewRoman五号，1.25倍行距（3）光照对愈伤组织诱导的影响取银白杨与大齿杨杂种AG和欧洲山杨Ta水培苗叶片及叶柄接种于 MS30+ZT0.05mg/L+4-D （0.5, 5mg/L）培养基中，进行愈伤组织诱导，光照强 度分为三个水平：1
15、000-20001ux、201ux （弱光）、完全黑暗，实验结果如图3.1 所示。无性系图3.1白杨无性系l/2MS20+IBA0.5mg/L20d生根情况Fig 3.1 Effect of genotype on rooting after 20 days cultured on l/2MS20+IBA0.5mg/L)泡沫的膨胀比的计算公式为:E =Vp(M - M i - M A(3.（以下略）批注ZMY21:图题连同图序 号在图的下一行居中标出（1.25倍行距）,图题与图序 号之间空两格；图题可用中、 英任一种文字，亦可中英文对 照；中文用五号宋体，英文用 Times New Roman 五号，且第 一个英文单词的首字母大写批注ZMY22:公式书写应在 文中另起一行（位置尽可能居 中），采用1.25倍行距；公式 序号标
