单个核细胞的别离讲座

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1、1,2021/8/12,烦恼有何惧怕,既然躲不掉,就调好心态与它共存。心向阳光,何惧风霜。茫茫人海你我相遇就是缘分,欢迎下载!,单个核细胞的分离,【原理】 人外周血单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞,本次实验采用密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞。 红细胞和多形核细胞比重较大,约为1.092,血小板约为1.032,单个核细胞比重约为1.075。因此,本实验利用一种比重为1.077等渗的聚蔗糖-泛影葡胺分离液作密度梯度离心,离心后不同比重的血细胞在分离液中呈梯度分布。将单个核细胞层取出,经洗涤后即可用于细胞免疫的某些试验。,【步骤】 1.取外周静脉血2ml,注入预先加有肝素的离心管中,混匀,再加

2、入等量生理盐水,混匀。 2.另取一支离心管,加入2ml淋巴细胞分离液,并倾斜45角,用毛细吸管将已稀释的血液(约4 ml)在距分离液界面上1cm处沿试管壁缓慢加至分离液上面,二者之间有一明显界面。 3.2000r/min离心20min。离心后,管内可分为以下四层:上层为血浆、血液稀释液及绝大部分血小板;下层为红细胞及粒细胞;中层为细胞分离液;分离液与血浆交界部位混浊的灰白色层即为单个核细胞层。(见下图),【步骤】,【步骤】 4.用毛细吸管轻轻插到灰白色层,沿试管壁周缘吸取该层单个核细胞,移入另一试管。 5.加5倍以上体积生理盐水,混匀,1500r/min离心10min,弃上清。以1ml生理盐水

3、将细胞重悬。 6.细胞计数:(本步骤为选做) 取1滴细胞悬液置血细胞计数板内计数,一般健康成人血每ml可分离出11062106个单个核细胞。 7.细胞活力检测: 取1-2滴细胞悬液加1滴台盼蓝染液混匀,加盖玻片,5min后,显微镜高倍镜下观察。,【结果判断】 活细胞不着色,折光强。而染料可渗入死亡细胞将其染成蓝色,体积略膨大。正常情况下,活细胞数应在95%以上。,9、 人的价值,在招收诱惑的一瞬间被决定。21.12.421.12.4Saturday, December 4, 2021 10、低头要有勇气,抬头要有低气。*12/4/2021 1:32:03 AM 11、人总是珍惜为得到。21.1

4、2.4*Dec-214-Dec-21 12、人乱于心,不宽余请。*Saturday, December 4, 2021 13、生气是拿别人做错的事来惩罚自己。21.12.421.12.4*December 4, 2021 14、抱最大的希望,作最大的努力。2021年12月4日星期六*21.12.4 15、一个人炫耀什么,说明他内心缺少什么。2021年12月*21.12.4*December 4, 2021 16、业余生活要有意义,不要越轨。*12/4/2021 17、一个人即使已登上顶峰,也仍要自强不息。*21.12.4,谢谢大家,9,2021/8/12,9、 人的价值,在招收诱惑的一瞬间被决

5、定。2021/12/42021/12/4Saturday, December 4, 2021 10、低头要有勇气,抬头要有低气。2021/12/42021/12/42021/12/412/4/2021 1:32:03 AM 11、人总是珍惜为得到。2021/12/42021/12/42021/12/4Dec-214-Dec-21 12、人乱于心,不宽余请。2021/12/42021/12/42021/12/4Saturday, December 4, 2021 13、生气是拿别人做错的事来惩罚自己。2021/12/42021/12/42021/12/42021/12/412/4/2021 14

6、、抱最大的希望,作最大的努力。2021年12月4日星期六2021/12/42021/12/42021/12/4 15、一个人炫耀什么,说明他内心缺少什么。2021年12月2021/12/42021/12/42021/12/412/4/2021 16、业余生活要有意义,不要越轨。2021/12/42021/12/4December 4, 2021 17、一个人即使已登上顶峰,也仍要自强不息。2021/12/42021/12/42021/12/42021/12/4,谢谢大家,10,2021/8/12,9、 人的价值,在招收诱惑的一瞬间被决定。2021/12/42021/12/4Saturday,

7、December 4, 2021 10、低头要有勇气,抬头要有低气。2021/12/42021/12/42021/12/412/4/2021 1:32:03 AM 11、人总是珍惜为得到。2021/12/42021/12/42021/12/4Dec-214-Dec-21 12、人乱于心,不宽余请。2021/12/42021/12/42021/12/4Saturday, December 4, 2021 13、生气是拿别人做错的事来惩罚自己。2021/12/42021/12/42021/12/42021/12/412/4/2021 14、抱最大的希望,作最大的努力。2021年12月4日星期六2021/12/42021/12/42021/12/4 15、一个人炫耀什么,说明他内心缺少什么。2021年12月2021/12/42021/12/42021/12/412/4/2021 16、业余生活要有意义,不要越轨。2021/12/42021/12/4December 4, 2021 17、一个人即使已登上顶峰,也仍要自强不息。2021/12/42021/12/42021/12/42021/12/4,

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