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1、临床样本的收集与储存样 本采集方法处理方法储存方法类型精品文档沟通血 液依据讨论需要采集治样 本疗前,治疗中及治疗 后 的 空 腹 外 周 静 脉血;采集时尽量挑选与其他常规检验同时进行分别采集抗凝血(依据讨论目的挑选抗凝剂)和非抗凝(干燥或促凝)血液样本 肿瘤 .血液样本采集英确保放/ 化疗前有进行血浆样本分别应进行两次离心外 周血液样本用EDTA 抗血 单凝采集个 核全血样本采集后应尽细 胞快用淋巴细胞分别液样 本分别单个核细胞分别后的单个核细胞应加入细胞冻存液, 并利用程序降温仪或程序降温盒进行梯度降温;冻存液配置为90%FC S+10%DMSO组 织样本采集严禁影响临样 本床病理诊断;
2、肿瘤直径 1cm3不建议采集或在病理医生指导下采集,采集部位应与用于石蜡切片相一样;样本采集应在离体后30min内完成采集, 采集时应防止坏死区及纤维化区,肿瘤细胞应 50% ;依据科研需求确定样本份数;分别提取血浆、血清、白细胞层、血凝块进 行分装,每例样本不 少于 3 份;血清/ 血浆:分装 3 管, 0.5ml/ 管;血凝块 : 分装2 管,1cm3/ 管;EDTA抗凝:用于 DNA 提取、淋巴母细胞系 建 立 和 蛋 白 组 学 讨论;分装 3 管、 0.5ml/ 管依据科研需求确定样本份数;水 平 室 温 离 心 分 离PBMC,4低温洗涤;分别后单个核细胞加 入细胞冻存液,混匀 后
3、 进 行 分 装 , 每 管0.5ml;依据科研需求确定样本份数;肿瘤、瘤旁及非瘤 (正常)组织各 2-3 份;石蜡/OCT 样本 1 份或5 张组织切片, 用于形状学对比;需留取质控样本() 留取份数依据科研目的而定)每 份 样 本 应 0.5cm3 或 300mg 或血清:室温血凝后 30min内进行分别、分装; 4, 24h 内进行分别、分装;血浆: 4, 24h 内进行分别、分装;全血 / 血清 / 血浆 / 血凝块 -80 长期储存;单个核细胞: 4,24h 内进行分别、分装; 分装后 -150液氮中储存;样 本 置 于 液 氮 内 转运;石蜡样本置于中性福尔马林中常温转运, 尽快制
4、成蜡块; RNA later 样本常温转运( 24h ),-20储存;OCT 样本 -20 储存;新奇组织样本置于液氮中储存;样本采集时应在洁净 环 境 中 操 作 , 保 存RNA 时应尽量在无菌环境下进行;采集不 同样本时应更换采集 器材、防止交叉污染;4. 采集次序: 标明“远癌-近癌 -癌灶”次序, 正常组 织(距癌灶边缘3cm 或最远端) 癌旁组织(距离癌灶 边缘 3cm ) 癌组织采集后样本置于液态 液氮中应使用内旋式 冻存管,置于气相液 氮 或 -80 冰 箱 中 可使用外旋式冻存管; 每份肿瘤样本应有配 对的血液样本;培 养采集容器应无菌、干细 胞燥、洁净、具有防漏样 本瓶盖;
5、吸出培育皿培育液, 用 PBS冲洗 2 次,加入胰蛋白酶 37消化1min ;除去胰蛋白酶,加入5ml培育液混匀后取出细胞液进行离心;除去上清液后加入细 胞爱护剂 0.5ml ,胎牛血清 0.5ml 及 DMSO0.1-0.2ml混匀放入内旋式冻存管内,进行程序降温;干细胞储存加入特定细胞培育液及高浓度胎牛血清;尿 液 采集容器应无菌、干样 本 燥、洁净、具有防漏瓶盖;进行毒理分析时应使用高密度聚丙烯类容器;1*107 细胞;石 蜡 样 本 不 小 于0.5*0.5*0.2cm ;样本 / 福尔马林液比例应 1/5;依据科研需求确定样本份数;每皿细胞对应1 个冻存管储存;传代细胞建议取处于 指
6、数生长期、较大瓶 皿培育的 80%-90%汇合单层细胞;收 集 培 养 液 时 , 1000g/min 离 心5-10min ;加入胰蛋白酶后需放 入 恒 温 箱 37 恒 温1min ;依据科研需求确定样本份数;尿液样本 100ml ;分装 5 管, 1ml/ 管;尿液样本可处理为: 全尿;样 本 置 于 液 氮 内 转运; -150长期储存;常温储存: 4h 0-4 24h ;全尿 -80 长期保存.细胞 -150 长期储存;检测特别分析物时应 在分管前加入EDTA 或焦亚硫酸钠等防腐 剂;防止经血、白带、精液、前列腺液、粪便污染;特别样本应避光储存建议采集首次晨尿;尿液样本含有细胞碎片等
7、杂质,应进行离心;尿液内细胞采集/ 分别方法同血液样本; 不同时段尿样讨论方 向:首次晨尿:白细 胞、红细胞和激素浓 度较高;随机尿样: 适合常规筛查和细胞 学检测;分级尿样: 适用于分析物浓度; 定时尿样:可用于比 较 生 物 分 子 排 泄 模式;粪 便 粪便应取新奇标本,样 本 盛器应洁净,不得混有尿液,不行有消毒剂及污水;采集标本时应用洁净的 竹 签 选 取 含 有 粘液、脓血等病变成分 的粪便;外观无反常 的粪便需从表面、深 处及粪端多处取材, 其量至少指头大小; 冷冻采集后的样本胆 汁采集容器应无菌、干样 本燥、洁净、具有防漏瓶盖;采集早晨胆汁、采集时尽量挑选与其他常规检验同时进行
8、; 胆汁储存应加入细胞培育液 RPMI1640依据科研需求确定样本份数;采集量 30g;分装 3 管, 10g/ 管;依据科研需求确定样本份数;采集量 10ml ;胆汁 /RPMI1640比例为:1/25;分装 5 管, 2ml/ 管;冷冻干燥储存;2 -80长期储存 .采集后4储存,时间 12h内 进 行 分装; -150长期储存;胆汁内细胞采集分别方法同血液样本;脑脊样本采集后应转入含依据科研需求确定样样 本 置 于 液 氮 内 转液有 EDTA 和氯化钠混本份数;运;合液中;2.采集量 3ml ;2. 上清液 -80长期储存;2. 假如含有红细胞或颗粒3.分装 3 管, 0.5-1ml/ 管;3. 分别细胞 -150长期物时应低温离心;储存;3. 采集细胞应使用专业采集方法;4. 脑脊液储存应加入爱护剂( DMSO)并使用程序降温仪进行梯度降温;唾液使用蛋白酶抑制剂处依据科研需求确定样样 本 置 于 液 氮 内 转样本理样本本份数;运;进行离心、分别上清分装 3-5 管,0.5ml/ 管; -80长期储存;和可能存在物质、采集上清和颗粒物;【下载本文档,可以自由复制内容或自由编辑修改内容,更多出色文章, 期望你的好评和关注, 我将一如既往为您服务】