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1、临床样本的收集与储存样 本采集方法处理方法储存方法类型精品文档沟通血 液依据讨论需要采集治样 本疗前，治疗中及治疗 后 的 空 腹 外 周 静 脉血；采集时尽量挑选与其他常规检验同时进行分别采集抗凝血（依据讨论目的挑选抗凝剂）和非抗凝（干燥或促凝）血液样本 肿瘤 .血液样本采集英确保放/ 化疗前有进行血浆样本分别应进行两次离心外 周血液样本用EDTA 抗血 单凝采集个 核全血样本采集后应尽细 胞快用淋巴细胞分别液样 本分别单个核细胞分别后的单个核细胞应加入细胞冻存液， 并利用程序降温仪或程序降温盒进行梯度降温；冻存液配置为90%FC S+10%DMSO组 织样本采集严禁影响临样 本床病理诊断；
2、肿瘤直径 1cm3不建议采集或在病理医生指导下采集，采集部位应与用于石蜡切片相一样；样本采集应在离体后30min内完成采集， 采集时应防止坏死区及纤维化区，肿瘤细胞应 50% ；依据科研需求确定样本份数；分别提取血浆、血清、白细胞层、血凝块进 行分装，每例样本不 少于 3 份；血清/ 血浆：分装 3 管， 0.5ml/ 管；血凝块 : 分装2 管，1cm3/ 管；EDTA抗凝：用于 DNA 提取、淋巴母细胞系 建 立 和 蛋 白 组 学 讨论；分装 3 管、 0.5ml/ 管依据科研需求确定样本份数；水 平 室 温 离 心 分 离PBMC，4低温洗涤；分别后单个核细胞加 入细胞冻存液，混匀 后
3、 进 行 分 装 ， 每 管0.5ml；依据科研需求确定样本份数；肿瘤、瘤旁及非瘤 （正常）组织各 2-3 份；石蜡/OCT 样本 1 份或5 张组织切片， 用于形状学对比；需留取质控样本（） 留取份数依据科研目的而定）每 份 样 本 应 0.5cm3 或 300mg 或血清：室温血凝后 30min内进行分别、分装； 4， 24h 内进行分别、分装；血浆： 4， 24h 内进行分别、分装；全血 / 血清 / 血浆 / 血凝块 -80 长期储存；单个核细胞： 4，24h 内进行分别、分装； 分装后 -150液氮中储存；样 本 置 于 液 氮 内 转运；石蜡样本置于中性福尔马林中常温转运， 尽快制
4、成蜡块； RNA later 样本常温转运（ 24h ），-20储存；OCT 样本 -20 储存；新奇组织样本置于液氮中储存；样本采集时应在洁净 环 境 中 操 作 ， 保 存RNA 时应尽量在无菌环境下进行；采集不 同样本时应更换采集 器材、防止交叉污染；4. 采集次序： 标明“远癌-近癌 -癌灶”次序， 正常组 织（距癌灶边缘3cm 或最远端） 癌旁组织（距离癌灶 边缘 3cm ） 癌组织采集后样本置于液态 液氮中应使用内旋式 冻存管，置于气相液 氮 或 -80 冰 箱 中 可使用外旋式冻存管； 每份肿瘤样本应有配 对的血液样本；培 养采集容器应无菌、干细 胞燥、洁净、具有防漏样 本瓶盖；
5、吸出培育皿培育液， 用 PBS冲洗 2 次，加入胰蛋白酶 37消化1min ；除去胰蛋白酶，加入5ml培育液混匀后取出细胞液进行离心；除去上清液后加入细 胞爱护剂 0.5ml ，胎牛血清 0.5ml 及 DMSO0.1-0.2ml混匀放入内旋式冻存管内，进行程序降温；干细胞储存加入特定细胞培育液及高浓度胎牛血清；尿 液 采集容器应无菌、干样 本 燥、洁净、具有防漏瓶盖；进行毒理分析时应使用高密度聚丙烯类容器；1*107 细胞；石 蜡 样 本 不 小 于0.5*0.5*0.2cm ；样本 / 福尔马林液比例应 1/5；依据科研需求确定样本份数；每皿细胞对应1 个冻存管储存；传代细胞建议取处于 指
6、数生长期、较大瓶 皿培育的 80%-90%汇合单层细胞；收 集 培 养 液 时 ， 1000g/min 离 心5-10min ；加入胰蛋白酶后需放 入 恒 温 箱 37 恒 温1min ；依据科研需求确定样本份数；尿液样本 100ml ；分装 5 管， 1ml/ 管；尿液样本可处理为： 全尿；样 本 置 于 液 氮 内 转运； -150长期储存；常温储存： 4h 0-4 24h ；全尿 -80 长期保存.细胞 -150 长期储存；检测特别分析物时应 在分管前加入EDTA 或焦亚硫酸钠等防腐 剂；防止经血、白带、精液、前列腺液、粪便污染；特别样本应避光储存建议采集首次晨尿；尿液样本含有细胞碎片等
7、杂质，应进行离心；尿液内细胞采集/ 分别方法同血液样本； 不同时段尿样讨论方 向：首次晨尿：白细 胞、红细胞和激素浓 度较高；随机尿样： 适合常规筛查和细胞 学检测；分级尿样： 适用于分析物浓度； 定时尿样：可用于比 较 生 物 分 子 排 泄 模式；粪 便 粪便应取新奇标本，样 本 盛器应洁净，不得混有尿液，不行有消毒剂及污水；采集标本时应用洁净的 竹 签 选 取 含 有 粘液、脓血等病变成分 的粪便；外观无反常 的粪便需从表面、深 处及粪端多处取材， 其量至少指头大小； 冷冻采集后的样本胆 汁采集容器应无菌、干样 本燥、洁净、具有防漏瓶盖；采集早晨胆汁、采集时尽量挑选与其他常规检验同时进行
8、； 胆汁储存应加入细胞培育液 RPMI1640依据科研需求确定样本份数；采集量 30g；分装 3 管， 10g/ 管；依据科研需求确定样本份数；采集量 10ml ；胆汁 /RPMI1640比例为：1/25；分装 5 管， 2ml/ 管；冷冻干燥储存；2 -80长期储存 .采集后4储存，时间 12h内 进 行 分装； -150长期储存；胆汁内细胞采集分别方法同血液样本；脑脊样本采集后应转入含依据科研需求确定样样 本 置 于 液 氮 内 转液有 EDTA 和氯化钠混本份数；运；合液中；2.采集量 3ml ；2. 上清液 -80长期储存；2. 假如含有红细胞或颗粒3.分装 3 管， 0.5-1ml/ 管；3. 分别细胞 -150长期物时应低温离心；储存；3. 采集细胞应使用专业采集方法；4. 脑脊液储存应加入爱护剂（ DMSO）并使用程序降温仪进行梯度降温；唾液使用蛋白酶抑制剂处依据科研需求确定样样 本 置 于 液 氮 内 转样本理样本本份数；运；进行离心、分别上清分装 3-5 管，0.5ml/ 管； -80长期储存；和可能存在物质、采集上清和颗粒物；【下载本文档，可以自由复制内容或自由编辑修改内容，更多出色文章， 期望你的好评和关注， 我将一如既往为您服务】
