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1、培养基的制备程序是医学检验师考试的范围，医学教冇网为您收集收集如下:培养基的制备程序不同类烈培养基制备的程序也不尽相同。但一般培养基的程序主要 可分为：配料、溶化、矫正pH、澄清过滤、分装、灭菌及检定等8个步骤。（一）配料按培养基处方准确称取备种成分，先在三角烧瓶中加入少量蒸镉水，再加入备种成分, 以防蛋H豚等粘附于瓶底，然示再以剩余的水冲洗瓶壁。（二）溶化将各种成分混匀于水中，哉好以流通蒸气溶化半小时，如在电炉上溶化应随时搅拌， 如有琼脂成分时更应注意防止外溢。溶化完毕，补足失去的水分。（三）矫正pH1. pH测定取与标准管同口径的试管（通常用华氏试管）3支，于第1、3管各加入欲测定pH的的
2、 培养基5ml,并于第一管中加入0. 2g / L的酚红0. 25ml作为测定管，混匀；于第2管加入 蒸馄水5ml,第4管为pH标准比色管。2. pH的校正若测定管过酸或过碱可用0. lmol/L氢氧化钠或0. lmol/L盐酸溶液矫正，直至颜色 与标准管相同为止，加碱或加酸时要精确缓慢，毎加1滴后要充分混匀，比色后再加第2 滴（有时仅加半滴）准确记录加入的量。3. 计算设5ml培养基矫正pH至7. 4时需0. lmol/L氢氧化钠0. 15ml，现有培养基4990ml, 需加氢氧化钠的量可按下列方法计算：5 : 4990 = 0. 15 : XX=0. 15X4990/5 = 149.7 （
3、ml）如将此0. lmol / I,的氢氧化钠改用lmol /L的氢氧化钠时，则需14. 9ml即可。（四）过滤澄清培养基配制麻一般都有沉渣或混浊出现，需过滤成清晰透明肩方可使用，常用的过滤 方法如下：1. 液体培养基液体培养基必须清晰，以便观察细菌的生长情况，常用滤纸过滤，亦可在加热前加入 用水稀释的鸡蛋白（1000ml培养基用1个鸡蛋白）在ltxrc加热示保持6070C4060分钟，使其不溶性物质附于凝固的蛋白上而沉淀，然后再川虹吸法吸出上清液或以 滤纸过滤。2. 同体培养基如系琼脂培养基，于加热融化后需趁热以绒布或两层纱布中夹脱脂棉过滤；亦可用自然沉淀法，即将琼脂培养基盛人铝锅或广口搪瓷
4、容器内，以高压（103. 43kPa）蒸汽 融化15分钟后，静置高压锅内过夜，次LI将琼脂倾出，用刀将底部沉渣切去，再融化即可 收清晰的琼脂培养基。（五）分装1. 根据需要将培养基分装于不同容量的三角烧瓶、试管中。分装的量不宜超过容器的2 / 3以免灭菌时外溢。2. 琼脂斜面分装量为试管容量的1/5,灭菌示须趁热放置成斜面，斜面长约为试管长 的 2 / 3.：3半固体培养基分装量约为试管长的1 / 3,火菌后直立凝固待用。4. 高层琼脂分装量约为试管的1/3,灭菌后趁热育立，待冷后凝固待用。5. 液体培养基分装于试管中，约是试管长度的1 / 3.6. 琼脂平板：将灭菌（或加热融化）示的培养基冷
5、至50C左右，以无菌手续倾人灭菌 平皿内，内径9cm的平皿倾注培养基约1315讯，轻摇平111L底，使培养基平铺于平1111底部, 待凝固后即成，倾注培养基时，切勿将皿盖全部启开，以免空气中尘埃及细菌落入。新制成的平板培养基（简称平板），表面水分较多，不利于细菌的分离，通常应将平 川L倒扣搁置于37C培养箱内约30分钟待平板平面干燥后使用。(%1) 灭菌不同成分、性质的培养基，可采用不同的灭菌方法。高压蒸汽灭菌法：高压灭菌的温 度与时间随培养基的种类及数量的不同有所差别，一般培养基少量分装时高压(103.43kPa)灭菌15分钟即可，培养基分装量较大时， 可高压(103.43kPa)灭菌30分钟，含糖的培养基高压(55. 16kPa)灭菌15分钟。以免糖 类被破坏。(%1) 检定每批培养基制成后须经检定方可使用，检定时将培养基放37C温箱内培养24小时后, 证明无菌，同时用已知菌种检查在此培养基上生长繁殖及生化反应情况，符合要求者方可使 用。(A)保存制好的培养基，不宜保存过久，以少最勤做为宜。每批应注明名称，分装量，制作LI 期等，放在4C冰箱内备用。
