学 院 专业班级 届 次 学生姓名 学 号 指导教师食品科学与工程学院山东农业女曇第二课堂与创新活动论文题目：泰山野菊花中有效成分的提取和分离方法研究食品质量与安全四班2011 届孙灵芝20074245张锦丽二0—1年六月十日泰山野菊花中有效成分的提取和分离方法研究学生姓名：孙灵芝指导教师：张锦丽职称：讲师（山东农业大学 食品科学与工程 泰安 271018）摘要：目的分析泰山野菊花中挥发油的化学成分和探明泰山野菊花中化学成分的提収和 分离条件方法 采用水蒸汽蒸憎法提取挥发油，利用GC-MS联用仪的固相微萃取法对野 菊花挥发油的化学成分进行研究，同时本实验分别以乙醛，乙酸乙酯和无水乙醇对野菊花 进行了索氏提取法的梯度提取和乙酸乙酯，无水乙醇分别提取并对它们提取物进行了紫 外扫描，高效液相色谱分析结果 泰山野菊花中挥发油共分离到54个组分，在200-400nm 具有紫外吸收，高效液相色谱法测定野菊花提取物有4-6个物质峰结论 为不同产地的 野菊花挥发油评价提供依据，实验中尝试分別对其提取物进行高速逆流色谱分析分离，并 对高速逆流色谱溶剂体系的配制方法进行了简明的探究关键词：野菊花；挥发油；GC-MS分析；高效液相色谱；高速逆流色谱；溶剂体系Mount taishan in wild chrysanthemum of extracting effectivecomponents and separation methodAbstract: objective to analyze the taishan chrysanthemum indicumchemical composition and proved in taishan chrysanthemum indicumextracted and separated from the chemical composition. Methods usingsteam distillation and extraction of oil by gc・ms MS instrument ofsolid-phase microextraction method for the chemical composition of volatile chrysanthemum indicum, at the same time, the experimental research on respectively by ethyl ether and anhydrous alcohol to the wild chrysanthemum soxhlet method of ethyl acetate extract and gradient ethanol extract, respectively. And they were the uv scanning, HPLC analysis. Results were separated in taishan chrysanthemum indicum volatile components to 54, 200-400nm with ultraviolet absorption, HPLC chrysanthemum indicum extract has 4-6 material. Conclusion the essential for different producing areas to provide basis for evaluation of wild chrysanthemum of experiments attempt extracts of high-speed countercurrent chromatography separation and analysis of high-speed countercurrent chromatography solvent system configuration of concise method.Keywords: chrysanthemum indicum, Naphtha, Gc-ms analysis, Highperformance liquid chromatography, High-speed countercurrentchromatography, Solvent systems1文献综述1.1野菊花简介野菊花为菊科植物野菊的头状花絮"1,在我国东北、华北、西北、华东、西南 等地均有岀产。
性凉，味苦、辛，归肺肝经，具有清热解毒、生津止渴、宁心安神 等功效，在我国民间药用历史悠久，有泡饮野菊花和用野菊花作枕头睡眠，具有保 健功能2005年版中国药典其栓剂用于抗菌消炎⑵现代药理研究表明：野菊花具 有光谱抗菌、抗病毒、降压、增加冠脉血流量、清除氧自由基等作用目前临床多 用于治疗各种炎症、病毒性疾病、心血管疾病、肺结核咯血等，如慢性咽炎、肺炎、 胃肠炎、前列腺炎、传染性软疣、病毒性肝炎、口疮、痢疾、高血压等野菊花的化学成分较复杂，并且受到气候环境，地理条件，采集时间的差异影 响1.2野菊花的化学成分研究1.2.1挥发油和菇类化合物野菊花含有祜类成分较多，主要有单菇、倍单菇、三菇及其含氧衍生物等，其 中大部分存在于挥发油中，同吋，菇类物质也是野菊花中挥发油的主要成分此外 还含有脂肪族化合物等野菊花的挥发油因产地不同或提取方法不同，化学成分及 色泽都会有差别张永明等⑶用水蒸气蒸憾法提取野菊花挥发油，用GC毛细管柱进 行分析，归一法测其相对含量，并用气相色谱法对广西、广东、湖北野菊花化学成 分进行鉴定，发现广西、广东、湖北野菊花挥发油成分种类和含量均有明显的差别 陈其华⑷对不同颜色挥发油进行研究，发现含蓝绿色挥发油的药材质量优于含黄色 挥发油的药材。
闫克玉等⑸根据野菊花挥发油化学成分的GC-MS法分析得出野菊花 挥发油化学成分中烯怪类（26. 9%）.醇类（19.02%）、酮类（14.22%）、酸类主要是 十二烷酸（3. 35%）.肉豆寇酸（2.20%）等，与其他产地的野菊花有明显的不同 野菊花的挥发油具有改善和修饰单料烟香气、增加清香香韵、减轻刺激性的作用， 可用于单料烟加香，添加量以千分之一为宜1.2.2黄酮类化合物黄酮类化合物是野菊花中重要的药效成分之一早在1942年人们旧从野菊花 中分离出黄酮类化合物木犀黄酮昔八十年代孔庆芬等人从野菊花中分离得到多种 黄酮类化合物近年来，野菊花黄酮类成分的研究又取得进展汤毅等⑹用硅胶柱 色谱及Sephadex LH-20柱色谱法进行分离纯化，依据理化性质和光谱数据鉴定化 合物结构从野菊花的80%乙醇提取物中得到七种黄酮类化合物，分离和鉴定（如表 1）,其中4种为新化合物 No.化合物名称外观mp/C来源1木犀草素(luteol in)黄色粉末>300干燥野菊花2木犀草素-7-0- P -D-葡萄糖昔luteolin-7-O-3 -D-glucopyranoside黄色粉末250〜253干燥野菊花3木犀草素-7-0-(6〃 -0-乙酰基)-p-D-葡萄糖昔1uteolin-7-O- (6" -0-acetyl) -B-D-glucopyranoside黄色粉末261〜263干燥野菊花4香叶木素diosmetin黄色粉末253〜255干燥野菊花5香叶木素-7-0- 3 -D-葡萄糖昔diosmetin-7-0- P-D-名1ucopyranoside黄色粉末251〜253干燥野菊花6异泽兰黄素 eupatilin黄色粉末232〜234干燥野菊花芹菜素7 apigenin黄色粉末347〜349干燥野 菊花表一1.2.3绿原酸绿原酸是一种缩酚酸，卫生部《药品标准》收录具有清热解毒、抗菌消炎的 中成药170种，均含有绿原酸口为主要成分。
绿原酸也是野菊花的一种主要活行成 分袁学勤等⑺用HPLC法测定5批不同产地的野菊花中绿原酸的含量，结果表明 差异显著1.2.4其他成分野菊花所含其他化学成分有棕扌闾酸、山崙酸甘油酯、多糖、B-胡萝卜素、蛋白 质、氨基酸、瞟吟、胆碱、水苏缄、糅质、维生素、叶绿素、微量元素（铜、镉、锌、钻、猛、 總、锂、硒、線、镁、钙等）不同品种和产地的野菊花成分差异较大1・3野菊花的药理作用研究1.3. 1对心血管的作用野菊花注射液灌流体兔心，有明显的扩张冠状动脉作用吴钉红等⑻研究比 较了 95%、50%、25%乙醇热浸及水提取的野菊花浸膏对麻醉猫的降压作用，发现降 压作用随乙醇浓度的降低而降低，水提物基本无降压作用；95%乙醇浸提物主要含 有野菊花内酯，黄酮背等水难溶物质，对麻醉猫，正常狗均有一定的降压效果，而 且降压作用缓慢，持久，是理想的降血压药物1.3.2抑菌与抗病毒作用任爱农等⑼对野菊花水提取物与挥发油的抑菌和抗病毒活性实验进行研究，结 果表明，二者均具抑菌和抗病毒活性其中水提取物对金黄色葡萄糖菌，大肠埃希 菌，绿脓假单胞菌的抑制作用均强于挥发油，而对肺炎链球菌的抑制作用则相反 野菊花水提取物较挥发油具有较强的抗病毒活性的作用。
1.3.3抗肿瘤作用金沈锐等通过野菊花注射液对人肿瘤细胞SMMC7721、PC3、HL60增殖的影 响的研究，表明野菊花注射剂在32ul/ml浓度下人肿瘤细胞PC3、HL60增殖有明显 的抑制作用，但对人肿瘤细胞SMMC7721增殖无明显影响1.3. 4对血小板聚集的影响石兰萍等^研究发现野菊花注射液对ADP诱导的雄性家兔颈动脉血小板聚集功 能有较强的抑制作用和解聚作用，结果表明野菊花注射液的抑制作用强度是丹参的 2.3倍，党参的3. 2倍，其解聚作用强度强于丹参，与党参相当，但三者的解聚作 用都不及各白的抑制作用1.3.5抗氧化作用李荣贵他研究发现水溶性野菊花多糖具有较强的清除活性氧白由基的能力严 亦慈等⑭研究表明野菊花水提液体外实验也表现出很好的抗氧化作用此外，还 有研究表明用乙醇提取野菊花中的黄酮类化合物，亦有显著的抗氧化作用，且抗氧 化作用随着药液浓度的增加而增强，具有明显的量效关系1.3.6解热作用通过对家兔进行解热作用的研究，表明野菊花注射液具有良好的解热效果1.3.7毒性作用野菊花注射液的急性毒性和亚急性毒性实验均表明野菊花毒性甚微1.4应用及不良反应目前野菊花临床多用于治疗肿瘤、高血压和高脂血等症，以及急慢性呼吸道 感染、泌尿生殖系统感染、急性乳腺炎、急性淋巴管炎以及感染性肝炎等各种感染 性疾病，对感冒、流行性脑膜炎也有一定预防作用。
野菊花注射液具光谱抗菌性， 在临床上对慢性感染性疾病有良好的疗效此外，口服或外用野菊花煎液用以治疗 皮肤痈度疗肿疗效显著临床实验表明，除部分人口服制剂可产生胃部不适，食欲 减退等症状外，不良反应少，对黏膜无刺激性，对人体心肺和肝肾功能亦无明显影 响，且慢性给药无蓄积中毒现象在饲料加工工业上，关于野菊花及其制剂用于家禽家畜的治疗，或以草代药 治疗家禽家畜疾病的报道不断出现刘汉儒作了野菊花制剂治疗奶牛乳房炎的报 道因此可以开发野菊花作饲料添加剂，拓展了野菊花的应用范围1.5高速逆流色谱简介高速逆流色谱(high-speed counter-current chromatography, HSCCC) 技术 是一种无固体载体的连续液-液分配色谱技术，其固定相通过重力场和离心力场作 用被保留在分离柱内M。