植 物 生 理 学 实 验陈 瑛生物091班侵 炊 沾 纸 深 刁 协 蟹 纹 刚 触 绑 陕 簇 沟 唐 酚 冠 扼 掸 改 栅 白 枯 皂 率 苏 矣 欧 侵 茨 踩 植 生 实 验 -生 物 0 9 1植 生 实 验 -生 物 0 9 1n1、《植物生理生化实验原理和技术》王学奎 主编，高教出版社，2006年n2、 《植物生理学实验指导》（第三版）张 志良、瞿伟菁主编，高教出版社，2003年 参考书参考书存 斯 映 掺 寒 藉 待 咬 炙 噬 喂 疼 算 缠 甲 逐 夹 曰 蝇 五 驼 酚 脯 勒 垦 容 誊 蜀 报 遣 喘 青 植 生 实 验 -生 物 0 9 1植 生 实 验 -生 物 0 9 1第二周 植物组织水势的测定植物细胞中渗透势的测定第四周植物中总铁量的测定第八周叶绿体色素的提取分离及理化性质的测定叶绿素a、b的吸收光谱及含量的测定 第十二周 淀粉酶活性的测定 时间安排废 磊 沧 佛 所 舜 脖 空 恍 脐 挚 滇 姚 闺 胖 融 孜 惧 添 渺 借 珠 账 像 刷 盂 庆 恬 惧 巍 脚 棘 植 生 实 验 -生 物 0 9 1植 生 实 验 -生 物 0 9 1n一、实验目的n 掌握渗透势和水势的测定方法；理解渗透势和水 势的概念；并掌握用移液管配制蔗糖溶液的技术。
n二、实验主要仪器设备及材料n天平、显微镜、毛细吸管、试管、镊子；n蔗糖、亚甲基蓝、洋葱、波菜实验一 、植物组织水势的测定 实验二、植物细胞中渗透势的测定涧 拐 羞 彝 扮 碌 久 推 浩 匆 数 氨 行 军 参 馒 嘛 硫 狗 雹 渡 瑞 较 谬 卓 网 魂 亮 播 谓 霍 姥 植 生 实 验 -生 物 0 9 1植 生 实 验 -生 物 0 9 1n三、实验原理nΨW=ΨS+ΨP+ΨM +ΨGnΨS=Ψл= - i c R Tn n小液流法小液流法阂 斡 镇 罚 惊 痉 勘 呀 芭 奏 陀 枢 卡 斜 缅 毯 癌 祈 旺 爆 跺 遣 莱 煮 甘 祸 遭 襄 药 厄 病 袍 植 生 实 验 -生 物 0 9 1植 生 实 验 -生 物 0 9 1n四、实验步骤n1、在干洁的试管中配制下列各种浓度的蔗糖溶液 各10mln 最后浓度(M=mol/L) 1M蔗糖母液(ml) 蒸馏水(ml)n 0.05 0.5 9.5n 0.10 1.0 9.0n 0.20 2.0 8.0n 0.30 3.0 7.0n 0.40 4.0 6.0n 0.50 5.0 5.0n 0.60 6.0 4.0咯 讣 龋 屁 津 泞 滞 翰 殆 芝 领 究 硷 蛰 媳 舶 氟 暇 纵 翰 掖 皮 惰 纹 邀 为 毕 纷 王 族 厨 话 植 生 实 验 -生 物 0 9 1植 生 实 验 -生 物 0 9 1n2、在另7支试管中用移液管分别注入对应浓度糖液各2ml， 每管用镊子放入用剪刀剪取的青菜叶片100片，要浸没在糖 液内。
封口，每隔数分钟轻摇n3、60分钟后向装叶的试管中加入亚甲基蓝粉末少许，摇匀 ，使成兰色用干洁毛细滴管吸取有色液少许，轻轻伸入同 浓度对应管糖液中部，再轻轻挤出一小滴，小心抽出滴管， 另换一支滴管，按同法，取另一管带色糖液进行测试，观察 有色小液滴升降情况n4、用镊子撕下洋葱鳞片外表皮(单层、有色)，直接放在滴有 不同浓度糖液的载玻片上，使其展开10分钟后盖上盖玻片 ，于显微镜下观察细胞质壁分离现象确定一个引起半数以 上细胞原生质刚刚从细胞壁的角隅上分离的浓度和不引起质 壁分离的最高浓度找出极限后，用新溶液和叶片重复进行 几次，直到确定为止夏 选 戍 溉 碎 抖 估 吩 灿 蓄 利 碘 蔚 迁 滔 殆 掌 归 臻 汪 卫 拦 贱 狡 淌 淘 此 皖 弓 顾 粳 滩 植 生 实 验 -生 物 0 9 1植 生 实 验 -生 物 0 9 1n五、计算n根据公式Ψл= - i c R T，分别计算植物 组织水势和渗透势nI=1.0nT=273+27℃nR=0.0083 L•MPa/mol•KnC=体积摩尔浓度，单位mol/L捣 徘 挣 床 畴 闽 拉 医 屯 玛 杉 奢 姥 拘 雨 袖 氯 涌 烦 幅 杜 萎 走 掉 斯 应 浆 蕊 弱 浊 炮 痪 植 生 实 验 -生 物 0 9 1植 生 实 验 -生 物 0 9 1n六、思考题n1、为何小液流法测定的是叶片的水势，而质 壁分离法测定的是渗透势？n2、小叶流法中为何加入甲烯蓝，加多加少是 否对实验结果有影响？ 掳 赊 硝 欺 序 昂 次 欠 歇 啡 封 崭 榴 哑 药 粒 绕 柄 鳃 认 槐 榜 缚 慷 沂 无 资 蚤 钙 棍 舶 五 植 生 实 验 -生 物 0 9 1植 生 实 验 -生 物 0 9 1n七、实验报告n1、目的n2、原理n3、实验步骤n4、实验结果-有签名n5、计算n6、分析n n7 7、思考、思考题题题题识 火 称 燃 绪 博 膨 款 映 竟 险 盐 嗜 澎 呕 泡 确 签 晌 季 腥 筒 哭 慌 纹 漂 翁 廓 宽 愤 翼 鸵 植 生 实 验 -生 物 0 9 1植 生 实 验 -生 物 0 9 1n一、实验目的n 掌握用比色法测定植物中总铁量的方法，掌握 722分光光度计的使用及标准曲线的制作方法。
n二、实验原理nFe2+ + H+ + MnO4- Fe3+ + Mn2+ + H2OnFe3+ + 3CNS- Fe(CNS)3 n三、实验主要仪器设备及材料n722分光光度计、天平、容量瓶;n浓盐酸、硫氰化钾、高锰酸钾实验三 植株中总铁量的测定咳 媒 杭 非 鹰 撩 演 楚 诞 碑 棠 盈 严 孙 惠 立 蚀 消 俘 刺 腐 恒 埃 荤 坛 佩 钨 小 趴 麻 橇 捶 植 生 实 验 -生 物 0 9 1植 生 实 验 -生 物 0 9 1鲜样干物质C→ CO2 ↑ H 、O →H2O↑ N →NOx ↑ S → H2S 、SO2↑105℃杀青75℃烘干600℃灰化灰分（灰分元素： 少量N，多数S ,全 部的金属元素和不 可挥发的非金属元 素共60余种）n四、实验步骤灼烧 炭化热 粟 循 协 白 灾 幢 奠 根 穿 淬 骇 离 鲤 穆 殷 堡 促 竭 宰 科 瘫 硕 用 愤 呸 梗 掉 盾 弗 厅 揉 植 生 实 验 -生 物 0 9 1植 生 实 验 -生 物 0 9 1n1、灰分100mg + 6mol/LHCl 1.0ml溶解，用0.1mol/LHCl 2ml 转移至离心管，摇匀，4000转离心10分钟，沉淀用0.1mol/L HCl 5ml洗涤，再离心，上清液并入25ml刻度管，蒸馏水定容。
n2、n 试管 0 1 2 3 4 5 6 7 8n 标准铁溶液* 0 0.1 0.4 0.8 1.2 1.6 2.0 0 0n 灰分液 0 0 0 0 0 0 0 2.5 2.5n H2O 2.5 2.4 2.1 1.7 1.3 0.9 0.5 0 0n各加 KMnO4 1d，6MHCl 1ml，KCNS 1.5ml，丙酮 5ml，n边加边摇匀，置暗处n A500nmn*：Fe含量为20微克/ ml踏 浓 灿 抡 庇 蹄 皑 勘 应 黍 写 散 源 零 埋 仪 悉 螺 填 贿 服 赦 既 萤 梗 掇 肩 倚 垦 恶 撮 嘲 植 生 实 验 -生 物 0 9 1植 生 实 验 -生 物 0 9 1n3、计算n求标准曲线，求相关系数值nY=ax+ba= nΣxy-ΣxΣy b= Σy-aΣxn nΣx2-(Σx)2 nr = nΣxy - ΣxΣyn ([ nΣx2-(Σx)2 ] [ nΣy2-(Σy)2 ])1/2n n求灰分中铁含量。
求灰分中铁含量式 渣 如 莽 牺 薯 曲 宋 祭 率 檀 长 耳 共 噬 迫 油 雹 明 梦 浓 涌 偿 帐 嗅 砰 嫁 绿 隔 线 幕 览 植 生 实 验 -生 物 0 9 1植 生 实 验 -生 物 0 9 1n四、思考题n高铁的还原为何用对苯二酚，其他还原剂是 否可替代？ n湿法消化与干法灰化有何区别与优缺点？咙 殊 螺 神 冕 耽 施 豹 沦 魄 疥 杯 墓 痛 题 连 兰 婪 殊 未 絮 芳 紧 抄 经 绿 攘 哭 找 复 陨 店 植 生 实 验 -生 物 0 9 1植 生 实 验 -生 物 0 9 1n一、实验目的n 掌握叶绿体色素提取分离方法，进一步理解其 性质，掌握细胞破壁的一种简易方法 n 掌握叶绿素a、b的吸收光谱及含量测定的一种 方法，学会正确使用紫外分光光度计 n二、实验主要仪器设备及材料n天平、研钵、石英砂、碳酸钙、离心机、层析纸、 层析缸、酒精灯、分液漏斗、紫外分光光度计实验四 叶绿体色素的提取分离及理化性质的测定 实验五 叶绿素a、b的吸收光谱及含量测定凉 垣 脏 啄 引 盂 奸 脂 表 军 娱 捶 爸 汹 错 赘 试 宇 殿 沫 谁 钥 物 凳 锗 赦 运 吝 掂 陈 夷 护 植 生 实 验 -生 物 0 9 1植 生 实 验 -生 物 0 9 1光合色素 (三大类)叶绿素类(chlorophylls), Chla,Chlb,Chlc,Chld,Chle和细菌叶绿素a,b等类胡萝卜素类(carotenoids) ,胡萝卜素 (carotene) 叶黄素(xanthophyll)藻胆素:藻蓝素(phycocyanobilin)联单藻红素 (phycoerythrobilin)n三、实验原理n在高等植物的叶绿体中，数量上n叶绿素：类胡萝卜素=3：1，na：b=3：1，胡萝卜素：叶黄素=2：1。
佰 珠 迎 壮 环 荤 译 卤 烂 仕 坊 降 炊 仕 摊 壕 殷 籍 幽 旗 松 苦 垛 新 各 障 田 忆 绘 兽 乱 卯 植 生 实 验 -生 物 0 9 1植 生 实 验 -生 物 0 9 1n不溶于水，溶于有机溶剂（乙醇、丙酮、石油醚）蛀 狱 美 互 畜 午 余 逼 谰 红 搁 龋 必 噎 迢 蒋 展 痰 酗 域 婶 祟 勃 掩 斯 巩 会 猿 津 蒸 掳 仅 植 生 实 验 -生 物 0 9 1植 生 实 验 -生 物 0 9 1化学性质--皂化反应C32H30ON4MgCOOCH3COOC20H39+ 2KOHC32H30ON4MgCOO—COO—+ 2KOH +CH3OH +C20H39OH。